【农业行业标准(NY)】 大豆异黄酮

1CS67.060
中华人民共和国农业行业标准
NY/T1252—2006
大豆异黄酮
Soybeanisoflavone
2006-12-06发布
2007-02-01实施
中华人民共和国农业部发布
本标准的附录 A、附录B和附录C都是规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。NY/T1252—2006
本标准起草单位：上海市农业科学院国家大豆工程技术研究中心上海研发中心、上海唯依大豆科技有限公司。
本标准主要起草人：胡传璞、顾晓君、胡涛、张丽蓉、陈俊兰、王楠。I
http：//foodmate.net1范围
大豆异黄酮
NY/T1252—2006
本标准规定了大豆异黄酮基本组分的名称、大豆异黄酮的产品定义、分类、技术要求、检验方法、检验规则和标签、标志、包装、运输、贮存。本标准适用于以食用大豆柏为主要原料生产的、主要成分为大豆异黄酮的粉状物产品，2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB191包装储运图示标志
GB2761食品中黄曲霉毒素B充许量标准食品卫生微生物学检验
菌落总数测定
GB/T 4789.2
GB/T4789.3
GB/T 4789.4
GB/T4789.5
GB/T4789.10
GB/T 4789.11
GB/T4789.15
GB/T5009.3
GB/T 5009.4
GB/T 5009.11
GB/T5009.12
食品卫生微生物学检验
食品卫生微生物学检验
食品卫生微生物学检验
食品卫生微生物学检验
食品卫生微生物学检验
大肠菌群测定
沙门氏菌检验
志贺氏菌检验
金黄色葡萄球菌检验
溶血性链球菌检验
食品卫生微生物学检验
霉菌和酵母计数
食品中水分的测定方法
食品中灰分的测定方法
食品中总碑的测定方法
食品中铅的测定方法
GB/T5009.22
食品中黄曲霉素B测定方法
GB7718
预包装食品标签通则
GB9683
复合食品包装袋卫生标准
GB14932.1食用大豆粮卫生标准
GB16740保健（功能）食品通用标准3术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。3.1
大豆异黄酮soybeanisoflavone
大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的一类次生代谢产物，属天然黄酮类物质，具有异黄酮类化合物的典型结构。
3.1.1大豆异黄酮苷
本标准中的大豆异黄酮苷，是大豆昔（daidzin）大豆黄苷（glycitin）以及染料木苷（genistin）三种苷的统称。
3.1.2大豆异黄酮[苷]
NY/T1252—2006
产品大豆异黄酮[苷1，是大豆昔（daidzin）大豆黄苷（glycitin）以及染料木昔（genistin）三种昔的总和。
3.1.3大豆异黄酮苷元
大豆异黄酮昔元，是大豆素（daidzein）大豆黄素（glycitein）以及染料木素（genistein）三种苷元的统称。
3.1.4大豆异黄酮[苷元】
产品大豆异黄酮［苷元]，是大豆素（daidzein）、大豆黄素（glycitein）以及染料木素（genistein）三种苷元的总和。
大豆皂苷soybean saponin
大豆皂苷是大豆生长过程中形成的另一类次生代谢产物，往往存在于大豆异黄酮产品中。它是由糖中的羟基与齐墩果稀缩合而成的一类结构复杂的天然皂昔化合物。4产品分类
产品按大豆异黄酮组分化学结构分为大豆异黄酮昔（gluoosides）和大豆异黄酮苷元（aglycones）二大类，每类文按各自成分组成分成四个产品。4.1大豆异黄酮苷
4.1.1大豆异黄酮[苷]
4.1.2大豆异黄酮［大豆苷]
4.1.3大豆异黄酮[大豆黄苷]
4.1.4大豆异黄酮[染料木苷]
4.2大豆异黄酮苷元
4.2.1大豆异黄酮[苷元]
4.2.2大豆异黄酮[大豆素]
4.2.3大豆异黄酮[大豆黄素]
4.2.4大豆异黄酮[染料木素]
5要求
原料大豆柏应符合GB14932.1的规定。5.1感宫指标
应符合表1的规定。
表1大豆异黄酮感官指标
滋味与气味
5.2理化指标
应符合表2的规定。
量粉末状，无结块现象
淡黄色或黄色
其有该产品的特殊香气，人口味苦，无异味无肉眼可见的杂质
粒度（80目筛下），%
水分，%
灰分，%
总砷（以As计），mg/kg
铅（以Pb计），mg/kg
黄曲霉素Bgkg
5.3主要成分指标
表2大豆异黄酮理化指标
大豆异黄酮昔类产品主要成分应符合表3的规定大豆异黄酮苷元类产品主要成分应符合表4的规定。表3大豆异黄酮苷类产品主要成分表产品名称
大豆异黄]［苔］
（以干基计），%
大豆异黄酮［大豆苷］
（以干基计），%2
大豆异黄酮［大豆黄昔]
（以干基计)，%
大豆异黄酮［染料木苷]
（以干基计）%2
产品名称
大豆异黄酮［苷元]
(以干基计)，%2
大豆异黄酮大豆素】
（以干基计），%
大豆异黄酮[大豆黄素]
（以干基计），%
大豆异黄酮［染料木素]
（以干基计），%
5.4微生物学指标
应符合表5的规定。
主要成分
大豆异黄酮苷
大豆皂苔
大豆昔
大豆黄苷和染料木苷
大豆黄苔
大豆苷和染料木苔
染料木营
大豆苷和大豆黄苔
表4大豆异黄酮苷元类产品主要成分表主要成分
大豆异黄酮苷元
大豆异黄酮酱
大豆素
大豆黄素和染料木素
大豆黄素
大豆素和染料木素
染料木素
大豆素和大豆黄素
品伙伴网httn：//foodmate指
NY/T1252—2006
NY/T1252—2006
菌落总数.cfu/g
大肠菌群，MPN/100g
霉菌，efu/g
醇母菌，cfu/g
表5大豆异黄酮微生物学指标
致病菌（指沙门氏菌、志贺氏菌、金色面蕾球菌、路血性链球菌）6检验方法
6.1感观检验
6.1.1形态、色泽、杂质
称取10g样品散放在白色平盘中，在自然光下，用肉眼直接观察。6.1.2滋味与气味
嘎其气味、品尝其滋味。
6.2理化检验
6.2.1粒度
称取10g大豆异黄酮粉，用80目筛网筛过。6.2.2水分
按GB/T5009.3规定的方法测定。6.2.3灰分
按GB/T5009.4规定的方法测定。6.2.4大豆异黄酮苷
按附录A规定的方法测定。
6.2.5大豆异黄酮苷元bZxz.net
按附录B规定的方法测定。
6.2.6大豆皂苷
按附录C规定的方法测定。
6.2.7总碑
按GB/T5009.11规定的方法测定。6.2.8铅
按GB/T5009.12规定的方法测定。6.2.9黄曲霉素B，的测定
按GB/T5009.22规定的方法测定。6.3微生物检验
6.3.1菌落总数
按GB/T4789.2规定的方法检验。6.3.2大肠菌群
按GB/T4789.3规定的方法检验。6.3.3霉菌和酵母
按GB/T4789.15规定的方法检验。食品伙网http://foodmate.net指
不得检出
6.3.4致病菌
NY/T1252—2006
按GB/T4789.4、GB/T4789.5、GB/T4789.10、GB/T4789.11规定的方法检验。7检验规则
7.1检验分类
7.1.1出厂检验
出厂检验项目包括：感官、水分、菌落总数、大肠菌群，以及表3、表4相应产品组分的第一项指标。7.1.2型式检验
常年生产的产品，每年进行一次型式检验，有下列情况之一时应进行型式检验。a）新产品投产时；
b）正常产品如原料，工艺有较大改变，可能影响产品质量时：c）长期停产后恢复生产时；
d国家质量监督机构提出型式检验要求时。型式检验项目包括本标准的全部项目。7.2抽样
7.2.1组批
同一班次生产的同一类型产品为一批次。7.2.2抽样方法和数量
从每批产品中随机抽取不少于3个最小包装单位样品。然后，用取样工具伸人每袋的3/4处取样，所取试样不应少于10g。
将选取的试样混匀，装人清洁、干燥带磨口玻璃瓶中。瓶上粘贴标签，并注明：生产班组、产品名称、批号及取样日期和地点。
微生物取样检验按无菌操作取样。7.3判定规则
7.3.1检验结果全部符合某一类型和等级时，判定为相应类型和等级。7.3.2检验结果全部符合本规定的产品判定为合格品。7.3.3检验结果中，微生物指标不符合本标准规定，判定为不合格品。8标签、标志、包装、运输、购存8.1标签
标签、标注内容应符合GB7718规定，还应根据本标准4及5.3的相应规定标注产品的名称和等级。
8.2标志
产品外包装储运图示标志应符合GB191的规定。8.3包装
内包装材料应符合GB9683规定，且密封保存。外包装应采用耐压，耐碰的材料制成。8.4运输
产品在运输时应轻拿轻放，严禁日晒，雨淋，不能与有毒、有害，有污染和不良气味的物品混运。8.5购存
产品应存放在阴凉干燥处，不能与有毒、有害、有污染和不良气味的物品混放，严禁日晒、雨淋。n
NY/T1252—2006
A,1方法内容与适用范围
附录A
【规范性附录
大豆异黄酮苷的检测方法
（高效液相色谱法）
本方法规定了大豆提取物中大豆异黄酮昔的检测方法。本方法适用于大豆提取物中大豆异黄酮苷的检测。A.2方法提要
大豆异黄酮的HPLC法检测是利用异黄酮各种待分离组分、流动相和C1：填料之间的吸附、分配及平衡值之差异，使各组分在色谱柱中滞留时间不同而进行分离的，然后用紫外检测器按时间顺序及峰面积进行定性、定量分析。
A.3仪器与设备
高效液相色谱仪，配有紫外检测器、柱温箱和色谱工作站：a
超声波震荡器：
分析天平：感量0.0001g
A.4试剂与标准品
95%乙醇：分析纯：
乙睛：纯度99.9%，色谱纯：
冰醋酸：纯度≥99.5%，分析纯；d)
水：用0.45um微孔过滤器滤过的双蒸水；e)
大豆苷标准品：含量99%：
大豆黄苷标准品：含量99%；
染料木苷标准品：含量99%。
A.5色谱条件与系统适应性实验
色谱柱：Cs，@4.6mm×250mm，5μm；流动相：乙晴：水：乙酸，11:89：0.1（体积比）；检测波长：UV254nm；
流速：2.0mL/min；
柱温：40℃；
f)进样量：20μL
为使系统符合检测要求，规定在上述色谱条件下，大豆苷和大豆黄苷以及染料木苷、丙二酰大豆苷（6-O-malonyldaidzin）各自组分的色谱峰不得彼此重叠，且在上述四个色谱峰之间不应有其他杂峰明显出现。
在丙二酰大豆苷峰出现后，使用B.5b)流动相洗柱15min，然后恢复A.5b）流动相平衡柱15min，6
http：//foodmate.n再进行上样。
A.6异黄酮标准溶液的配制
NY/T1252—2006
a）称取大豆苷、大豆黄苷、染料木苷各10mg土0.1mg，置于25mL容量瓶中，用80%的乙醇溶解后定容。此标准溶液中大豆异黄酮总浓度为1.2mg/mL，作为母液备用。精密吸取母液1.0.2.03.0.4.0和5.0mL溶液分别移至5只25mL容量瓶中，然后用80%b)鞋
乙醇定容。5个梯度标准液中上述3种组分标样的浓度分别为0.016.0.032、0.048.0.064和0.080mg/mL
A.7样品制备
大豆提取物样品混勾后取5g放人干燥器内真空干燥24h备用。a
称取上述绝干大豆提取物样品25mg土0.1mg，置于25mL容量瓶中，加80%乙醇约20mL完b）
全溶解后定容。然后取3mL~5mL，再用80%乙醇定容于25mL容量瓶中。吸取1mL溶液于离心管中，以10000rpm离心10min，取上层清液作为试样溶液备用。A.8测定及结果计算
按照A.5色谱条件，对A.6b）5个梯度标准液进行分析，并将相应数据输人色谱工作站。将A，7制备的样品溶液按A.5色谱条件进行分析，然后由色谱工作站对样品及标准样的色谱b)
据进行计算，即可得出样品中昔的含量G（%）。计算结果保留小数点后一位数字。c
平行测定结果以算术平均值表示，相对偏差≤2.5%。d
A.9结果表述
本测定结果表述为每100g绝干样品中含有大豆异黄酮的克数。httn·
NY/T1252—2006
B.1方法内容与适用范围
附录B
【规范性附录】
大豆异黄酮苷元的检测方法
【高效液相色谱法】
本方法规定了大豆提取物中大豆异黄酮苷元的检测方法本方法适用于大豆提取物中大豆异黄酮苷元的检测。B.2方法提要
大豆异黄酮的HPLC法检测是利用异黄酮各种待分离组分、流动相和C：填料之间的吸附、分配及平衡值之差异，使各组分在色谱柱中滞留时间不同而进行分离的，然后用紫外检测器按时间顺序及峰面积进行定性、定量分析。
B.3仪器与设备
高效液相色谱仪，配有紫外检测器、柱温箱和色谱工作站；a）
超声波震荡器：
分析天平：感量0.0001g。
B.4试剂与标准品
95%乙醇：分析纯：
乙：纯度99.9%，色谱纯；
冰醋酸：纯度≥99.5%，分析纯
水：用0.45um微孔过滤器滤过的双蒸水：大豆素标准品：含量99%；
大豆黄素标准品：含量99%：
染料木素标准品：含量99%。
色谱条件与系统适应性实验
色谱柱：Cls，@4.6mmx250mm，5pm流动相：乙睛：水：乙酸，20：80：0.1（体积比）：检测波长：UV254nm；
流速：2.0mL/min；
柱温：40℃；
进样量：20L
为使系统符合检测要求，规定在上述色谱条件下，乙酰大豆黄音（6\-O-acetylglycitin）大豆素，大豆黄素，乙酰染料木苷（6\-O-acetylgenistin）和染料木素各自组分的色谱峰不得彼此重叠，且在上述五个色谱峰之间不应有其他杂峰出现。8
http：/foodmate.B.6异黄酮标准溶液的配制
NY/T1252—2006
称取大豆素，大豆黄素、染料木素各10mg土0.1mg.置于25mL容量瓶中，用80%的乙醇溶解a
后定容。此标准溶液中大豆异黄酮总液度为1.2mg/mL，作为母液备用。精密吸取母液1.0.2.0.3.0.4.0和5.0mL溶液分别移至5只25mL容量瓶中，然后用80%b
乙醇定容。5个梯度标准液中上述3种组分标样的浓度分别为0.016、0.032.0.048.0.064和0.080mg/mL。
B.7样品制备
大豆提取物样品混后取5多放人干燥器内真空干燥24h备用，称取上述绝干大豆提取物样品25mg士0.1mg，置于25mL容量瓶中，加80%乙醇约20mL完b)
全溶解后定容。然后取3mL~5mL，再用80%乙醇定容于25mL容量瓶中。吸取1mL溶液于离心管中，以10000rpm离心10min，取上层清液作为试样溶液备用。B.8
B测定及结果计算
a）按照B.5色谱条件，对B.6b)5个梯度标准液进行分析，并将相应数据输入色谱工作站将B.7制备的样品溶液按B.5色谱条件进行分析，然后由色谱工作站对样品及标准样的色谱b)
数据进行计算，即可得出样品中苷元的含量G（%）。计算结果保留小数点后一位数字。d）平行测定结果以算术平均值表示，相对偏差≤2.5%。B.9结果表述
本测定结果表述为每100g绝干样品中含有大豆异黄酮的克数。9
http：//foodmate.neNY/T1252—2006
C.1方法内容与适用范围
附录C
（规范性附录）
大豆皂苷的检测方法
(减差法)
本方法规定了用减差法作为测定大豆皂苷的方法。本方法适用于大豆提取物中大豆皂苷的测定。C.2方法提要
用水饱和的正丁醇液萃取大豆提取物的水溶液，正丁醇萃取液干燥后可得大豆皂苷和大豆异黄酮的总量，然后用高效液相色谱法测定此总量中的大豆异黄酮的重量，再用减差法即可获得此总量中的大豆皂苷的重量。据此，可算出大豆提取物中大豆皂苷的含量。C.3仪器设备
真空旋转蒸发仪：
b）天平：感量为0.001g
超声波振荡器；
d）恒温烘箱：105℃
C.4试剂与材料
a）正丁醇：分析纯，≥99.0%：b重蒸水。
C.5测定步骤
将真空旋转蒸发仪的蒸发瓶置于105℃烘箱中，干燥2h后取出，放入干燥器内冷却至室温后a）
用天平称重（G1），精确至0.001g。称取样品5.0g左右，置于真空干燥器中真空过夜。充分混合后，取样品（G2)0.20g土0.001b
g，置于250mL烧杯中备用。
取200mL蒸馏水稀释上述备用样品，用超声波振荡器充分混合溶解后备用。C
将上述水溶解后备用样品转人500mL梨形分液瓶中，再将200mL用水饱和过的正丁醇溶液d
分两次清洗烧杯后再转入梨形分液瓶中。剧烈振播分液瓶3min后静置，使正丁醇相和水相明显分离。
收集梨形分液瓶下层的水相和上层正丁醇相各约200mL于烧杯中。然后，将烧杯中的水相倒e)
回梨形分液瓶中，再取200mL水饱和正丁醇液分两次充分洗涤此烧杯，将二次正丁醇洗液并入上述梨形分液瓶内。相同方法萃取上述所得水相两次，合并三次正丁醇相于真空旋转蒸发仪的蒸发瓶中蒸干备用。
将上述蒸发瓶连同蒸干物一起置于105℃烘箱中，2h后取出，放人干燥器内冷却至室温后用天f
平称重(G3),精确至0.001g，蒸发瓶中的蒸干物重量为（G3-G)。10
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。