【国家标准(GB)】 肠衣中氯霉素残留量的测定液相色谱-串联质谱法

ICS 67. 120. 99
中华人民共和国国家标准
GB/T 21165—2007
肠衣中氯霉素残留量的测定
液相色谱-串联质谱法
Deternination of chloramphenicol residues in casing-LC-MS/MS method
2007-10-31发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2008-04-01实施
本标准的附录A为资料性附录。
本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国汀.苏出入境检验检疫局。GB/T21165—2007
本标雅主要起草人：徐锦忠、吴斌、李丽花、沈崇钰、赵增运、丁涛、陈惠兰，张扬、蒋原、蔡宝亮陶宏錦。
1范围
肠衣中氧霉素残留量的测定
液相色谱-串联质谱法
本标推规定了肠衣中氯素残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。本标推适用于豚衣中氣霉素残留童的测定。2规范性引用文件
GB/T 21165--2007
下列这件中的条款通过本标推的引用弼成为本标准的条款。是注目期的引用文件，其随后所有的修改单不包括勘读的内容或修订版均不适用于本标推，然面，毁刷根据本标遇成协设的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用了丁本标推。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682—1992.neqISO3696：1987）3方法提要
试样加人内标后用乙酸乙酯提取，蒸干提取溶液，利用液相色谱-串联质谱仪测定，梯度洗脱去除基质于扰，内标法定量：
4试剂和材料
4.1水应符合GB/T6682规定的一级水。4.2甲醇,HPIC级。
4.3乙酸乙酯：分析纯。
4.4氛代氟霉素内标：纯度99%。4.5氯莓素标准物质：纯度299%。4.6氯露素标准储备踏液：0.1 tmg/mL。准确称取适量的氯聋素标谁物质（4.5),用甲醇配成0.1 mg/mI.的标推储备液。储备液贮存在4℃冰箱中,可使用,2 个月。4.7氛代氟霉素内标储备溶液：0.1mg/mL。谁确称取适量的氛代氯素标准物质（4.4)，用甲醇配成0.1 mg/mL的标摊储备液。储备液贮存在4C冰箱中。4.8氛代氯霉索内标工作落液：取适量内标储备液稀释放50.0ng/mL工作溶液，内标工作溶液在4℃保荐，
4.9氯霉索标准工作溶液：用空白样品提取液分别配成氟霉素浓度为 0.2 ng/tmL、0.5 Ig/iml.1.0 ng/ml-.2.0 ng/mL、5. 0 ng/ml、10.0 ng/tuL标准工作溶液，标准工作溶液中内标物浓度均为5.0.ng/mL。标准T作溶液在4℃保存，可使用一周5仪器
5.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。5.2分析天平:感量0.1mg和0.01g各台，5.3旋转蒸发器，此内容来自标准下载网
5.4旋涡混勾器。
5.5离心机。
GB/T 21165—2007
5.6移液器：10mL和200μL，
5.7离心管：50mL，具塞。
5.8浓缔瓶;50 mL。
6试样的制备与保存
6.1试样制备
将实验室样品绞碎均勾，分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶巾，密封，并做上标记。6.2试样保存
将试样乎一18℃下保存。
7测定步骤
7.1样品处理
称取5g试样，粘确到0.lg。置于50mL具塞离心管中，加人0.100mL50.0ng/mL的内标物（4.8），加入10mL乙酸乙酯，于旋涡混勾器上快速合2min，以2000r/tmin离心5min，收集上层清液于干净浓缩瓶中，再次加人6mL乙酸乙酯，于旋涡混勾器上快速貔合2min，以2000r/min离心5min，含并上清液，于40℃水浴中旋转蒸发至T，用甲醇+水（30+70)定容至1.0mL，溶液过0.45μm滤膜到进样瓶中,供液相色谱-中联质谱仪测定。7.2测定
液相色谱条件
色谱柱：ODSCig，5μm，150mm×2.1mm（内径），或相当者；a)
流动相:甲醇(A)+水(B),0 min~3.0 min 30%～~90% A,3.0 min~6.0 min 90% A,6.0 min-~6. 1 min 30% A, 6. 1 min--8.0 min 30% A;流速:0.2 mL/min;
样温;30℃：
进样量25 μL。
串联质谱条件
离子源：电喷雾离源（ESI），正离子监测；扫描方式：选择离子检测（SRM)；雾化气、鞘气为高纯氮气，碰撞气为商纯氧气；电喷雾电压、碰撞电压等自动优化至最佳值；定性离子对、定量离子对和碰撞气能量见表1。表1定性离子对、定量离子对和碰撞气能盘定性离子对(m/2)
321/176
321/152
321/194
326/157（内标）
7.3液相色谱-质谱测定
定量离子对(m/2)
321/152
326/157（内标）
碰气能量/ev
氯霉素标准工作溶液(4.9)在液相色谱-串联质谱设定条件下分别进样，以标准与内标物峰面积比值为纵坐标，T作溶液浓度（ng/mL.)为横坐标，绘制6点标准工作曲线，用标谁工作曲线对样品进行定量，样品漆液中氟霉素的响应值均应在仪器测定的线性范围内。在上述色谱条件下，氯爵素参考保留时间为3.60min士0.2min。氯等素标准物质色谱图和质谱图参见图A.1.2
7.4空白试验
除不加人试样外，均按上述步骤进行，8结果计算
结果用色谱数据处理机或按式(1)计算，计算结果需扣除空白值：R,ms
R。·m
武中：
样品巾氯霉素的度，单位为微克每「克(g/kg)；R
样品中氯霉素的峰面积与相应内标峰面积比值；素标品的质量，单位为纳克（g）；.
标谁品中氟霉素的峰面积与相应内标峰面积比值；-样品质量，单位为克（名）
检测低限和回收率
9.1检测低限
本方法对肠衣中氯霉素残留量的检测低限为0.1 μg/kg。9.2回收率
肠衣中氯掌素添加浓度及平均回收率(内标校正)的试验数据：在0.1μg/kg时，回收率范前为71.0%~130.0%；在0.3μg/kg时，回收率范围为91.8%~136.0%在1.0μg/kg时,回收率范围为93.7%-~134.1%GB/T21165—2007
GB/T21165—2007
151:935
TIC（总离产流）
321/152
326/1567
附录A
（资料性附录)
标准物质色谱-质谱图
保留时间：出.61
保南时间：3.61
保留时制：3.60
上76.000
氯霉素标准溶液的液相色谱-串联质谱的总离子流图A.1
和氣霉素与氧霉素内标的选择离子色谱图及选择离子棒状图GB/T21165-2007
版权专有侵权必究
书号：155066：1-30907
定价：
2002-5911z
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