【商检行业标准(SN)】 禽流感微量红细胞凝集抑制试验

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1182.22004
禽流感微量红细胞凝集抑制试验Haemtgglulination-inhibitiun lest fur avian influenza2004-06-01发布
中华人民共和国
国家质量临督检验检疫总局
2004-12-01实施
本标推的附录A考规范性附录。
本标准由区家认证认可监召管理委总会提业开归口，本标准起中单位中华人共和国联海出人境於验检疫与。本标准土要起草人：徐海溅、萨景山、潘文波，愿旁云、周恶波，三小，本标证系首改发布的山人境检赖控疫行业标准，SN/T F182.2-2004
离流感微量红细胞凝集抑制试验本标业现定用微其红细胞凝案指制试验检测离流速抗体试验力法。本标准适羽于含类零流感检度，疫情益测和流行病学证查，2试窄和材料
2.1试剂跑度
所有化学试剂均约分析纯、
2.2PH7.2.0,1mol/L磷醛盐缓治波（P8S)配市方法见附录A：
2.3红军跑泥
配制方法见际录A，
2.41%鸡红细胞基浮液
将鸡红组跑能代3S捞郑或1基弹滤。2.5标准抗原
离流H5.H7.[19等标泄抗速。
2.6标准血清
两流感H.i、H7、H等标油阳生血清和标准阴性血清，2.7症检血清
2.7.1无电来取免物血微，凝固后离心分高血胃F或一的二保什整用。SN/T 1182.2—2004
2.7.？除鸡外其余高的南清需先鸣三是还行在非持牙性斑案。与特异性避案的，血清按下列方法进行外理：每3am请加2鸡缅跑轻轻振商款置3an2tmir:离心min~in细跑沉案，取币吸时对的可供检。2.8器材
势盘大平，分折大平、离心、V型致益血献核，微型热器、叫测移波器，机锁军等3换作方法
3.1微量血凝试验
微量血斑试验见表1：
表 1 需流感微量血摄试验
扩京商医as
FBS/RL
垃原倍比弃：L
：5马红
作甩时间及迟它
判定举例
室量左右
1 H+++
SN/T 11B2.2—2004免费标准下载网bzxz
3.1.1在V型做量土凝极上，每孔加人PIS25L。3.1.2孔1切窝流标准抗原2元μT.支复次打充分准与，移出25μ至孔2;吹打混匀,移止25μL至3,表次炎拖作等量倍比帮至孔11,孔11奔去25mL，孔_2不如抗原设立为红维跑对瓶。3.1.3每孔加人FB251.。
3.1.4孔人1兴鸡红细服基浮袋25，即置型瓶炜器E振尚或于扫血凝板四面混句.3. 1. 5 亲源(约 20C:3下静置 4U min 在有;如果究温太高,可在 4亡 净需药些C min。 对照红细胞足明显的面点时进行抗原效价划定，完全血凝的抗原最高释释为该片原的血凝效价，的一个二链单位(HAL).
3.1.64HAU抗原的标定
根据3.1.：测定的抗原的而凝效价.算=H4i1抗原的稀率倍数、例划表1抗原效价为3. 1.6.
2（1：23）其4个单位扰原效价为2(1：82),将抗原稀释37倍3. 1. 6. 2 将 5 μ[. 含 HAII 的抗原月 F做等录烂比释密,使每孔<2: μ1.含有 2 HAU,1 HAL、0.H4:J2.3HA.每孔补加PS25uT..再加人12细跑21.判完血凝图像与期结果是否相等。 2 H4I,I,T HAIT 孔红细脂显亚出现充全凝案,L. 5 HA, 孔红细脂应出现 S)烂凝集,L. 25 HAU孔社细必点不鼠果。芳与，比不符，应重新配制抗原：见定效价，3. 2微量血筛抑制试验
微员血凝抑制试验见表2。
表2离变率血血距抑制试险
立流研市
肢性污情比移露e1.
2 rAt: /pl.
用时河及活层
别定均
单还<药 21. ℃)下静量的 4 nir.-+
3.2.1型微量血氯板，每孔人PR25nL3.2.2孔：加入被检血精23从T..作导量危比就释至开12，3.2.3年孔加入1HA的抗原1 混勾.3.2.4约20下静至少4尊置
3.2.5低加人1%鸡红细胞急浮液2>1.滤勾，实温（约23℃）下静置）mir左名如我空湿点高，可在4静置约69mi，持欢服红组时质是的愿点状时判定站果3.2.6每型定应垃已消变的用性血清、附性血清红细胞对照（仪含25T.1火鸡细肺和50LPHS)
3.2.7洁果划定
3.2.7.1社细题均与分收在凡底,再用、倾判血板时不流消判为完全凝集，记作一十一一；5%凝共！作十十一：为凝先三作一一：2浴凝集记作十红细吃案中在孔底中央呈区点、倾血凝板流甜典定为不格共或而凝动制，证作一。SN/T 1182. 22004
3.2.7.2控查各种对照。阴性血消滴度≤？\(11)，际性血消竭考不超过一个滴度，红细吸对照无自凝现象试验求立进行结果判定。3.2.7.3能完全批制HAU抗原的血清最高筛释度划为该血清的血凝报制满度。3.2.7.4血清的血凝抑制滴度2(111.判为相性。$N/T 1182.2—2004
A.1pH7.2.0.mol/L1BS
附录 A
（规范性附录）
试剂配
中液：磷醒二钠(12H:0)35.32g,氟化钠8.=g蒸腩水至1C22mL。7液：赚晚二乳钠（2H：0）15.50，氯化的8.5g加蒸铺水至CC2mL中液72ml.之液28ml.很勾121t当兰蒸火菌5min，室温或4供存，A,2氏液的配制
新萄静
坊酸(H)
燕北豹
渐润后，以10必扫楼晚调节pH牟5.1.分装117t高片蒸汽火菌15min.=女保存，A.3红细脆呢的起制
采柔鸡或无高流感新城变学血凝种制抗休的就年血，放人笋盘测民落中据勾，4心冰箱中保存备代，临升的用PBS洗涤3次5次，每欢以wlr/min离心5in：特血浆白细哒充分选去至上消藏清，帝上清液，留存沉淀的红跑，
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