【地方标准】 鹅细小病毒病的PCR诊断技术

DB32/T1773—2011 鹅细小病毒病的PCR诊断技术 前言 为规范鹅细小病毒病诊断技术，提高鹅细小病毒病诊断的灵敏度、稳定性、特异性，特制定本标准。本标准按照GB/T 1.1-2000《标准化工作导则 第1部分：标准结构和编写规则》要求编写。附录A、附录B、附录C为标准的规范性附录。本标准由江苏省农业科学院提出，起草单位为江苏省农业科学院，起草人包括刘宇卓、李银、魏雪涛、张敬峰。 1 范围 本标准规定了鹅细小病毒病PCR诊断的试剂材料和仪器设备、流行病学调查、临床症状及剖检、采样和样品处理及PCR鉴定、诊断结果判定等内容，适用于鹅细小病毒病的诊断。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682-1992 分析实验室用水规格和试验方法 SN/T 1193-2003 基因检验实验室技术要求 NY/T 541-2002 动物疫病实验室检验采样方法 DB32/T 1460-2009 鹅细小病毒的检测PCR方法 3 试剂材料和仪器设备 按照DB32/T 1460—2009进行。 4 流行病学调查、临床症状及剖检 4.1 流行病学 4.1.1 流行季节 鹅细小病毒病四季均可发生流行，但由于我国南方和北方养鹅季节不同、饲养方式不同，流行时间也有所不同。 4.1.2 易感动物及发病情况 主要侵害出壳后4日龄～20日龄的鹅，也可感染番鸭。10日龄～14日龄以内的雏鹅发病率和死亡率常高达95%～100%，15日龄以上的鹅发病率和死亡率有所下降，40日龄以上则只有个别发病死亡。 4.2 临床症状及剖检变化 通常分为最急性型、急性型和亚急性型三种。 4.2.1 最急性型 常发生于1周龄以内的雏鹅，通常无明显症状，突然倒地并死亡，病理剖检变化不明显，除肠道有急性卡他性炎症外，其他器官一般无明显变化。 4.2.2 急性型 常发生于1～2周龄的鹅，表现为食欲减少或丧失，行动迟缓，无力，站立不稳，喜卧，排出黄绿色稀粪，内含气泡或纤维片。张口呼吸，鼻孔有棕褐色或绿褐色分泌物，喙端发亚急性型多见于流行后期，2周龄以上的鹅，表现为精神萎顿，消瘦，拉稀，少食或拒食，鼻孔周围沾有分泌物和饲料碎片。剖检变化呈现败血症症状：肝脏肿胀淤血，肾脏肿大呈暗红色，心脏出现急性心力衰竭。病理特征为小肠出现急性、卡他性、坏死性肠炎，特别是在小肠的中段和下段，尤其是靠近卵黄柄和回盲部的肠段，外观极度膨大，类似香肠状，肠壁变薄但不形成溃疡。 4.2.3 亚急性型 多见于流行未期，病鹅表现为消瘦、拉稀，病程3～7天，幸存鹅在一段时间内生长不良。 5 采样和样品的处理及PCR鉴定 采样和样品的处理方法参照DB32/T 1460—2009。 6 诊断结果判定 6.1 临床诊断 当临床表现与4章流行病学、临床症状及剖检变化相符时，可初步判定为疑似鹅细小病毒病。 6.2 实验室诊断 参照DB32/T 1460—2009，若PCR结果为鹅细小病毒核酸阳性，则初步诊断为鹅细小病毒病。 6.3 结果判定 当符合6.1和6.2两个条件时，鹅即诊断为鹅细小病毒病。