【国家标准(GB)】 烟草和烟草制品 有机氯农药残留量的测定 气相色谱法

ICS65.160
中华人民共和国国家标准
GB/T13596—2004
代替GB/T13596---1992
烟草及烟草制品
有机氯农药残留量的测定
气相色谱法
Tobacco and tohacco producls-Determination of organochlorine pesticide residucs-Gas chromatographic method
(ISO1389:2000,M0D)
2004-12-14发布
2005-03-01实施
GB/T 135962004
一有机氯杀虫剂残留量的测定
本标准修改采用国际标摊1S04389：2000%烟草及烟草制品一气柯色谱法》。
本标准与IS043892000相比做了下列编辑性修政：--删除IS04389：2000的前菁：
----增加了\烟草辈取装置”的规格，本标准与GB3/T13596-~1992烟叶中有机氯杀虫剂残留量的测定方法相比主要变化如下~删除GB/T13596-1992的“主题内容与适用范围”（1992年版的第1章）增加了“范围”
删除GB/『13596--1992的\敢样”（1992年版的第2章）增加了\规范性引用文件见本版的第2章）；…-删除（GB/T13596—1992的“測定”（1992年版的第3章）；”。“增加了“原理”
-增加了“试剂与材料”
一一增加了“仪器\；
--增加「“采样及试样制斧”；增加了“操作步骤”，
增了“结果的泰述”
增加「“重复性、再现性和回收率”，修改厂GB/T135951992的\测试报告”（1992年版的第4章，本版的第10章）；一增加「附录 A“色谱图示例\；增加了附录R\实验室间试验研究结果”！增加了“参考义献”
本标难的附录A、射录B是资料性附录本标推由国家草专卖局提出，
本标推由全国草标准化技术委员会（1C:144)归口，本标准起草单位：国家烟草质鼠监督检验中心。本标准主娄起草人：徐亮、唐纲岭、张威、磨琥玲、宗维勇、刘惠民。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T135961992。范围
烟草及烟草制品
有机氣农药残留量的测定
气相色谱法
本标准舰恶了烟草及烟尊制品中有机氯农药残留量的气相色谱测定方法GB/T 13596---2004
本标雅适用于丧「中有机农药残留量的测，应在表「中列山的检测限以内测定各农药的綫留。
注1：对于不同类型的烟叶，本方祛不会因非有机氣农药物质产生的干扰色峰而对测死绪果造戒误差，但这并不是说本方法适用于所有种类、形态的烟草及烟草制品。因此,对未知原因造成的明显偏高的测定结果要加以仔细研究。有分析人员建议在这种情说下佳用质谱检测器确证色谱图中物质的化学结构，注2：ISC）175C中有表1 列出的有氯农药的俗名相对应的化学名和结构式，表 1 适合于本标准检测的杀虫剂及其检测限物质名称（英文》
Aldrin
Tras-chlordane
P·DDE
o,p-DIT
P,p-UDT
Dieldrin
c-Erndosulel
R-HCH 或α-HC
3HCH 或2BHC:
ICH或 BHC
-HCH或&BHC
Heptachlor
Hepiachlor ejpoxide
u.pTIDF or C.p II)
规范性引用文件
通用名称(GB48391992)
艾氏剂
反式氯丹
p.p滴滴伊
u,p滴滴
p.-滴滴沸
狄氏剂
α-毓丹
六氧苯
岸体·六六六
乙体-穴大穴
芮体-六八六
下体-六六六
环氧七氯
o.p-滴滴滴
力·产-滴滴滴
n-p-滴滴伊
检测限/(μg/g)
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款，凡是注月期的引用文件，其随后所有的修改单（不包勘误的内容)或修订版均不适用于本标谁然而，鼓励根据本标推达成协议的备方研究晟否叫使用这些义件的最新版本，月，是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。G3/T F0G.1卷烟第1部分:样
GH/T19616烟肯成批原料取样的—般原则(GB,T19616—2004,IS04874.2000.MOD)GB/T13596—2004
单标线吸筒
ISO648实验空用玻璃器
单标线容量瓶
IS01042实验用玻璃器皿
TSO3696分析实验案用水——规格及检验方法3原理
粉碎后的干燥样品与弗罗里硅上混合，丁索氏提取器中用正已烷萃取农药残留。无需进一步的净化处理，直接使用配有电子捕获检测器的气相色谱仪测定农药残留含量，4试剂与材料
水应为蒸馏水或同等纯度的水，至少应达到JSO3696一级水水平，所有试剂应适用于农药残留鼠分析。所有溶剂应依照与样品测定（苯取和气相色谱测定）相同的程序做空白试验以检香其纯度，落剂色谱图的基线1应没有明品会影响农药残留测楚的蜂出现，4.1正已烷，需熏蒸馏并验证。
4,2甲苯,需熏蒸馏并验证。
4.3标难物质：表1中所列物质的有证标难物质，纯度至少95%（质量分数）。注 3：反式氯丹用来措示氯丹的存在(它们为T艺混合物)。如果使用本方法检测到了 α-硫丹建议采用其他台适的方法测定α-硫丹、户-硫丹和硫丹硫酸盐的残葡总和：4,4内标储备液：称取0.02g灭蚁灵于100ml容量瓶中.精确至0.0001g，用正已烷（4.1)稀释至刻度。使灭蚁灵作为内标物。它是一种已不再使用的杀虫剂（参见附录A)。注4：灭蚊火是籍名，其化学名称是十二氯坏（5.2.1.o\-o.\*）dodecachloropent.acyck(5.2.1.0.0.o-）deume]
4.5内标r.作液：移取5ml.内标储备液（4.4)于200ml.容量瓶中，用正已烷（4,1)稀释至刻度，得到灭议灵浓度约为5μ/ml.的内标工作液。内标工作液应避光贮存于0℃～4℃条件下.可至少稳定六个月。4.6农药标准液
农药标准液避光驶存于0℃～4℃条件下，可至少稳定六个月。4. 6.1单一标准储备液
分别称取0.02g每种农药标准品（4.3)到各自的100ml.容量瓶中，精确至0.0001另，用正己烷（4.1)稀释定容.配制成浓度约为200g/mL的衔种农药单标准储备液。艺体-六六八在正已烷中溶解度低,应用甲萃(4,2)溶解。4.6.2混合猪储备液A
移取各农药单~-标准储务液5ml（4.6.1）于200ml容量瓶，用正凹烷（4.1)稀释定容，得到各农药标准品浓度约为5μg/mL的混合储备液AL乙体-六六六用用苯(4.2)解]。4.6.3混合储备滋13
移取混合储备液A(4.6、2)1 ml.于1UmL容量瓶中,用正已烷(4.1)稀释定容·得到各农药标准品浓度药为 (1. μg/ml. 的混合储备液 B,4.6.41作标准液
各移取混含储备液A4.6.2）和内标作液（4.5)1ml，于100mL睿量瓶中.用正已烧（4.1)稀释定容，得到各农药标准品及内标浓度约为0.05g/.的工作标准液。4. 7弗岁里硅士.150 μtm~-259 μm(60 目~% 百)。4.7.1弗罗里硅士的质量是实现本方法的关链因素之一。弗罗里硅土应有充分的活性以保留萃取液中的杂质.同时能够使农药残留洗脱。弗罗里硅土应先按4.7.2预处理。只有通过4.7.3验证的弗罗里硅土才可使用。
47？些验证的用+智干蓝拍模内马带怕中5的至心在无干燥祖的干愧器GB/T 13596—2004
中冷却后，转人圆底烧瓶，每100g加5mL水，在旋转烧瓶中充分混合约【b。避行4.7.3的验证之葩，应将弗岁里硅士置于密闭玻璃容器中平衡至少4% h。4.7.3通过萃取狄氏剂的止已烷溶检查弗罗里醛土的活性。该溶液中获氏剂浓度与含1 g/狄氏剂的烟草或焕草制品的取液浓度相当。若狄氏剂的回收率在95%以1，说明预处理后弗罗里硅土的活性是合适的。每饮制备弗罗里硅女均应进行活性检查。5攸器
玻璃器具使用前应充分洗涤，应避免使用塑料容器和密封油脂，否则会给溶剂引人杂质，容量瓶和移液管应达到1S0)10412和1SO648中A级品的要求。常用实验仪亚及下述各项：
5.1旋转蒸发仪，
5.2粉碎机.配2mm(10R)筛网
5.3烘箱，鼓风式，
5.4马弗炉，
5.5电热套
5.6索氏提取器,用于连续举取（见图1），34号磨：1
一试料与弗罗男硅.的混合物;
2··弗罗里硅土；
3——1 号玻璃滤片,
图1烟草萃取装置
24 号座[1
GB/T 13596—2004
5.7回流冷凝管。
5.8T燥器。
5.9石英地埚。
5.10气相色谱仪
按照制造商操作手册运行气相色谱仪，进样口、柱箱和检测器应分别配有独立的如热单元。以下条件适合于某一型号的仪器，供参考。采用其他条件应预先验其适合性。）温度
进样口温度应为180℃～210℃，检测器温度应为20340。用其他任何条件应保证所有检测组分能很好的分离，且色谱图与示例（参见图A.1)相似。合适的条件如下：一初始温度：40℃：
初始时间：2min:
-程序升温1:以20℃/min速率由40℃升至150℃；程序升遮2:以3℃/min速率山 150℃室270℃；顶时间：在270℃保持15min：
总运行时间：62.5min。
b）左流逆率
报据议器操作手册及分析人员的经验设定气流速率，合适的气流速率如下！载汽：氢，4ml/mit;
一一尾吹气：氮气.30 ml/min;
.隔垫吹扫5ml/min
--分流流量:30 mL/minm
c）进样模式
进样量2μL，不分流进样，进样后分流搁关闭1min。5.10.月逃样方戏
白动逃样器或其他合适的进样装置。对于手动进样,推荐使用进样体积在 1 μL~5 μL之间的微量注射器。进样前,用正已烷洗针至少10次，用待测液洗针五次，进样后，用正已烷洗针五次。5.10.2色谱柱
推荐使用熔融石英毛细管柱,长 30 m,内径 0. 32 mm，固定相DB-5(5%甲基苯硅氧烷),膜厚0,25μtl。色谱应能使所有被测组分达到很好的分离度如示例色谱图所示（参见图A.1)。5.10.3检测器
使用电了捕获检测器,灵敏度应达到能够检出进样量 2 μL,浓度 0.00 5 μg/mL 的 力-TI)T(峰高两蓓于基线噪音），
6采样及试样制备
6.1采样
烟叶抽样依据GB/T19616，卷烟灿样依据GI3/T 56U6.1。注意确保抽取的样品应能代表被检产品。
6.2试样制备
烟叶（或烟丝）放入烘箱，50%℃下保持2h，烘后水分应为5%左右。研磨样品,过2 mm筛网(5.2).注意研磨温度不应超过 50℃。荠接收的样品已研磨.应确保其水分含量不超过10%。
试样应在密闭容器中避光保存，如果谢试前需存放一个月以上，应放人冰箱内于一8℃以下保存。7操作步骤
7、1试料
GB/Y13596—2004
称取5名试料于50mL烧杯中，精确金0.01加人5处理后的弗罗里硅土（4.7），充分混合。然后按 7. 2 和 7. 3 所述步骤操作。7.2萃取
向索氏提取器中加人5%处理后的弗罗里硅士（4.7），转移按7.1准备好的试料到弗罗里硅土上：注意不要混合，以彩成被此独立的两层，对于回收率验证试验，在此步骤用移液管移取适量的农药标准溶液·加在试料层顶部。移取60)ml.正已烷（4.1)和1rmL闪标工作液（4.5）到合适的圆底烧瓶（容积150ml.~250mL）。安装素氏提取器，确保存一连接处密封良好，打开电热套(5.5)加热。调节加热湿度和索氏提取器上的旋塞使回流速度至少达到200mL/h。调节旋塞使正已烧波面恒定保持在试料以上、并保持圆底烧瓶中溶剂不被蒸干，萃取时间4.5h。萃取结束后.冷划至少30min。用萃取液进行气相色谱分析，无需定容。7.3检测器线性度的捡查
分别移取10ml.Fml.、lml.混合储备液A（4.6.2）十三个100ml容量瓶中，每个容量瓶移人1mL.内标I.作液（4.5）.用正已烷定容（4.1），取100ml.和200mL容量瓶各只，分别移人1mL混合储备液B(4.6.3).100mL容量瓶加人1mL内标T作液（4.5）、200rnL容量瓶加人2ml内标工作液（4.5）,用正已烷定容，各游液农药浓度分别约为0.5μg/ml.、0.25μg/ml.、0.(5μg/ml0. 005 μg/ml.0.002 5 μg/mL.这系列溶液用于检查电子获检测器的响应足否呈线性。检查只需在初次使用检测器或检测器及其相关电路维护之后进行。
7.4标准曲线
如果检测器的啊应呈线性，可以采用单一水平标谁曲线。单一水平标准曲线应使月工作标准液(4.6.4)。
7.5气相色谱测定
打开气色谱仪（5.10），平衡系统，用工作标准液（4.6.4)进样三次检查结果的重复性，单个结果的编差不应超过平均值的二5%。每个样品进样两次，出标准曲线得出单个测定值，计算平均值，工作标准液和样品萃取液的示例色谱图参见图A,1和图A.2所示。8结果的表述
内标法计算农药含量。
每个农药的相应嘲应系数E。由或(1)讨算：EPA
As\-.-工作标推液（4.6.4)农药的峰商积或峰商：A..工作标准波内标（灭蚁灵）的峰面积或峰高cs下作标推液农药的浓度，单位为微克每管升（pg/mL.)rr……工作标推液内标的浓度，单拉为微克每毫升（g/ml）。以干基计的农药残留量R，以微克舞克表尔由式（2)计算：R - A:5:00-10
....(2)
GB/T13596—2004
式中：
A.—一样品茶取液（7.2)农约的蜂面积或离：A“-样品萃取波内标的峰面积或峰高；Qi—萃取剂内标的质量,单位为微克(rg)约 5 μg);m——试粉质量，单位为克（g）…-样品的水分白分含量.%（质量分数）。9望复性，再现性和回收率
本方法精度的共同试验研究结果参见附录B10试报告
测试报告应包含采用的方法和得到的以干基计结果（g/g）。应分别列出每种农药的残留量。报告还应包含本方法末规定的，或是选择性的操作条件，以及可能对结果产生影的其他情说报告应包含样品的唯一性资料。2
140000
100000
六氮莱；
.--- HCH.
-$-HCH;
七氮；
民剂：
8- Heptachlor epoxidet
氯丹，
附录A
(资料性附录）
色谱图示例
LOR'LT
11--- α-硫丹
12—一孜民剂;
3.- ...DDE,
灭蚊灵。
图 A. 1每种农药浓度 0, 05 μg/mL 工作标准溶液的色谱图GB/T 13596—2004
GB/T13596—2004
snoa eav
140 000
120000
100 00
60 000
40 000
20 000
无农药残留烟草样品的色谱图
你准技意
附录B
（资料性附录）
实验室间试验研究结果
CB/T13596—2004
-项由12个实验室参加,用四个衣药添加水--样品（、1}2.F3、F)逊行的共试验研究得出了表B.1所列出的平均回收率(Rec.）、迅复性标推偏差(S,)租最现性标准偏差(Sa）表B.1共同试验研究结果
农药名称
甲体-六六六
乙体-六六六
内体-六穴穴
丁体-八六八
穴氯苯
义氏剂
环氧-七氯
反式氯丹
n--滴滴
α-硫bzxz.net
狄民剂
产-滴滴拼
异秋民剂
2毓丹
0.力-滴滴滴
滴滴滴
o,p-滴泡溝
p+p滴滴
添加量：
(ug/g)
添加量/Rec.
(ug/g?
13271.5101
119: 2.5093
19.3.5100
1324: 3. 5000
15 29 0. 5.25
1230. 4975
112125
. 1000
c, 1005 1
18: 0. 9951
1015: 1. 20)
161 1.C00
36:37！
105 6 : 1 1. 0850
添加量
1510:00
1104.9750
10 :81 5.050
s :20: 1. (100 :
1018: 1.0150
15 21 5.6000
1(0G. 250)
225, t:25)
26！43
控测限/
(trg/g)
每个实验室对每个添加水平的样品进行门两次测定，凶此在每个添加水平上每种农药共有48个测定结果。详继的统计评价报告见参考义献[3除表B.2所列17种农药外，对异狄氏剂和3硫丹也进行了共同试验研究参考文献_3|的结论指山这两种农药不活于采用本方法分板GB/ 13596—2004
甲体-六六次
乙体六八六
内体-六六六(林丹)
「休-六六六
人氯举
艾氏剂
环斑七氮
反式舞丹
0.-滴滴伊
秋氏剂
滴滴伊
0.拉滴滴滴
力，β-滴滴
0.-润滴潮
.滴漓递
表B.2依据[JPAC(国际理论和应用化学联合会规则命名表依据IUPAC规命名
1.3.5/2.1,6-六氣坏二烷
1.2.4,3/3,6-六氯环已烷
1,2,3,1,3,6-六氛环包烷
1,2.3./4,5,6-六氯环已烧
1,4,5,G,7.8.8-七氯-3+4.7,7r-四氧-4.7-亚甲基节(1R,1S,4a5,5S,5R,8aR)-1,2,3,1.10,10-六氟-1,4,4a,5,8,8a-六氢-1,4 ± 5,8-二甲桥兼1,4,5,5,7,8,8七氯2,3环氧34，4,7,74四氢-4,7亚甲基1,2,4+5,5.7,8.8-八氯-2.3,3u,4.7,7α六氢-4.7-亚用基站1,1-二氯-2-(2-氯苯基)-2-(1-氯苯基)乙烯(1+4+6,7,7-六氯-5,9,10-三降球片-5-衡-2,3-亚基-二亚甲基)亚硫酸盐-(1R+4S,4αS,5R,6R,7S,8R,8aR)-1.2,3.4,10.10--1,4.4α.5,6,7,8.5八氢-6,7-环氧1,4:5,8-二亚甲年蔡
1,1-氯-2.2...(4 氯苯基)乙烯
1,1氯 2.(2氯苯基):2 (4氯苯基)乙烷1,1—氯-2,2(4氯苯基）乙
1,1.1-三熟-2-(2-氯萍基)-2-(4-氯苯基)乙烷1,1.[-二氯-2,2-二(4-氯答基)乙烷W
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