【水产标准】 贝类包纳米虫病诊断规程

中华人民共和国水产行业标准

SC/T 7230—2019

贝类包纳米虫病诊断规程

Code of diagnosis for bonamiosis of mollusks

2019-08-01 发布 2019-11-01 实施

中华人民共和国农业农村部 发 布

前 言

本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由农业农村部渔业渔政管理局提出。

本标准由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC 156)归口。

本标准起草单位:中国水产科学研究院黄海水产研究所、全国水产技术推广总站、深圳海关。

本标准主要起草人:杨冰、白昌明、刘莹、黄健、王崇明、李清、万晓媛、史成银、李晨、辛鲁生、余卫忠。

贝类包纳米虫病诊断规程

1 范围

本标准给出了贝类包纳米虫病(bonamiosis)诊断所需试剂和材料、器材和设备，规定了采样、PCR检测和综合判定的要求。

本标准适用于贝类样品中牡蛎包纳米虫(Bonamia ostreae)和系蛎包纳米虫(Bonamia exitiosa)感染的流行病学调查、诊断、检疫和监测。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

3 缩略语

下列缩略语适用于本文件。

bp:碱基对(base pair)

DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid)

dNTPs:脱氧核糖核苷三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate)

EB:溴化乙锭(ethidium bromide)

EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid)

PCR:聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)

SDS:十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate)

Taq:水生栖热菌(Thermus aquaticus)

TE:Tris 盐酸和 EDTA E缓冲液(EDTA Tris · HCl)

Tris:三羟甲基氨基甲烷(tris hydroxymethyl aminomethane)

4 试剂和材料

4.1 除非另有说明，标准中使用的水为蒸馏水、去离子水或相当纯度的水。

4.2 无水乙醇:分析纯。

4.3 TE缓冲液按附录A中A.1的规定执行。

4.4 抽提缓冲液按附录A.2的规定执行。

4.5 蛋白酶K按附录 A.3的规定执行。

4.6 10 mol/L乙酸铵按附录A.4的规定执行。

4.7 Tris饱和酚(pH≥7.8):分析纯。

4.8 酚/氯仿/异戊醇(25:24:1):分析纯。

4.9 氯仿/异戊醇(24:1):分析纯。

4.10 1×电泳缓冲液按附录A.5的规定执行。

4.11 70%乙醇按附录 A.6 的规定执行。

4.12 dNTP(各2.5 mmol/L):生化试剂，含dATP、dTTP、dGTP、dCTP各2.5 mmol/L的混合物，