【农业标准】 辣椒抗病性鉴定技术规程第2部分：辣椒抗青枯病鉴定技术规程

中华人民共和国农业行业标准

NY/T 2060.2—2011

辣椒抗病性鉴定技术规程
第2部分：辣椒抗青枯病鉴定技术规程

Rules for evaluation of pepper for resistance to diseases—
Part 2: Rule for evaluation of pepper for resistance to bacterial wilt

2011-09-01 发布2011-12-01 实施

中华人民共和国农业部 发 布

前 言

NY/T 2060《辣椒抗病性鉴定技术规程》分为5个部分：

——第1部分：辣椒抗疫病鉴定技术规程；

——第2部分：辣椒抗青枯病鉴定技术规程；

——第3部分：辣椒抗烟草花叶病毒病鉴定技术规程；

——第4部分：辣椒抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程；

——第5部分：辣椒抗南方根结线虫病鉴定技术规程。

本部分为NY/T 2060的第2部分。

本部分按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。

本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提出。

本部分由全国蔬菜标准化技术委员会(SAC/TC137)归口。

本部分起草单位：中国农业科学院蔬菜花卉研究所。

本部分主要起草人：杨宇红、谢丙炎、冯兰香、杨翠荣、龚慧芝、苗振川、陈国平。

辣椒抗病性鉴定技术规程
第 2 部分：辣椒抗青枯病鉴定技术规程

1 范围

本部分规定了辣椒抗青枯病鉴定的术语和定义、接种体制备、室内抗性鉴定、病情调查、抗病性评价以及鉴定记载表格。

本部分适用于各种辣椒(Capsicum annuum L.)资源对疫病抗性的室内鉴定及评价。

2 术语和定义

NY/T 1858.4—2010界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

2.1 辣椒青枯病 pepper bacterial wilt

由青枯雷尔氏菌[Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.]引起的发病初期顶端叶片中午萎蔫，早晚恢复，随后下、中部叶片凋萎，数天后整株急剧萎蔫，但叶片仍为绿色，呈现青枯症状；病株的茎基部及根部维管束变褐等症状的辣椒上传病害。

3 青枯病菌接种体制备

3.1 病原物分离

从发病植株根部的褐色维管束组织中，用常规稀释分离法或平板划线分离法分离青枯病病原物。分离物经寄主范围、培养性状、生理生化反应和形态学鉴定确认为青枯雷尔氏菌后，再进行分离物纯化和致病性测定，并保存备用。

3.2 生理小种鉴定

对用于抗病性鉴定接种的病原分离物进行生理小种的鉴定，鉴定方法参见附录 A 中 A.2。

3.3 接种体繁殖和保存

3.3.1 接种体的繁殖

将保存在灭菌蒸馏水中的青枯菌落摇匀，挑取一接种环菌液在 TTC 培养基平板上划线，30℃培养 36 h～48 h后，选取较大、边缘较宽、中央粉红色、似有流动感的菌落(毒性菌落)转移到葡萄糖蛋白胨液体培养基中，在同样温度下振荡培育 16 h，加适量无菌水配成接种悬浮液。

葡萄糖蛋白胨液体培养基的制备：葡萄糖 5 g，蛋白胨 10 g，水解酪蛋白 1 g，蒸馏水 1 000 mL，酸碱度调节到 pH7.2，高压灭菌(121℃, 20 min)。

TTC固体培养基的制备：在葡萄糖蛋白胨液体培养基配制中增加琼脂 18g，并在培养基灭菌后冷却至55℃时，加过滤灭菌的 1%的 2,3,5-三苯基氯化四氮唑水溶液，使终浓度为0.005%，摇匀。

3.3.2 病原物保存

将 TTC 固体培养基斜面上的新鲜青枯病菌用灭菌蒸馏水洗下，或者挑取菌落放入灭菌蒸馏水中，在室温下保存。

4 室内抗性鉴定

4.1 鉴定室