【国家标准】 食品安全国家标准 食品营养强化剂 5-单磷酸胞苷(5-CMP)

中华人民共和国国家标准
GB1903.33—2022
食品安全国家标准
食品营养强化剂
2022-06-30发布
5'-单磷酸胞苷（5'-CMP）
2022-12-30实施
中华人民共和国国家卫生健康委员会国家市场监督管理总局
1范围
食品安全国家标准
食品营养强化剂
5-单磷酸胞苷（5-CMP）
GB1903.33—2022
本标准适用于以酵母核糖核酸（RNA）为原料，用核酸酶酶解生产制得的食品营养强化剂5'-单磷酸胞苷。
化学名称、分子式、结构式和相对分子质量化学名称
5'-单磷酸胞苷（5'-胞苷酸、5'-CMP）分子式
CHiNO:P
3结构式
相对分子质量
323.20（按2018年国际相对原子质量）技术要求
感官要求
感官要求应符合表1的规定。
表1感官指标
结晶或结晶性粉末
检验方法
取适量试样置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，观察其色泽和状态
理化指标
理化指标应符合表2的规定
5'-单磷酸胞苷（CH14NsO:P)（以干基计）w/%紫外吸光度比值
水分，w/%
pH(1%水溶液）
铅(Pb)/(mg/kg)
总砷（以As计)/（mg/kg)
微生物指标
A250/A260
A280/A260
微生物指标应符合表3的规定
理化指标
98.0~102.0
0.41～0.49
2.03～2.17
菌落总数/（CFU/g）
霉菌和酵母菌/(CFU/g)
沙门氏菌
微生物指标
GB 1903.33—2022
检验方法
附录A中A.3
附录A中A.4
附录A中A.4
GB5009.3卡尔·费休法
附录A中A.5
GB5009.12或GB5009.75
GB5009.11或GB5009.76
检验方法
GB4789.15
A.1一般规定
附录A
检验方法
GB 1903.33—2022
本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682中规定的三级水。试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液A.2鉴别实验
按GB/T6040规定方法执行，产品红外光谱应与标准品红外光谱（标准品红外光谱图参见附录B）一致。
A.35'-单磷酸胞苷（CgH14N3O:P)（以干基计）的测定A.3.1试剂和材料
A.3.1.1水：符合GB/T6682—2008的一级水，A.3.1.22mol/L氢氧化钠溶液：称取40g固体氢氧化钠于500mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，摇匀。
A.3.1.30.05mol/L磷酸二氢钾溶液：称取6.8045g磷酸二氢钾（KHzPO4）于1L容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，摇匀后用0.45um微孔膜过滤。使用前用超声波超声脱气30min。A.3.1.45°-单磷酸胞苷标准物质（纯度≥98%）。A.3.1.55'-单磷酸胞苷标准储备液：精确称取5-单磷酸胞苷标准物质100.0mg于50mL容量瓶中，用水溶解并加人2mol/L氢氧化钠溶液1滴～2滴助溶，定容至刻度，混合均匀，密封后贮于4℃冰箱中备用。
A.3.1.65-单磷酸胞苷标准使用液：准确吸取1.0mL5'-单磷酸胞苷标准储备液于50mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。进样前用0.45m微孔膜过滤。仪器和设备
高效液相色谱仪（紫外检测器）。A.3.2.1
分析天平（感量0.0001g）。
参考液相色谱条件
色谱柱：C18（4.6mm×250mm，5μm）或相当型号色谱柱。A.3.3.1
流动相：0.05mol/LKH,PO4溶液+甲醇=95+5。A.3.3.3进样量：20μL。
A.3.3.4流速：0.8mL/min。
A.3.3.5紫外检测波长：254nm。A.3.3.6柱温箱温度：25℃。
A.3.4试样制备
GB1903.33—2022
样品储备液：精确称取样品100.0mg于50mL容量瓶中，用水溶解并加2mol/L氢氧化钠溶液1滴～2滴助溶，定容至刻度，混合均匀。样品使用液：准确吸取1.0mL样品储备液于50mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。进样前用0.45um微孔膜过滤。
A.3.5测定
按A.3.3的色谱条件将5'-单磷酸胞苷标准使用液和样品使用液分别进样。根据标准品的保留时间，确定样品5'-单磷酸胞苷的色谱峰。根据样品的峰面积，以外标法计算样品中5'-单磷酸胞苷的含量。
A.3.6结果计算
5'-单磷酸胞苷含量（以干基计)的质量分数w1按式（A.1)计算。A,×ms×(1-r)
A×m×(1-r:)
式中：
样品使用液5'-单磷酸胞苷的峰面积；标准物质5-单磷酸胞苷的质量，单位为克（g）；标准物质5'-单磷酸胞苷的水分，%；A标准使用液5'-单磷酸胞苷的峰面积；样品5'-单磷酸胞苷的质量，单位为克（g）；r;
样品5'-单磷酸胞苷的水分，%。X100%
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过0.5%。紫外吸光度比值的测定
试剂和材料
盐酸溶液：0.01mol/L。
仪器和设备
紫外分光光度计。
A.4.3分析步骤
.（A.1)
吸取样品储备液（A.3.4）1.0mL于100mL容量瓶，用盐酸溶液定容至刻度，摇勾。用紫外分光光度计分别测定250nm、260nm、280nm波长处的吸光度。用盐酸溶液作空白对照。
A.4.4结果计算
250nm吸光度和260nm吸光度的比值X，按式（A.2）计算。A250
.（A.2）
式中：
A250———250nm处样品的吸光度；A260——260nm处样品的吸光度。在波长280nm和260nm处的吸光度比值X2按式（A.3）计算A280
式中：
A280————280nm处样品的吸光度；A260—260nm处样品的吸光度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过2%。pH的测定
仪器和设备
酸度计（分度值0.01pH)。
分析天平（感量0.01g）。
超声波清洗器
分析步骤
GB1903.33—2022
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称取1.0g样品于250mL锥形瓶中，加100mL水，在超声波清洗器中超声使之完全溶解，冷却至室温，然后用酸度计测定溶液的pH。同一样品两次测定值之差不应超过20%。5
附录B
5'-单磷酸胞苷标准红外光谱图
5'-单磷酸胞苷标准红外光谱图见图B.1。40
图B.15'-单磷酸胞苷标准红外光谱图082
GB1903.33—2022
波数/cm-1
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