【YY医药标准】 解脲脲原体核酸扩增检测试剂盒

ICS11.100
中华人民共和国医药行业标准
YY/T1256—2015
解脲脲原体核酸扩增检测试剂盒Ureaplasma nucleic acid amplification detection kit2015-03-02发布
国家食品药品监督管理总局
2016-01-01实施
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草YY/T1256—2015
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任本标准由国家食品药品监督管理总局提出。本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136）归口。本标准起草单位：中国食品药品检定研究院本标准主要起草人：王玉梅、刘艳、高尚先I
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1范围
解脲脲原体核酸扩增检测试剂盒YY/T1256—2015
本标准规定了解脲腺原体核酸扩增检测试剂盒（以下简称试剂盒）的术语和定义，技术要求，试验方法、标识、标签和说明书、包装、运输和贮存等。本标准适用于检测人泌尿，生殖道，呼吸道中解脲腺原体的核酸扩增检测试剂盒，采用的技术方法有实时PCR荧光法、恒温扩增法、PCR膜杂交法、基因芯片法等。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T191包装储运图示标志
YY/T0466.1医疗器械用于医疗器械标签、标记和提供信息的符号第1部分：通用要求3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
脲原体ureaplasma
群无细胞壁的最小的原核细胞型微生物，真核生物的专性寄生菌，脲原体属，以能利用自身的尿素酶分解尿素后以提供代谢的能源而得名。注1：从表型和基因型上，目前将脲原体14个标准血清型菌株分为两大生物群（或完全独立的物种）：微小豚原体（Ureaplasmaparvum）和解腺脲原体（Ureaplasmaurealyticum），生物群1（对应微小脲原体）包括1血清型3血清型、6血清型及14血清型；生物群2（对应解脲脲原体）包括：2血清型、4血清型、5血清型、7血清型、8血清型、9血清型、10血清型、11血清型、12血清型及13血清型。注2：微小脲原体是新近从解脲脲原体分出的生物变型，传统上仍沿用解脲脲原体，ATCC也做为解脲脲原体储存；本标准所指解腺腺原体包括微小腺原体和解腺腺原体。4命名，分类和组成
4.1命名
解脲腺原体核酸扩增检测试剂盒（方法学）。4.2分类
可按如下方式分类：
a）根据采用的方法学原理分为：实时荧光PCR检测试剂盒、恒温扩增检测试剂盒、PCR杂交检测试剂盒、基因芯片检测试剂盒等：b）根据对试验结果的判定可分为：定量和定性。1
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4.3组成
检测试剂盒应包括核酸提取、核酸扩增及产物分析试剂组分，如核酸扩增检测试剂盒内不含有核酸提取组分，应由生产企业说明或指定提取试剂盒。5要求
5.1解脲脲原体核酸扩增定量检测试剂盒要求5.1.1外观
应符合制造商规定的外观要求。5.1.2测量系统的线性
5.1.2.1样本线性
线性相关系数（r）不小于0.980。5.1.2.2试剂盒系列标准品线性
试剂盒标准品应不少于4个浓度，宜包含线性范围上限和下限，线性相关系数（r）不小于0.980。注：5.1.2仅适用于定量检测试剂盒。5.1.3准确度
准确度应符合如下要求：
a）检测解脲脲原体阳性国家参考品或经标化的企业参考品，检测结果应为阳性。b）检测解脲脲原体国家定量参考品或经标化的企业定量参考品，绝对偏差不超过土0.5个对数数量级。
5.1.4特异性（阴性符合率）
特异性应符合如下要求之一：
检测解脲脲原体阴性国家参考品或经标化的企业参考品，结果应为阴性：检测解腺原体阴性国家参考品或经标化的企业参考品及可能引起交叉反应的其他基因型解b）
腺脉原体阳性参考品，结果应为阴性。注：b)适用于单一生物群检测试剂盒。5.1.5重复性
批内精密度应符合检测浓度对数值的变异系数（CV)应不大于5.0%5.1.6定量限免费标准bzxz.net
定量限应符合生产企业声称的值，且同时满足准确度要求5.2解脲脲原体核酸扩增定性检测试剂盒要求5.2.1准确度（阳性符合率）
检测解脲脲原体国家阳性参考品或标化的企业参考品，检测结果应为阳性。2
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5.2.2特异性（阴性符合率）
特异性应符合如下要求之一：
a）检测解脲脲原体阴性国家参考品或经标化的企业参考品，结果应为阴性；YY/T1256—2015
b）检测解脲脲原体阴性国家参考品或经标化的企业参考品及可能引起交叉反应的其他基因型解脲脲原体阳性参考品，结果应为阴性注：b)适用于基因分型检测或单一生物群检测试剂盒。5.2.3基因分型检测
检测生产企业规定试剂检测范围内解脲腺原体国家参考品或经标化的企业参考品，应全部显示为其相应基因型别阳性，不得出现其他型别的阳性。注：只有当检测试剂盒具有不同基因型分型性能时应满足此项要求5.2.4重复性
重复性应符合以下要求之一
a）批内精密度应符合：荧光PCR法循环阀值（Ct)值的变异系数（CV)应不大于5.0%，恒温扩增法检测时间值（dt）的变异系数（CV)应不大于10.0%；b）以同一份解脲脲原体阳性样本检测试剂盒10次，反应结果应一致，且均为阳性，注：a）适用于实时荧光PCR，恒温扩增等原理的方法：b)适用于PCR膜杂交，基因芯片等PCR杂交原理的方法5.2.5检测限
检测限应不高于10*CFU/mL。
6试验方法
6.1解脲脲原体核酸扩增定量检测试剂盒试验方法6.1.1外观
在自然光下目视检查外观，结果应符合5.1.1的要求。6.1.2测量系统的线性
6.1.2.1样本线性
在生产企业规定的线性范围内，取接近线性范围上限的高值样本按一定比例（例：5倍或10倍）称释为至少5种浓度，其中低值浓度样本须接近线性范围的下限。按试剂盒说明书进行操作，将每一浓度样本重复检测3孔，计算每一浓度的对数值和Ct均值，以浓度的对数值为yi，Ct均值为工；，进行线性拟合，计算其线性相关系数r，结果应符合5.1.2.1的要求。6.1.2.2试剂盒系列标准品线性
按试剂盒说明书进行操作，试剂盒中每一标准品重复检测3孔，计算每一标准品的标示浓度的对数值与Ct值的均值，以浓度的对数值为：Ct均值为，进行线性拟合，计算其线性相关系数r，结果应符合5.1.2.2的要求。
6.1.3准确度（阳性符合率）
同时采用以下两种方法：
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a）对解脲脲原体阳性国家参考品或经标化的企业参考品进行测定，检测结果应符合5.1.3a)的要求；
b）在试剂盒线性范围内，以含有2ng/mL人类基因组的稀释液稀释解脲脲原体国家定量参考品或经标化的企业定量参考品到一定浓度，按试剂盒说明书进行操作，检测结果应符合5.1.3b）的要求。
注：阳性参考品要覆盖试剂盒所检测生物变型或生物群的不同基因型6.1.4特异性（阴性符合率）
采用以下方法之一：
检测解腺脲原体阴性国家参考品或经标化的企业参考品，结果应符合5.1.4a)的要求；a）
b）检测解脲脲原体阴性国家参考品或经标化的企业参考品及可能引起交叉反应的其他基因型解脉脲原体阳性参考品，结果应符合5.1.4b）的要求。注：解脲脲原体阴性参考品至少要包括生殖器支原体，人型支原体等与解脲脲原体种属相近、感染部位相同或感染症状相似的样本。
6.1.5重复性
以至少高、低2个浓度水平的解脲脲原体阳性样本各重复检测10次，其浓度对数值变异系数（CV）应符合5.1.5的要求。
6.1.6定量限
检测生产企业声称浓度值的解脲脲原体阳性样本25次，至少22次检测结果应符合5.1.5的要求。6.2解脲脲原体核酸扩增定性检测试剂盒试验方法6.2.1阳性符合率
对解脲脲原体阳性国家参考品或经标化的企业参考品进行测定，检测结果应符合5.2.1的要求。注：阳性参考品要覆盖试剂盒所检测生物变型或生物群的不同基因型6.2.2特异性（阴性符合率）
采用以下方法之一：
a）检测解脲脲原体阴性国家参考品或经标化的企业参考品，结果应符合5.2.2a)的要求b）检测解脲脲原体阴性国家参考品或经标化的企业参考品及可能引起交叉反应的其他基因型解脲脲原体阳性参考品，结果应符合5.2.2b)的要求。注：解脲脲原体阴性参考品至少要包括生殖器支原体、人型支原体等与解脲脲原体种属相近、感染部位相同或感染症状相似的样本。
6.2.3基因分型检测
检测试剂盒检测范围内解脲脲原体阳性国家参考品或经标化的企业参考品，结果应符合5.2.3的要求。
6.2.4重复性
采用以下方法之一：
a）以至少高、低2个浓度水平的解脲脲原体阳性样本各重复检测10次，计算Ct值或dt值变异4
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系数（CV)，结果应符合5.2.4a)的要求；YY/T1256—2015
以至少高、低2个浓度水平的解脲脲原体阳性样本各重复检测10次，结果应符合5.2.4b）的b)
要求。
5检测限
检测不高于104CFU/mL浓度值的解脲脲原体阳性样本20次，至少17次检测结果应符合5.2.5的要求。
7标示、标签、使用说明书
7.1试剂盒外包装标识、标签
所使用的符号应满足YY/T0466.1的要求，至少应包括如下内容：产品名称及包装规格；
生产企业或售后服务单位的名称、地址、联系方式；b）
医疗器械注册证书编号；
产品标准编号；
产品批号；
失效期；
贮存条件。
试剂盒内包装标识、标签
所使用的符号应满足YY/T0466.1的要求，至少应包括如下内容：产品名称及包装规格；
生产企业名称或标志；
c）产品批号；
d）失效期：
存条件。
试剂盒使用说明书
所使用的符号应满足YY/T0466.1的要求，至少应包括如下内容：产品名称；
包装规格；
预期用途；
检验原理；
主要组成成分；
贮存条件及失效期；
适用仪器：
样本要求；
检验方法；
参考值（参考范围）；
检验结果的解释；
检验方法的局限性；
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产品性能指标；
对分析干扰（溶血、脂血、黄疽等)的说明：o）
注意事项；
参考文献；
生产企业或售后服务单位的名称、地址、联系方式；q）
境内医疗器械生产企业应注明生产企业许可证编号；s)
医疗器械注册证书编号：
产品标准编号：
说明书批准及修改日期。
8包装、运输、购存
8.1包装
包装储运图示标志应符合GB/T191的规定。包装容器应保证密封性良好，完整，无泄漏，无破损8.2运输
试剂盒应按制造商的要求运输。在运输过程中，应防潮，应防止重物堆压，避免阳光直射和雨雪浸淋，防止与酸碱物质接触，防正内外包装破损8.3贮存
试剂盒应在生产企业规定条件下保存。6
参考文献
YY/T1256—2015
[1]YY/T21415一2008体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性
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中华人民共和国医药
行业标准
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010-68522006
2015年6月第一版
书号：155066·2-28741
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