【国家标准】 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定

中华人民共和国国家标准
GB5413.31—2013
食品安全国家标准
婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定2013-11-29发布
中华人民共和国
利家卫业和订划育委员会
2014-06-01实施
本标准代替GB/T5413.31—1997《婴幼儿配方食品和乳粉脲酶的定性检验》本标准与GB/T5413.31—1997相比，主要变化如下：-修改了标准的名称；
-增加了尿素溶液的贮存条件；
增加了纳氏试剂的贮存条件；
增加了判定结果的时限规定。
GB5413.31—2013
1范围
食品安全国家标准
婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定本标准规定了婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中脲酶的定性检验。2原理
GB5413.31—2013
脉酶在适当酸碱度和温度条件下，催化尿素转化成碳酸铵。碳酸铵在碱性条件下生成氢氧化铵，与纳氏试剂中的碘化钾汞复盐作用生成棕色的碘化双汞铵。3试剂和材料
注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。3.1试剂
尿素（H2NCONH2）。
数钨酸钠（Na2WO42H2O）。
3.1.3酒石酸钾钠（C4H4O6KNa·4H2O）。硫酸（H2SO4）。
3.1.5磷酸氢二钠（Na2HPO4）。3.1.6磷酸二氢钾（KH,PO4）。
3.1.7碘化汞（Hgl2）。
碘化钾（KI）。
氢氧化钠（NaOH）。
3.2试剂配制
尿素溶液（10g/L）：称取尿素5g，溶解于500mL水中。保存于棕色试剂瓶中，冰箱中冷藏3.2.1
有效期为1个月。
3.2.2钨酸钠溶液（100g/L）：称取钨酸钠50g，溶解于500mL水中。3.2.3酒石酸钾钠溶液（20g/L）：称取酒石酸钾钠10g，溶解于500mL水中。3.2.4硫酸溶液（50mL/L）：吸取硫酸25mL，溶解于500mL水中。3.2.5磷酸氢二钠溶液：称取无水磷酸氢二钠9.47g，溶于1000mL水中。3.2.6磷酸二氢钾溶液：称取磷酸二氢钾9.07g，溶于1000mL水中。3.2.7中性缓冲溶液：取磷酸氢二钠溶液611mL，磷酸二氢钾溶液389mL，两种溶液混合均匀。3.2.8碘化汞-碘化钾混合溶液：称取红色碘化汞55g，碘化钾41.25g，溶于250mL水中。1
GB5413.31—2013
纳氏试剂：称取氢氧化钠144g溶于500mL水中，充分溶解并冷却后，再缓慢地移入1000mL3.2.9
的容量瓶中，加入碘化汞-碘化钾混合溶液250mL，加水稀释至刻度，摇匀，转入试剂瓶内，静置后，用上清液。此试剂需棕色瓶保存，冰箱中冷藏，有效期为1个月。仪器和设备
4.1电子天平：感量为0.01g。
4.2旋涡振荡器。
4.3恒温水浴锅：40℃土1℃。
5分析步骤
取试管甲、乙两支，各称入0.10g试样，再吸入1mL水，振摇0.5min（约100次）。然后分别吸入1mL中性缓冲溶液。向甲管（样品管）吸入1mL尿素溶液，再向乙管（空白对照管）吸入1mL水。两管摇匀后，置于40℃±1℃水浴中保温20min。从水浴中取出两管后，各吸入4mL水，摇匀，再吸入1mL钨酸钠溶液，摇匀，吸入1mL硫酸溶液，摇匀，过滤，收集滤液备用。取上述滤液2mL，分别吸入到二支25mL具塞的比色管中。再各吸入15mL水，1mL酒石酸钾钠溶液，和2mL纳氏试剂，最后用水定容至25mL，摇匀。5min内观察结果。6
分析结果的表述
分析结果按表1进行判断。
表 1结果的判断
腺酶定性
强阳性
次强阳性
弱阳性
检出限
表示符号
该方法为定性法，检出限为0.7U。显示情况
砖红色混浊或澄清液免费标准下载网bzxz
桔红色澄清液
深金黄色或黄色澄清液
淡黄色或微黄色澄清液
样品管与空白对照管同色或更淡2
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