【行业标准】 动物尿液中盐酸克伦特罗(瘦肉精)残留的检测

NY/QY421-2003
动物尿液中盐酸克伦特罗（瘦肉精）残留的检测一气相色谱/质谱（GC/MS）方法1主题内容与适用范围
本标准规定了动物尿液中盐酸克伦特罗残窗的检测方法。本标准适用于动物尿液。
2原理
对样品在PH-5.2的缓冲溶液中进行提取。萃取的样液用C：和SCX小柱，固相萃取净化，分离的药物残留经过双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）衍生后用带有质量选择检测器的气相色谱仪测定。3试剂及仪器设备
本技术适用于动物尿液中盐酸克伦特罗的确证检测，方法的最低检出限为1ug/kg。方法所涉及的试剂、材料仪器及设备：
3.1试剂
3.1.1乙酸胺缓冲液（20mM,pH-5.2）、溶解1.45g乙酸胺于500Ml~700mL水中，用乙酸调整pH值为5.2并稀释到1升，
3.1.230mM盐酸：稀释30ml1M盐酸到1升蒸馏水中。3.1.3甲醇：分析纯。
3.1.4氨化甲醇（amoniummethano1）：4%。用甲醇稀释4mL氨溶液（比营0.88）至100ml3.1.5双三甲基硅基三氟乙酰胺，BSTFA。3.1.5月苯：分析纯
3.1.7C18小柱：supelcleanLC-18SepPak小柱50Cmg，3mL3.1.8SCX小柱：supelelean，LC-SCXSepPak小柱500mg，3mL。3.1. 9标准溶液
盐酸克仑特罗储各液：精确称取适量的盐酸克仑特罗标准品，用甲醇配成浓度约Img/ml，的标准储备液。www.bzxz.net
盐酸克仑特罗标准工作液：将储备液用甲醇稀释为0.05～2.0ug/mL，存放在冰箱中各用。3.2仪器设备
3.2.1离心瓶，50mL，具塞。
3.2.2Sep-Pak真空接头：
3.2.3具聚四氟乙烯拧盖的试管。3.2.4浆机。
3.2.5机械真空泵
3.2.6旋涡混合器
3.2.7恒温箱，精度为士3℃。
3.2.8气相色谱仪，配质谱检测器。4操作规程
4.1提取
移取5mL尿样于50mL具塞的离心管中。用乙酸调pH至5.2，加入1品L20mM的乙酸胺缓冲溶液再加10mL乙酸乙酯-异丙醇（6-4）混合液，震荡15min，用滴管收集有机相。用10mL乙酸乙酯~异丙醇（6+4）混合液重复提取一次，合并两次提取的溶液于一玻璃试管中，用氮气吹干后再用1mL20mM的乙酸胺缓冲溶液溶解。
4.2净化
装好真空泵和接管，将C18和SCX固相萃取柱按从上到下的顺序安装。依次用5mL甲醇、5ml水和5mL30mmo1/L盐酸洁化。移取上述所得1mL溶液至C18柱中，用ImL20mM的乙酸铵缓冲溶液游洗试管并一起转移至C18柱中。依次用5mL水、5ml，早尊淋洗柱子，在咨剂流过固相萃取柱后，保持抽气5分钟使柱中的液体逐新枯竭，取下C18柱，用5mL4%氨化甲醇淋洗SCX柱并收集流出液于具塞玻璃试管中。
4.3衍生化、检测
4.3.衍生化
用氮气吹干上述流出液，加入100uL甲苯和100uLBSTFA，加盖并于旋涡混合器上震荡，在80C的烘箱中加热1hr（盖住盖子），冷却后加入0.30ml甲苯震荡溶解，转入2mL选祥小瓶中。取适量的盐酸克仑特罗标准工作液，同时衍生化。用气质联用仪选择离子监测方式检测。4.3.2检测
4.3.2.1GC/MS条件
色谱柱：HP-5MS5%来基甲基聚硅氧烧，30mX0.25mm（内径），0.25Lm（膜厚）：进样口：220℃：
进样方式：不分流；
进栏体积：2L
柱温：70℃（保持0.6分钟）：以25℃/分钟升温至200℃（保持6分钟），以25℃/分钟升温至230℃（保持5分钟）；
戴气：氯气，流速：0.9mL/分钟（恒流）。GC/MS传输线温度：280C
溶剂延退：8分钟；
EM电压：高于调谐电压200V：
分析器温度：230℃：
四极杆温度：106℃
选择离子监测：（M/7)86，243，262，277。4.3.2.1测定
根据样品液中盐酸克仑特罗含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液：标准工作溶液和样品液中盐酸克仑特罗响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样品液等体积参插进样测定。
定性：样品峰与标样的保留时间之差不多于2秒，匹配度值应大于800：当匹配度值小于800时，应通过人工比较选择离子的三度，以基峰百分数表示。hxcxy
式中：x-试样中克仑特罗残留含量，mg/kg：h一样液中经衍生化盐酸克仑特罗的峰高，ml：hs-标准工作液中经衍生化盐酸克仑特罗的峰高，mmCs标准工作液中盐酸克仑特罗的浓度，lg/mL：V一样液最终定容体积，mL：
一最终样液所代表的试样量，g。注：计算结果需将空白值扣除。
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。