【行业标准】 蜜柑大实蝇检疫检测与鉴定方法

ICS65.020
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 2053-2011
蜜柑大实蝇检疫检测与鉴定方法Detection and identitication for Bactrocera tsuneonis (Miyake)2011-09-01发布
2011-12-01实施
中华人民共和国农业部发布
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草本标准由中华人民共和国农业部种柏业管理司提出。NY/T2053—2011
本标准出全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271)归IT。本标十要起草单位：全国农业技术框广服务中心、湖北省植物保护总站，华中农业人学。小标准主要起草人：熊红利、向子钧、刘慧、周华众、冯晓东、正永模、孙劲、秦仙姣、王福祥、YKANrKAca
1范围
蜜柑大实蝇检疫检测与鉴定方法本标准规定了蜜相大实崛（Bactroreratsneanis）的检疫检测与鉴定方法，本标祚适用丁对鎏柑大实崛的寄十实施检疫过程中的检测与鉴定。2规范性引用文件
NY/T 2053—2011
下列文件对习本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注口期的版不适用丁本文件。儿是不注日期的可用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB15569农业植物调运检疫规程
3原理
3.1发生与为害
蜜柑大实屹属双翅日（Diptera）、实蝇科（Tephrititlac），该出最早发现于日本九州南部的野生橘林小。现分布于日本、中国利越南，在中国分布于四川、云南等省：主要为害柑橘类，包括金、橙，甜橙、柑、红橘、溢州蜜耕等，
3.2鉴定依据
依据蜜柑大实蝇形态学特征及与其近缘种的特征比较进行鉴定。4仪器、用具及试剂
4.1仪器
休视显微镜、手特放大镜、测微尺、养虫箱、下燥箱、冰箱等：4.2用
诱捕器、小刀、镊子、量筒、烧杯、培养Ⅲ、小型干燥器、塑料裘、广瓶、标签纸、防虫网罩、白瓷盘等。4.3试剂
乙醇、冰醋酸、甘油、辐尔马林、水解蛋白等.5制剂
5.1保存液
2.醇一甘汕保存液：在75%的之.醇4加人0.5%～1%的甘油。福尔马标、乙醇，冰醋酸保存液：5份福尔马林，15份80%乙醇、1份冰醋酸混合而成。5.2引诱剂免费标准bzxz.net
按照水解强白2份，甜橙汁、黄洒、醋、蜂密各1份，水10份的比例混合配制而成。6检测
6.1产地检测
6.1.1检测范围
各类柑橘园，重点是红橘和柑园。6.1.2成虫调查
KANIKAca
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4月下旬至9月下旬，在树橘果园中每667m2随机总拌3个登柑大实蝇诱捕器，诱捕器离地m1.5m,每7收集，次诱集的成凸，将收集到的成虫放入盛有70%乙停的广！瓶中，带同室内鉴定6.1.3幼虫调查
6月下旬至11月中旬，在柑撬果园中选择现果1！、有代表性的档橘园3个一5个，在每个橘园中采而随机拙样法摘取10株橘树，采集橘树上熟先黄的果实和该树纳落地果共10个~20个，查着果皮上有无产卵痕，脱果孔，如来发现出果鼓幼虫，可检否落地果用画5CII深的表土中有无幼收和通，将符个附录心捕述症状的果实及收集到的业体带回室内鉴定。6.2调运检测
6.2.1准备工作
核对待检柑橘的产地，包装、品种、数量等本情况，特别注意核对柑橘产地或途经地是否是疫情发牛区。
6.2.2现场检查
对集装箱、运输工具等用肉眼检查，特别注意检查缝隙、角落等处：发现可疑哎虫或幼虫将其放人乙醇甘油保存液巾.贴上标签.注明时间、地点、采集人，寄主等居本信息，待进行种类鉴定。6.2.3轴样检测
6.2.3.1抽样方法
按（法15569的相关规宽进行。
6.2.3.2样品检测
用肉眼或手持放大镜对抽查样品果实逐个进行检查，查看束皮上有无产卵痕、脱果孔：发现有产卵痕的果实，将其装人取样袋国检疫实验室饲养、鉴定，并填写附录F；发现有脱果孔的果实，用小刀部开，口测或用放人镜查看足否有状幼虫，将有幼次的果实装入取样袋带回检疫实验室进行室内检验鉴定，并填了附录F：将末地动出的果实集中进行然剂处理7鉴定
7.1成虫
将采集到的成虫按照附录A附录B.附录E所描述的蜜相大实蝇成山影态持征及其与近似种的区别特征，在体视显微镜下仔细观察鉴别：7.2幼虫
将采集到的幼出按照附录A，附录3.附录E所描还的蜜杜天实蝇幼虫形态特征及其与近似种的区别特征，在体视显微镜下存细观察整别。当幼也较小难以鉴定时，可将幼业按随录D进平伺养，待纠虫老熟或成虫羽化后逆行龄定：7.3结果判定
以人实崛形态特征为依据，符合附录A利附录阝所描形态特征的则确定为蜜柑久实崛：并将鉴定结果填人附录G。
8标本制作与保存
成虫制作为针活标本；卵、幼虫、蛹放入指形管中，注人福尔马林.酒精、冰酷酸保存液，上塞并用蜡封好店写好标签，妄养保荐。
9档案保存
调查、抽样记录、整定结策等原始记录材料善保存于植物检疫机构。2
HYKAONIKAca
A.1成虫
A.1.1体型
附录A
（资料性附录）
蜜柑大实蝇的形态特征
体大型，体长10.1mm--12.0mm早）,9.9mm-110mm（含）A.1.2头部
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头部黄褐色，单服一角区黑色颜面斑俊形或长椭圆形，黑色。触角黄褐色，触负蓝暗福色，其基部近黄色，具」对上侧额馨和2对下侧额繁，内、外项各1对。A.1.3胸部
A.1.3.1中胸
中胸背红褐色，背面中央有“人”形的褐色纵纹，肩肿和背侧板脚以及中胸侧核条均为黄色，中胸侧板条宽，几乎伸抵肩的后缘：侧后缝黄色条始于中胸背板缝并终丁内紫之后，呈内弧形弯曲，具中后链色条．小盾片黄色
A.1.3.2胸部繁序
小店端乐1对：无小盾前繁，后翘上禁2对，前翅上禁2对（有时1对，或有时1侧1根，前另1侧2根，不等）.中侧板暴缺，背侧2对（前、片各1.对)，肩板2对（内对常较外对弱小）。A.1.3.3翅
膜质透明，前缘帮宽，与Rt+s脉汇合并在翅端R4s脉的下方和M:-脉之间略扩展；此外，在R2+脉与尺-：脉之间的暗褐色前缘供下有1空自透明长形条，无臀条，A.1.3.4足
近红蝎色，胫节色较深。
A.1.4腹部
黄褐至红褐色，背面具1暗褐色剑黑色中纵带，白腹基部延仲到骏部末端或在木端之前终止，第3腹节背板前缘有1暗褐色卸黑丝横，与上述巾纵带树交晕“十”学形，第4和第5节背被两侧各有1对暗褐色到黑色短带，雄虫第6节背板隐于第5节的下方，第？书～第9节组成产卵帮。第7节为册节，形如瓶状.陪褐色，第8书为中节，只锉区；第9节为产卵管节，端量3叶状，具端前刚毛4对。产卵器的基节长度约为题部1节～5节长之和的1/2.其后端狄小部分短第5腹节：雄虫第3艘节板具帮毛：第5腹极后缘略叫，阳些端暗褐色，其上透明的蘑菇状物端半部密生透明小制。A.2卵
长1.33mml.5mm。白色，椭圆形，略弯曲，端稍尖，乃-端圆饨，1有2个小突起。4.3幼虫
幼虫共3龄。1龄-休长1.25mz-3.5mm。1钩小形，长0.0.mm~0.07mm。前气门尚未发班，后气门甚小，出2片气门板组成，裂孔马蹄形。气门板周圈有气门毛丛。2龄，休长3.1m切～8.0mn，口钩发达，黑色，长0.16mm~0.17m气门其气门裂个，气门毛5丛。3龄，体长5.0mm3
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J5.5rntm。口钩发达，黑色，长0.21mm~心.38nm，前气门丁”字形，外缘至直线状，咯弯曲，有指突33个35个．体节2节~~4节前端有小刺带，腹面仅2放~-3节有带：后气门其气门裂3个，气门毛从。成激幼出由乳白色转黄白色.粘大·翊形，长11mm13tmm。前气门\丁”字，外缘成言线状，咯弯曲.有指突33个35个。
YiKANYKAca
附录B
(资料性附录）
蜜柑大实蝇与柑橘大实蝇、柑橘小实蝇形态特征比较凝村人实翊
Baetoxera(Terredacus)
sutermis(Miyake)
体长10.1mm~12.0mm。胸背
无小后片前，只超上1刘~2
房案通常2对，中对较、发达、
产卵器基“长度约等十腹部第4
与第节长度之和：产现筑
长不足2.5
韩虫腹部第5股板后缘向内品陷
的深度达此股被长度的1/3
前筑阔，呈“\，外缘较平
直，微曲：指究33个~=35个
店气门周常具组毛样5以
州橘大实蝇
BarornracTetndacus?
minar(Fnderlein)
体长12mn~i3mm胸背小
盾片前翼，起无前翅上第
肩通常仅且侧对，中对缺或极
产器基长度约等于腹部第2
与第节长度之和；产管端不呈
3叶状，长达3.5mm以上
雄电股都第5双板后缘向内叫陷
的深度达此版板度的./3
前气门人，射形，外缘中部叫
陷，两侧下弯1兵指资30多个
房气门裂外侧其纳毛群4丛，排！列成效射状
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柑橘小实蝇
Baetrxore( Bretrocera)
doratis(Hendel)
体长？mm~8mm。胸货具小盾片前，其前翅上1对
腹部背面中央黑色绒敏仅限于第3苦～第节上
前气门痒小，略旱环栏形：只猎突10个个
店气门新月形，外仙具细毛群4丛5
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(资料性附录）
蜜柑大实蝇为害症状
C.1蜜柑大实崛产卵为害状的形成及其类型产即时，幼果横径一般为25mm35mm。初产卵时呈现针刺状小孔，孔径0.2mm~0.6mm孔缘油漫状变色，1--？后一般都有流胶结战珠状附丁孔上，4d己后，孔周干燥，是自色或英勺色，不同程度继向内陷紧缩，胶粒十硬。10d右，小孔开始愈合，胶粒多数脱落，这时孔径一般0.6mx～1.2m。20d后，小孔周缘凹起，中央销叫呈黑色或暗褐色小孔，再经10d（约产卵后30d～d）.正值壮果期，小孔生长停滞日渐内陷-州围果皮组织紧实，果皮生长迅速，乳状突开始形成。小孔逐渐木栓化。内陷处山现放射状裂纹：9月~-1）月随若果实长大，孔四周完全木轻化，呈灰白色或灰褐色放射状裂纹，中央问入，形成典型乳状突。山丁人实地雌产卵管粗细和产卵深度不一，使产卵为害状出现多种类型。
类弹丁：乳状突明显，中央回陷至暗褐色，具灰白色不栓化裂纹，周围果皮油胞紧实光滑。横剖产卵处呈褐色环纹晕圈.其中心硬结深达果粼，多有幼虫虹食，虫数较多。类型让：乳状突不明显，中央微肌隐早暗褐至黑色，周围果皮油跑较紧实光滑。横剖产卵处晕周不明显，其中心硬结多在白皮层.40添~-69%有幼虫蛀食（个别有卵术孵化）。类型：绝无乳状突，仪有-微小黑点，调围果皮油胞无任何变化。横削产卵处无晕圈，仪有油浸色小点(或无)，2%~~3%有虫蛙食(个别有卵未孵化)，虫数极少.C.2橘不同种类间大实蝇的产卵症状产卵症状因柑橘种类不向.典型症状不尽相同，甜橙以上述I，Ⅱ犁店多，Ⅲ型很少；红橘、柠檬Ⅱ、型为多，1型必有发现：甜橙品种间症状无甚差异：个主要相橘种类大实蝇典型产卵症状如下。甜橙：卵多产于果腰战腰脐（脐即果顶)之问，产卵孔周围果皮显乳状突起，突起郁分果皮油跑细密光滑；中央内缩下陷呈熙色小孔，四周有木栓化灰白色放射状裂纹：产卵孔附近术熟先黄或有黄中带红的色泽。
红橘：卵多产于果脐部，也有产在果腰的，产卵孔周围果皮不叫陷或微突，空一小照点。有未熟先黄现象：
柠檬：多产在果腰部，产卵孔周谢果皮微凸，地有一小黑点，术见果实未熟先黄。柚：卵多产在果带部，产卵孔周困果皮向内呈圆形战长椭酬形叫陷，中央内缩呈暗褐色深孔少数也有木栓化灰凹色小裂纹。末熟先黄现象不明显。HYIKANKAca
附录D
【资料性附录】
幼虫饲养方法
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将采集到的有产卵痕或带幼虫的奇果实放在小号白瓷盘里，然后将小号自盘放在装有白来水的大号瓷盘内，用防虫网罩盖住小自瓷盘，使网鼠的下方边缘漫没在大号白瓷就内的水中，置于温度为22%28℃，湿度为50%～90%的环境中培养，每天观察2次，幼虫发育玺老熟幼出（3龄）时会弹跳入大号白瓷盘的水中。收集水中的老熟幼虫，·部分放入乙醇一廿油保存液中，进行鉴定；另一部分放入盛有湿润，洁净细砂的一次性绝杯中，再置丁温度为22℃-~28：湿度为50%~-90%的环境中培养，待成虫羽化后，逊行鉴定。HYIKANT KAca
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1惟成·
胜成出部面；
3…·成虫触角
：产迎新末：
附录E
【资料性附录】
蜜柑大实蝇形态特征图
11--12--
（1低White%Elson Harris;2.3伤陈世其朵仿深进胜海）HYIKANIKAca
缺点1、2.3装口的；
幼只1.2、3龄后气门
-幼虫2,3 龄前门。
生产、经共者
联系人
调查日期
祥品编号
症状带递
抑样方法、部位、
抽样单位(京)：
抽样人：
植物名称
附录F
【规范性附录】
植物有害生物调查抽样记录表
地址及邮编
联系电话
抛样胞点
品种名称
年川日
植物牛咨期
纠产、经营单位章）
负费人：
注：本单一或两埃，第，联独样单位档，第二联交受格单位NY/T 2053—2011
编号：
调查株数或面积
植物米源
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植额名称
植柳生旁期
样品来源
送检单位
检测整定方私：
检谢定结果：
裔洋．
鉴定人(签名)：
中核人（签拓）：
附录G
（规范性附录】
植物有害生物样本鉴定报告
详品数量
送检月期
注:本单一式一份,检演单位、受检单位和检疫机构各一份。10
晶种名称
送检人
联系t话
整定单假带竞：
年片H
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