【行业标准】 果汁脯氨酸的测定

NY82.13—1988
中华人民共和国农牧渔业部部标准果汁测定方法
脯氨酸的测定
NY82.13—1988
本标准等同采用国际果汁联盟IFJU分析法。No.49（1983）一脯氨酸的测定。
1原理
脯氨酸与水合三酮作用，生成有色络合物。用乙酸正丁酯提取，并在波长509nm范围内进行比色测定。
2试剂
2.1水合三酮（HG3—9841976，分析纯）的乙二醇甲基醚溶液：3g/100mL。2.2醋酸正丁酯：分析纯。
2.3甲酸（HB20931980）：分析纯，98～100%溶液。2。4无水硫酸钠（GB639—1977)：分析纯。2.5L-脯氨酸：100mg/L。
3仪器www.bzxz.net
3.1分光光度计。
3.2水浴。
3.3具塞试管：25mL。
3.4滤纸。
3.5玻璃漏斗：86.5cm。
3.6实验室用自动定时器。
4测定程序
4.1样品的制备
脯氨酸含量大于50mg/L的样品应稀释。50~499mg/L稀释10倍；
500~1000mg/L稀释20倍；
小于50mg/L稀释2倍或5倍。
4.2标准曲线的绘制
将100mg/L的脯氨酸溶液，稀释到浓度为3、5、10、25、40、50、60mg/L。取上述溶液各1mL，按4.3程序测定吸光值。以吸光值为纵坐标，以脯氨酸浓度（mg/L）为横坐标，绘制标准曲线。4.3测定
4.3.1取1.0mL试液于具塞试管中，加入1mL甲酸；2mL水合节三酮溶液。摇勺。置于沸水浴中15min（水浴的液面要高于试管中的液面）。放在20℃水中冷却5~10min。
4.3.2在试管中加入10mL乙酸正丁酯，盖好塞子。充分摇动，使有色溶液提取到有机液层。
4.3.3溶液全部倾入到盛有一满勺无水硫酸钠的滤纸上。15min后，在509nm波长处，用1cm比色血，测定滤液的吸光值。中华人民共和国农牧渔业部1988-01-27发布1988—08-01实施
NY82.13—1988
4.4空白试验
空白试验中不加水合三酮，其他条件和测定程序与4.3相同。5
结果的表示和计算
脯氨酸含量可以直接由标准曲线得到。用mg/L表示，保留两位小数。原来样品稀释的倍数，在计算中必须考虑。附加说明：
本标准由北京农业工程大学负责起草。本标准主要起草人：张坤英。
中华人民共和国农牧渔业部1988-01-27发布1988—08—01实施
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