【国家标准(GB)】 茶 游离氨基酸总量测定

GB/T8314—2002
游离氨基酸总量测定》的修订。本标准是对GB/T8314~1987《茶
本标准修订主要是按照GB/T1.11993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则第1部分：标准编写的基本规定》的要求，对GB/T8314一1987在格式和文字上作了一些修改，具体技术内容没有变动。
本标准自实施之日起，同时代替GB/T8314—1987。本标准由中华全国供销合作总社提出。本标准由中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院归口。本标准起草单位：中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院。本标准主要起草人：周卫龙、孙安华、钟萝。本标准由中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院负责解释。152
1范围
中华人民共和国国家标准
茶游离氨基酸总量测定
Tea---Determination of freeamino acids contentGB/T 8314—2002
代替GB/T83141987
本标准规定了对茶叶中游离氨基酸总量测定的原理、仪器和用具、试剂和溶液、操作方法及结果计算方法。
本标准适用于茶叶中游离氨基酸总量的测定。2 引用标准
下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T8302—2002茶取样
磨碎试样的制备及其干物质含量测定GB/T 8303—-2002
GB/T 8312—2002
咖啡碱测定
GB/T 8313--2002
茶多酚测定
3定义
本标准采用下列定义。
游离氨基酸free amino acids
茶叶水浸出物中呈游离状态存在的具有α-氨基的有机酸。4原理
α-氨基酸在pH8.0的条件下与节三酮共热，形成紫色络合物，用分光光度法在特定的波长下测定其含量。
5仪器和用具
实验室常规仪器及下列各项：
5.1分析天平：感量0.001g。
5.2分光光度仪。
6试剂和溶液
所用试剂应为分析纯（AR），水为蒸馏水。6.1pH8.0磷酸盐缓冲液：按GB/T8313--2002中6.2的规定，配制1/15mol/I.磷酸氢二钠（6.2.1)和1/15mol/L磷酸二氢钾（6.2.2)溶液。然后取1/15mol/L的磷酸氢二钠溶液95ml和1/15mol/l磷酸二氢钾溶液5ml，混匀。
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2002-06-17批准2002-12-01实施
GB/T 8314—2002
6.22%节三酮溶液：称取水合三酮（纯度不低于99%）2g，加50mL水和80mg氯化亚锡（SnCl22H0))搅拌均匀。分次加少量水溶解，放在暗处，静置昼夜，过滤后加水定容至100mL。6.3茶氨酸或谷氨酸标准液：称取100mg茶氨酸或谷氨酸（纯度不低于99%）溶于100mL水中，作为母液。准确吸取5ml母液，加水定容至50mL作为工作液（1ml.含茶氨酸或谷氨酸0.1mg）。7操作方法
7.1取样
按GB/T8302的规定。
7.2试样制备
按照GB/T8303的规定。
7.3测定步骤
7.3.1试液的制备
按GB/T8312—2002中11.1的规定。7.3.2测定www.bzxz.net
准确吸取试液（7.3.1)1mL，注人25ml.的容量瓶中，加0.5mlpH8.0磷酸盐缓冲液（6.1）和0.5ml2%节三酮溶液（6.2），在沸水浴中加热15min。待冷却后加水定容至25mL。放置10min后，用5mm比色杯，在570nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度（A）。7.3.3氨基酸标准曲线的制作
分别吸取0.0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL氨基酸工作液（6.3）于一组25mL容量瓶中，各加水4ml、pH8.0磷酸盐缓冲液（6.1)0.5ml和2%三酮溶液（6.2)0.5ml，在沸水浴中加热15min，冷却后加水定容至25ml.，按7.3.2的操作测定吸光度（A）。将测得的吸光度与对应的茶氨酸或谷氨酸浓度绘制标准曲线。
8结果计算
8.1计算方法
茶叶中游离氨基酸含量以干态质量分数表示，按式（1)计算：C
游离氨基酸总量（以茶氨酸或谷氨酸计)（%）式中：L——
试液总量，mL；
L测定用试液量，mL；
试样量，g，
M。 X m
C—一根据7.3.2测定的吸光度从标准曲线上查得的茶氨酸或谷氨酸的毫克数；m
试样十物质含量，%。
..-( 1)
如果符合重复性（8.2)的要求，则取两次测定的算术平均值作为结果，结果保留小数点后一位。8.2重复性
同一样品的两次测定值之差，每100g试样不得超过0.1g：151
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