【城镇建设行业标准(CJ)】 城市供水 致突变物的测定 鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验

中华人民共和国城镇建设行业标准C1/T 141--150—2001
城市供水水质检验方法标准
及编制说明和研究报告
2001 07-17发布
中华人民共和国建设部发布
2001-12-01实施
一、城市供水水质检验方法标准Standard methods for the cxamination ofwater of urban water supply
TKAONiKAca
CI/T155—200?
本弥准巾史较部频准定研究影责市车弥准出建预都给水排术产品标准化拉.术委员会归口：本标推由压家城广供水水质益训网无洋监测站负贵定单本标心起单人：旭东，李路
本标准参验训单信：北京监测站、三海监测站、深期监测站，武汉监函站，总环些谢站。Es
1范固
中华人民共和国城镇建设行业标准致窦变物的测定
城市供水
鼠伤塞沙门氏菌/哺乳动物徽粒体酶试验Crhau water suppiy-
Delerninalinn ofmntagenesis-Salmnella typhirmurinm/Mammals microsomal enzymetestCJ/T150 —2001
本标准规定了书或份察设，低菌/哺乳动物微粘体降试监测定成市供水的致突变性、水标州适用于城市洪木及其水水质技察变的测定标准规定表2：次接种的最成检测水样位积。2方法
人透变沙门比实变株即期酸节降在的培养上不能长如受到效实变物的作用，使共其贝发儿变化业回复安变为原来的厨生型，即左志组氧酸的条外下也能生长（如下所示）。兴中一当穿实主物为直按效安变物，另外一然为间报数实变的，即号代谢活化行只有致奕变性：
肾生 ,严淀症-组氨酸苷养缺降血因重效之妊乐,亚3试刻和材料
3.1肯养内汤
牛肉没奇
第化射
游雷水
将上述范分准合了热群严，同询即a】1落周节【值票7.2.分装干试音中.每并10.经121高游热灵南20.4冰箱保存供增递常用，（保存期7大）3-2V液
对体酸(C,,O, -10)
酵酸P)
培散钱
说酸假MgsHO
将：证试剂在少正偏水中许深后长释532，新酷锁水溶池在能后级谨刘人以防止产生洗淀，终湾组讨法店，业冰箱保在，3.3底坞养基
中华人民共和国建设部2001-0/-17批准TTTKAON KAca
2001-12-01 实临
梵葡销
V-B依
燃幅水
C.I/T 150—2001
将V-B液用地利NOH落液两节pF值至7.5。另特酒辫于1UUmL.蒸诵水中（语被变黄者存出五配）两于115灭曲0min：琼胎于B00mL蒸雅水中煮沸溶化.121火菌23min符其至33℃左右,将前两老倒人混勾。资制平板,年二 25 nL，于 4冰箱中可保存 14天。3.4v.5 m mol/组点酸0.5u ru:/-E物素溶液成处
L-组氧碎(FWJ55.7)
成[.-年酸献（FW299.53）
D生物亲
弹匀密解，于1<冰箱中保存，
3.50.1mal/-组多整熔液
T-组氧融(FW155.7)
[-组氧酸盐(F203.51)
蒜馅木
混勾穿程,于冰粘中保存。
3. 6学养项胎
酱养肉粥
将琼脂例人昔养内内如热烹带，用跑和NaH落液调节迫至.~72C高代次菌30mis.4℃冰拍中可保存14天
3.7H-独层择养册
氯化纳
燃潮水
格源脂和氧化的落士落水中加热素进以支试管2.5L分装，加度，121[高压灭21min。丁4冰箱可保在14元
3. 8 H 项层培芥基
II-项原培养基
0.1mo./LL-组密酸碎离
格址热落化了的-顶忌玻养基期人1江-组想溶施m.够效以每支试管2.5m1.办装,加弃,121C商压灭声20mn：于1C体箱中可保存14天。3. 9项尿谱养基
H[层培养基
5组氨酸mm-生物素籍液
将加热落化了内H灭层老养基加人(mal/，-组氢-0.mal/.D-生物素济液后游勺.趋势以每支试度2.5mL分袭率.121出火菌26 mm，于4殊箱中可保在14大.3.10C.2mal/.费酸钠线冲滋2H7.4)每
G.2mol/T.磷载氢销(Na,HPO),t2II)st
81 ral
CJ/T1502007免费标准下载网bzxz
0.2mol/L碎=$（NaHPO2.O)
考H值小了.4.用J.2mo:酸氢二调至,11>亡高压灭苗1mi于4冰箱小保行。
3. 11这下青厚素减性降被
芳青牵素
氧化落派（0.U2m/）
临用时无菌探作配判
312每板
10) rr:1.
在1000层培养本户加人,5%组数酸盐敏盐济激1)L茂5%组氧酸培液.17mL，0.mm1/1,1).兰物索滴浪6mL，121C商正灭菌27min后，加人1.mL系共青素碱件游减，混勾说制半权，供快还当种用.3.13品案水筛触0.1/100a睡光保存，3.14的穿4./mTAss或-S9作用性对脏用（或故克松水溶演(.5rmg/mz）
3.15不磷水落液Gmml.TA.S9或+S0)作即件刘服片3.165 0 混合池
MgCl,(5. 1 mol/L
KCI(1. 53 mol/L!
I(NADPH)
5-惜酸能能猫！m/
磷酸锻冲液0.2nml/
灭曲蒸水
0, 2 mL
35 μL
除-3外，组分次函店保存」冰籍，元案换作，临月时配制，置于冰箱中.其活件可保持4h~.3. 17 S s的制备
快用休重200在的健东性大限、用下米洲移释的川产多收苯（或1010r-125，浓更00nE/m，荆盛为100m/kg）腔产咨.号天店，所头处大泉，取出肝肝，数人虑杯中整年，极克件虹加人0.1601/KC1落3m，违同烧杯移人冰水中，用消步剪剪碎开肚，在帮内制反可句蒙，在高迪冷还离心机1.以900<速度12CGcPr3min。吸上满孩为≤-9分装小试善，每管2m）.取-)（或一23（冰箱保行应无芮操作，制备店庐川接种坏排出少许在并非琼脂上布，37、24.上培养於验虚为的，用间接效密物实曲紊B或2点基物鉴定其生物活性方三使出
3.182基游液2g1.1溶液
4收器设备
4. 1高正气火器
4.21热灭菌箱
4.3恒组拍
4.4首通减箱
4.5商逆冷炼央心机（12)-mi）
4.6低道源箱（·或获氮说
4. 了 超学 T:作台
TTTKAONT KAca
4. 日祖求游锅
4.9真空处
4. 1比色器
4.11或芮落计数器
CJ/T150
4.12效加微器或注来器（.
4.13或咨平丽均）、分质没色
暨于十热灭索箱10灭荫5
4.14振酱培养箱
5试验曲性的选用,鉴定与保存
5.菌种的选书
些一1A多：1A1州床动持性异小不光、且分别试移码型交货动成互表型交，卫比木试验采月TA8,TA[作为数后菌种5.2种鉴
5.2.培两较的务
将的外接次的养娠满培齐-至每升活菌不少105~-2*1 +-
5.2.2组能缺陷型鉴定
将备装为2.三mH顶层培养的3支试件分加入1mI.培激、分圳到人培养其被，S7培养435，将没有.ml.H-尺培养的更试管1外别如人U.1mL哺波分别到人底层培养基平板：37 C培齐 48 F:,结来判定：有组氧酸的片养正上应点菌胶收而作为组要摄的逆费也十应：有个别函游牛长3.2.3租
给品紫抑消试验
门接种坏效的滤纸净3.1.诊在上养原平板上，6径无南能法结的紫求婚滤后效道其1.37培准241，式两份。结半州定：其行深质相摘变尔的有球在滤绘片处出现机菌环直【5. 2. 1 K应十鉴空 ,一抗安节疗每载试验用接种坏格增菌波在营并综脂平板例线，再其换种环费上通吉零托项上踏与共交及线37统养18-7h
结朱均定-不R因广的南代交更处抑随带，R位子考圳，5.2.52url突变——紫外效求伤择复试验双种天书波在营养综脂平或1线.平较的一中用是低送益，片紫多灯下15,比离照塔24
结来定：涤修系统缺册的东你受知不生长好长5-2.6自完世更定货
在无荫的2. 51. 页是培差差1人. 1 ml.增菌液人感点逆基平板上关奖格h-式三岁
站果判定:别案耳血自发变数，1A8应车15~-5,A130广亡--2c个也[内,5.2.7口变持性比对照
在志商的2.5.质层塔并载中人.1m增函技开人，1.非生物后划人在层培东基中板上,37C培获 A所上，一式 份。
销果判器：型案来出人十2培以上与变教老为交变试给阳注，5. 3我的探存
CI/T150200
m.节需滤中人1 m年基亚风MS在一一可保存六个月至一年。些获感胎斜面增菌保存、在1可保存个片6测定步题
6-1术栏浓缩浓的制备
6.1.1XA)-2附脂的处理
6.1.1.1市片XA13-2资齿需用重热泄水洗云所含氯化物：弃去浮于上层的树脂。用色微纯级中醉将承洗去。
6.1.1.2依饮用内酮、之醒、月些各获回流Hh。保存个甲醇口：（游剂均实次主蒸窄或用色消钟级：
E.1.2安艳XAL)-2树脂柱
将处理女的树指例人一支高 45 U11,直轻 2. i rml 的我项内,树结体积 20 ml. , 在致竭栏底部及例醋年！的被经为南、之醛，醇蒸密回流边的蓝考带以支闲与来被杂质书10m蒸确水冲缺痴服市。
6.1.3水样的杀来，吸及滤水条
消洁的容能采案水群后·静置高处数小时使术中态净核沉淀准使游解钩定，经复消示的水要先用Na)：脱载，用虹法将f1准以筑述为ma两过树脂件，5-1.4机物的洗脱、依、保存
交择过时吸附，用氢气吹干树当社，分三次，每次以.折人色潜纯必前视情况办川用丙配：中醇3：7混溶剂熔疫受泡后，以ml./min流速收来洗脱浅干用烧划：用5区尤水筑酸谢过溅脱水片,倒人K-T>能给器管编至2m左右。效人真空十常器压将许别蒸十井保存在真卒1姬器内。浓缩物1决说用.用时加LMS门定容至3.m].原液，帮至原激的1/2、J/4表度贝,厚饿、1/2更料浓座落液、1/1味波浓萨激各1.1)1r:1.分别相当于水栏2.011.01.0.1.6.2试验方法和步要
6.2.1试验可法：平收每人队：
6.2.2试将步
6-2.2.1增菌培养方法同菌千鉴定6.2.2.2培并基制备：提前一文制各在尽培基平板芥下取人37（温箱内时正无菌：将当大化顶原培养基-15未举保存。
6.2.2-3接种格差：在4管顶培养其中剂人.1l.菌效，0.1划当于一定水样体积的浓蜡被（.1.4)产化时再如入：4mS混合我报后价人余层培养1铺列：371（旁茶4h楼种3个水年送利（5.1，之！，每个偿种水位积进行个平行是6.2.2.照：发变性收个过是：自变0.[m.M性对照.1
7结果分析及举价
了1等测物的每个剂放出性期点日何血的实际回变座落数及平内数其中一个平行样回变整数相对示理情案应小一3%。
7.2在12个医种式样房下，片变菌势教始口没回变的两倍及两俗以上，日有剂盘反快关系古，定对阳性！生则即为致密变期生。8质整控制
6.1每次试验前后部点用30些的新治尔次湾科不菌室腰免细菌及车菌蒸兰：53
8.2每批培养基都要灭完全试验。CJ/I1502001
8.3啦避免前与两商糖一同商压，尚止产生冲致实变性，影响试验结果，B.4芳考虑不H中热浮物吸谢的敦突变物，底连向是浮密-同通近XAI)究脂过泄：8.5试验有效性
每次试验应当定待测物和S-9混台液的无菌性.H·能定对比性对照物的反座性，保证测试两袜自发回变数在确定的蔻围内日化较小：9安全
9.1做完试验后-谢带菌的器相，培基应及时经121（:产灭商25min。9-2应严格保管，使州及销微防性物。
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