【地方标准】 禽蛋中氯霉素类药物残留量的测定 液相色谱法

DB37/T3118—2018 禽蛋中氯霉素类药物残留量的测定液相色谱法 Determination of multi-residues of chloramphenicols in eggs - Liquid chromatographic method 山东省质量技术监督局 2018-03-02实施 前言 本标准遵照GB/T1.1-2009规则起草，由山东省畜牧兽医局提出并由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。主要起草单位为济南市畜产品质量安全监测中心。主要起草人包括莫贞峰、时冉冉、姜波、周萌、田硕、王娟、高丛春、祁佳、张灵君、朱剑英、刘海江、吕盛凯。 1 范围 本标准规定了禽蛋中氯霉素类药物残留量的检测方法，采用高效液相色谱法。适用于鸡蛋、鸭蛋、鹅蛋、鹌鹑蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考的残留检测。 2 规范性引用文件 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 原理 试样中的氯霉素类药物用乙酸乙酯提取，浓缩后用乙腈复溶并加入正已烷去脂，通过高效液相色谱紫外法测定，并采用外标法定量。 4 试剂或材料 - 分析纯水，GB/T6682 一级。 - 乙酸乙酯。 - 乙腈，色谱纯。 - 正已烷。 - 流动相：乙腈（水混合比例20:80）。 - 0.2mol/L碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液（pH=10.6）。 - 氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考对照品，含量≥99.0%。 - 标准贮备液（1mg/mL），-18℃保存，有效期3个月。 - 标准中间溶液（10μg/mL），2℃～8℃保存，有效期1个月。 - 标准工作液（20.0μg/L、50.0μg/L、100μg/L、200μg/L、500μg/L），现用现配。 5 仪器设备 - 高效液相色谱仪，配紫外检测器或二极管阵列检测器。 - 分析天平，0.00001g。 - 天平，0.01g。 - 均质器。 - 涡旋震荡混合器。 - 离心机，5000r/min以上。 - 旋转蒸发仪。 - 氮气吹干仪。 - 有机微孔滤膜，0.45μm。 6 样品 6.1 样品制备 取均质后的供试样品作为供试试料，均质后的空白样品作为空白试料，均质后的空白样品添加适宜浓度标准溶液作为空白添加试料。 6.2 保存 -18℃以下保存。 7 试验步骤 7.1 提取 称取2.00±0.05g禽蛋均质液于50mL具塞离心管，加入20mL乙酸乙酯和1.00mL碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液，涡旋5min混匀，5000r/min离心5min。移取10mL上清液至旋转蒸发瓶50℃蒸至干。残渣用1mL乙腈复溶，加入5mL正已烷去脂，涡旋混匀。分取乙腈层，重复乙腈萃取，合并于同一离心管，于50℃氮吹至干。用1.00mL流动相复溶并过0.45μm滤膜，上机测定。 7.2 高效液相色谱测定 7.2.1 色谱条件 - 色谱柱：C18（250mm×4.6mm，粒径5μm）或等效柱。 - 检测器：紫外检测器或二极管阵列检测器。 - 流动相：乙腈+水=20:80。 - 流速：1.0 mL/min。 - 检测波长：氯霉素270nm，甲砜霉素和氟苯尼考225nm。 - 柱温：25℃。 - 进样量：5 μL。