【地方标准】 水质 肠球菌的测定 酶底物法

DB37/T 4153-2020 水质 肠球菌的测定 酶底物法
发布日期：2020-09-25 | 实施日期：2020-10-25

前言
本标准按照 GB/T 1.12009 规定的规则起草，由山东省住房和城乡建设厅提出并组织实施，本标准由山东省城镇给水排水标准化技术委员会归口。
本标准起草单位：山东省城市供排水水质监测中心、潍坊市公用事业产品服务质量监测中心、国家城市供水水质监测网杭州监测站、国家城市供水水质监测网福州监测站、山东省济南生态环境监测中心、聊城水务水质检测有限公司。
本标准主要起草人：赵清华、贾瑞宝、孙韶华、褚福敏、逐南南、田立平、翁天楚、兰榕星、战锡林、刘伟、谷荣焕、郑琳琳、吴锦铃、孟炯、王晓波。

警告：肠球菌为致病微生物，应该在相应级别的生物安全实验室中检测，操作时应按要求佩戴生物防护用品，并注意废弃物的生物消毒。

1 范围
本标准规定了测定生活饮用水及其水源水中肠球菌的酶底物法。本标准适用于生活饮用水及其水源水中肠球菌的测定，当水样体积为 100 mL 时，本方法的检测限为 1 MPN/100mL。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 5750.2-2006 生活饮用水标准检验方法 水样的采集与保存
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 方法原理
肠球菌在 41℃ 温度条件下培养 24 h，能够产生 $eta$-D-葡糖苷酶，将选择性培养基中荧光底物 4-甲基伞形酮 $eta$-D-葡糖苷（4-MUG）分解，分解后的荧光底物在 366 nm 紫外光下产生荧光。通过统计阳性反应数量，查询 MPN 表，即可计算出样品中的肠球菌浓度。

4 试剂和材料
4.1 市售 Enterolert 培养基，也可以使用其他等效产品。
4.2 生理盐水：氯化钠浓度为 0.85%。
4.3 标准菌株：粪肠球菌有证标准菌株，大肠埃希氏菌有证标准菌株。
4.4 无菌水：实验用水满足 GB/T 6682 二级及以上分析实验室用水要求，经 121℃ 高压蒸汽灭菌 20 min，备用。
4.5 硫代硫酸钠：纯度 $ge$ 98%。
4.6 硫代硫酸钠溶液（5.0 g/L）：称取 0.5 g 硫代硫酸钠（4.5），精确至 0.1 g，溶于适量水中，定容至 100 mL，121℃ 高压灭菌 20 min，备用。
4.7 磷酸盐缓冲液（PBS）：氯化钠 8.01 g、氯化钾 0.2 g、磷酸氢二钠 1.44 g、磷酸二氢钾 0.24 g。