【地方标准】 鸡蛋中金刚烷胺残留量的测定 液相色谱－串联质谱法

DB37/T3762—2019 鸡蛋中金刚烷胺残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

前言
本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。本标准由山东省市场监督管理局提出并组织实施。本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省兽药质量检验所。
本标准主要起草人：杨修镇、陈玲、李有志、尹伶灵、张呈军、牛华星、刘少宁、关晓敏。

1 范围
本标准规定了鸡蛋中金刚烷胺残留量检测的液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于鸡蛋中金刚烷胺残留量的检测。本方法检出限为1μg/kg，定量限为3μg/kg。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 原理
鸡蛋中残留的金刚烷胺用1%乙酸乙腈溶液提取，正己烷液液分配去脂，液相色谱分离，串联质谱正离子模式测定，内标法定量。

4 试剂或材料
除非另有规定，所用试剂均为分析纯：水符合GB/T 6682一级水的规定。
4.1 甲醇：色谱纯。
4.2 乙腈：色谱纯。
4.3 正己烷：色谱纯。
4.4 冰乙酸：优级纯。
4.5 甲酸：色谱纯。
4.6 无水硫酸钠。
4.7 1%乙酸乙腈溶液：量取乙腈（4.2）20mL，置100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
4.8 20%乙腈水溶液：量取乙腈（4.2）20mL，置100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
4.9 0.1%甲酸水溶液：吸取甲酸（4.5）1.0mL，置1000mL容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀。
4.10 0.1%甲酸甲醇溶液：吸取甲酸（4.5）1.0mL，置1000mL容量瓶中，用甲醇（4.1）溶解并稀释至刻度，摇匀。
4.11 金刚烷胺对照品（分子式C10H15N）：纯度≥98%。
4.12 D-金刚烷胺标准品（分子式C10H15ND）：纯度≥99%。
4.13 金刚烷胺、D-金刚烷胺标准贮备液：精密称取金刚烷胺标准品（4.11）和D-金刚烷胺标准品（4.12）各10mg，分置10mL容量瓶中，用甲醇（4.1）溶解并稀释至刻度，配制成浓度各为1mg/mL的标准贮备液，-20℃以下保存，有效期3个月。
4.14 金刚烷胺、D-金刚烷胺标准工作液：分别精密量取金刚烷胺贮备液和D-金刚烷胺贮备液（4.13）各100μL，分置100mL容量瓶中，用20%乙腈水溶液（4.8）稀释至刻度，配制成浓度各为1μg/mL的标准工作液，2℃～8℃保存，有效期2周。
4.15 有机滤膜：0.22μm。

5 仪器设备
5.1 液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。
5.2 分析天平：感量0.00001g、0.01g。
5.3 均质机。
5.4 涡旋混合器。
5.5 离心机：转速8000r/min。
5.6 氮吹仪。

6 试验步骤
6.1 试样的制备
取5枚新鲜或冷藏的空白或供试鸡蛋，去壳后用均质机匀浆，-20℃以下保存。
6.2 提取
称取试料2.0±0.05g（精确至0.01g）置50mL离心管中，加入D-金刚烷胺标准工作液（4.14）20μL，再加入1%乙酸乙腈溶液（4.7）10mL，涡旋2min，8000r/min离心5min，上清液转入另一个50mL离心管中，重复提取一次，合并两次上清液，备用。
6.3 净化
备用液中加入无水硫酸钠3g，加入饱和的正己烷10mL，涡旋1min，8000r/min离心5min，弃去正己烷层，剩余溶液转至另一50mL离心管中，40℃水浴氮吹至干，用1.0mL20%乙腈水溶液（4.8）溶解残渣，转移至10mL离心管中，加入2mL饱和的正己烷2mL，涡旋1min，8000r/min离心5min，取下层溶液，用有机滤膜过滤，供上机测定。
6.4 标准曲线的制备
精密量取金刚烷胺和D-金刚烷胺标准工作液（4.14）适量，用20%乙腈水溶液（4.10）稀释配制成金刚烷胺浓度为2、4、10、20、100、200ng/mL，D-金刚烷胺浓度均为20ng/mL的金刚烷胺系列标准溶液，供液相色谱-串联质谱测定。
6.5 测定
6.5.1 高效液相色谱参考条件
色谱柱：C18 50mm×2.1mm，粒径1.7μm，或相当者。
流动相：A相为0.1%甲酸甲醇溶液，B相为0.1%甲酸水溶液，流动相梯度洗脱条件见表1。

7 试验数据处理
8 检测方法的灵敏度、准确度和精密度
8.1 灵敏度
8.2 准确度
8.3 精密度