【地方标准】 甘蔗线条花叶病毒外壳蛋白基因RT-PCR检测技术规程

ICS 65.020 B15 DB53 云南省地方标准 DB53/T914—2019 甘蔗线条花叶病毒外壳蛋白基因RT-PCR检测技术规程 2019-05-15发布 云南省市场监督管理局发布 2019-08-15实施 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由云南省农业科学院甘蔗研究所提出。 本标准由云南省农业标准化技术委员会（YNTC07）归口。 本标准起草单位：云南省农业科学院甘蔗研究所。 本标准主要起草人：单红丽、李文凤、黄应昆、王晓燕、张荣跃、李婕、仓晓燕、罗志明、尹炯。 1 范围 本标准规定了甘蔗线条花叶病毒外壳蛋白基因RT-PCR检测的仪器和用具、试剂、检测方法及结果判定等内容。 本标准适用于甘蔗线条花叶病毒的RT-PCR检测。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 甘蔗线条花叶病毒 甘蔗线条花叶病毒（Sugarcane streak mosaic virus，SCSMV）属于马铃薯Y病毒科（Potyviridae）禾草病毒属（Poacevirus），是引起甘蔗花叶病的主要病毒之一，详见附录A。 2.2 外壳蛋白基因 外壳蛋白基因（Coat protein genes，cp genes），是合成外壳蛋白的模板，通过转录和翻译合成外壳蛋白，与病毒遗传物质共同构成完整病毒RNA或DNA结构。 2.3 RT-PCR 反转录聚合酶链式反应（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction），是一种在体外利用反转录酶将RNA反转录为cDNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增，从而获得特异性核酸片段的分子生物学技术。 3 仪器和用具 3.1 主要仪器 电子天平、高速冷冻离心机、蛋白/核酸分析仪、PCR扩增仪、涡旋混匀器、微波炉、电泳仪、水平电泳槽、凝胶成像系统、冰箱。 3.2 用具及耗材