【国家标准(GB)】 婴幼儿配方食品和乳粉 脲酶的定性检验

GB/T5413.31--1997
本标准给出的是尿酶的定性测定方法，方法快速准确。本系列标准从实施之日起，代替GB5413一85。本标准由中国轻工总会提出。www.bzxz.net
本标准由全国乳品标准化中心归口。本标准负责起草单位：国家乳制品质量监督检验中心。本标准参加起草单位：卫生部食品卫生监督检验所、浙江省轻工业研究所、哈尔滨森永乳品有限公司、雀巢（中国)投资服务有限公司。本标准主要起草人：王芸、殷晓红、房玉国、王克新。352
中华人民共和国国家标准
婴幼儿配方食品和乳粉
脲酶的定性检验
Milk powder and formula foods for infant and young children-Qualitative detection of urease1范围
本标准规定了腺酶的定性检验方法。本标准适用于婴幼儿配方食品和乳粉中豚酶的定性检验。2方法原理
GB/T 5413.31—1997
代替GB5413--85
腺酶在适当酸碱度和温度下，催化尿素转化成碳酸铵。而碳酸铵在碱性条件下形成氢氧化铵，与钠氏试剂中的碘化钾汞复盐作用形成棕色的碘化双汞铵。NH.CONH,+ 2H,O (NH,),CO
(NH)2CO:+ 2OH-—→ CO-+ 2NH,OHK,[Hgl] + KOH + NH---- NH,Hg2I + KI →+ H,O黄棕色沉淀
3试剂
3.1尿素溶液:10g/L。
3.2钨酸钠溶液：100g/L。
3.3酒石酸钾钠溶液：20g/L。
3.4硫酸：体积分数5%
3.5中性缓冲液
取下述磷酸氢二钠溶液611mL，磷酸二氢钾溶液389mL，两种溶液混合均匀。3.5.1磷酸氢二钠溶液
称取无水磷酸氢二钠9.47g，溶于1000mL蒸馏水中。3.5.2磷酸二氢钾溶液
称取磷酸二氢钾9.07g，溶于1000mL蒸馏水中。3.6钠氏试剂
称取红色碘化汞（Hglz）55g，碘化钾41.25g，溶于250mL蒸馏水中，溶解后，倒入1000mL容量瓶中。再称取氢氧化钠144g溶于500mL水中，溶解并冷却后，再缓慢地倒入上述1000mL的容量瓶中，加永至刻度，摇匀，倒入试剂瓶静置后，用上清液。4操作步骤
4.1取10mL比色管甲、乙两支，各加入0.1g样品，1mL蒸馏水。振摇0.5min（约100次）。然后各加国家技术监督局1997-05-28批准1998-09-01实施
入1mL中性缓冲溶液（3.5）。
GB/T5413.31--1997
4.2向甲管（样品管）加入1mL尿素溶液（3.1）。再向乙管（空白对照管）加入1mL蒸馏水，两管摇匀后，置于40℃水浴中保温20min。4.3从水浴中取出两管后，各加4mL蒸馏水，摇匀，再加1mL钨酸钠溶液（3.2）,摇勾，加1mlL硫酸溶液（3.4），摇勾，过滤备用，
4.4取上述滤液2mL，分别注入二支25mL具塞的比色管中。各加入15mL水，1mL酒石酸钾钠溶液（3.3），2mL钠氏试剂（3.6），最后以蒸馏水定容至25mL，摇匀。观察结果。5分析结果的表述
分析结果按表1进行判断。
表 1 结果的判断
腺酶定性
强阳性
次强阳性
弱阳性
表示符号
显示情况
砖红色混浊或澄清液
桔红色澄清液
深金黄色或黄色澄清液
淡黄色或微黄色澄清液
样品管与空白对照管同色或更淡
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