【国家标准(GB)】 食品中合成着色剂的测定

ICs: 67.040
中华人民共和国国家标准
CB/T 5009. 35—-2003
代答GR/E005.35—1用6
食品中合成着色剂的测定
Determination of svnthetic cnlnur in Fds2003-08-11发布
中华人民共和国卫生部
中国国家标准化管理委员会
2004-01-01实施
GB/T5009.35—2003
本标准代者CB/T5009.351996.食品中合放有包剂的测定法3.本标准与GH/T5009.35—1SSG相比±要整改折下：改了标准的中文名称，标摊中文案称改为&食品中合成若色剂的测定3：按照（H/个20CC1.1一2Uu1标准编写规则第4部分：化学分析方法3对原标准第结构进行厂静收；
一加了示波圾增法作为第一达，木标出中将人民共和户卫部提出产归几本标准·法由天法市食品卫生监督检验所、工宁者食品尘监督控验所、宁测回族自治文卫生防疫站、西安市卫生防疫站负责起草，本标难第，法由卫牛部食品卫生监督检验所负产起草，本标准第一达出止生部食品用监情检验所负变起草。本标准十193年首次发布，于1996年第一次修，本次为第次候订276
■范田
食品中合成著色剂的测定
本标准规定了食马中合成若削的测定方达.本标准适月」食品中合成包剂的测定，GB/T5009.35—2003
本方达格出限：新红5g柠惊黄g、宽红、胭胎汇Ag、日落黄7g东整18、完临26ng.当进带早相当0.02sg时.报山法压分别为n2mg/kg：0.16mg/kg0.24mg/kg：C.32nag/kg51. 28 mp/hg10. 7? mx/kg;1. t4 mg/kg.第一法商效液相色谢法
2原理
食品中人1合必者色剂用累配胶吸附法感液液分配益凝取，制成水落液，注人商效滋相色送仪：轻反拍包谱分两，根据保留时训定件和与障面积比套进行定量，3试剂
3.2 盐酸.
3.3乙酸。
3. 4中：经0. Mm满膜过滤
紧能假粉（比6）：过200片筛：3.6乙酸境降液（0.02mol/1.)，新取1,i4R乙醇段，水全1000mL率舞，经0.45Am就膜过述.3.73
究水：量氨水？ml.，加水至1nL，混匀3.8
水-乙酸饺探液（0.32ma1/1.)量取氨本0.ml.，乙熟熔液（0.02ol/L至100umI，混匀.
3. 9 甲醇-甲酸[i一4]济波;射较甲程 60 nL,平甲酸 4U ml.,笼,3.1C疗恢酸密液：称取20g学燃酸(CTL，·H心>.加水至100m，浮解滤匀无木等氨水水（712+1)率液：盘液尤水乙醇7Gm1.氢水20ml.本101ml.很列3. 11
3.12一止率唤止丁醇格准（5%）保放三l辛胺5mL.加下厂醇至100L，混勾。3.13他和依威钳溶液。
3.14硫收询激线(2≤/L)。
3,15E6的水水加控爆酸游商谢H值创。3.15、个设若色剂标准游波：准确称取按其纯座折巢为【00还质量的柠样黄，日落黄，苋乘红、删脂红、新红、赤醉红、光蔬、糖各0.:00K.置1mT.容耳瓶中、H6水乳剂唑，配双木落夜:.00 mg/ml.)
3.17合成考色剂标准用效性同F1上述落落（或将3.16）闻水稀释20倍，经0.45μm泄要过涉，配成年享当的合成色剂。
4仪器
高效微相消，带紫好检规器，2F1rm波长。277
GB/T5009.35·-2J03
5分析步骤
5.1试拌处埋
5.1.1桔于汁，果外水,果于露水等：称表3U.0多~4V.：放人10mL楚杯小合二至信娱试详加热驱除氧化破。
5.1.2配制洒类：称收20.0g~-40.Cg放10CmL环牛.圳筛片数片，加热驱除艺尊，5. 1.3碰纳,忧英，数神：格亚5.20R~10.(0 舒碎式样，放人200mL小晓杯、加水3U，温热落超.若试拌落浓H值较商.用疗燃致熔够词2I值到t片右。5.1.4巧克力.及者色树衣制品：彩取1.M~1.)&放人1mT.小杯中，用水反克洗涤索，9试样无包黎方止，合并色求累洗被为试详落液。5.2色囊提取
5.2.1聚脱胺滋陷法：缺栏游液那行探酸落波调值到！5.加热至6U℃.的！6聚按势切少计未调离带状，倒人试样落滴中，烧产片划，以G3币融漏斗抽浓，用iopI=1范选涨政--5次，然后用醇甲曲涯合溶敏洗漆3次~3次（含赤攀红的试峰用，2.“法处埋）再月水洗单中斗，升醇-氨水限合再液解强3达~5次，每次5al..收东解收液.酸中和莱发主近十，水净解：定空至三ml.经5.5滤膜过滤.101.进产效商相色错5.2.2液-液范以适用于含森降红的试慎）：将备好的择碎被放人分没调斗山，抓2m.生截三正正标率能（)：L23m派密宠取：分最有机相.再复提取至有机相无，合并有机，H饱和统酸销落被证2改，每次mT分取有机消欣款发血4，水加热架箱1m转移至分频满中，6上己烷，低匀加或水提取次~饮，每次m合并氢水溶液层（含水暗件吸性也求）用正口洗”次，需不店之龄调城中非、水刘热露发至十，刘水定容至。滤需0,：r过滤，取1.递高效液和色谱仪。5.3高效液相色谱参考条件
5.3.1栏,Ywciclrm不透例*4.emmi,dx.2aumm5.3.2满克相：手/2按（pH=4,2.02mo1/1）5.3.3洗脱，甲醇：20~6.3%/io:35%-98%.9%/min；98%线6i5.3.4流读:1 n1./mir.
5.3.5紫外搭衡器，27源长，
取相同体积样浓和合或老色制标带使用液分别栏人高效波相色潜发，版据保留时间定作，外标性面程法定地：
5.5结果计算
总样中若色闪的含量按式（1)进行计算：1
X=：0×10g
式中：
试样中芳色剂的青盘.单安为克每=点(s/kg)；推液中若色齐的虽最，单位为微克。—述年产单位升rL)
V，——试详稀源总体积,单位为毫升“试详质员，些位为克)。
计算结不南两位有效数疗，
5.6精度
GB/T 5009.352003
在再急性条作下得的两次谢亨新定站具的绝刘差值不得留过并未半均逗的1心为。5. 7 其他
-业声;
-英菜江：
-素蓝：
:-—制监红,
提监：
图：八种誉色剂色藩分高图
第二法薄墨色谱法
e原理
水等性能性台成若色剂在献性系性下被聚缺按吸附，折准碱求长下解吸附，再用纸色语法或薄层色措法进行分高后，与标准比较定性，定量，最检山或为50。点量为1壹山法限芯为30mg/kp。7试租
7.1不油酸.沸程60℃.~92.
7.2甲醇
7.3染院胶粉ti龙e:2co H
7.4推胶G。
7.5统：110).
7.6中醇甲酸溶液：（G=4)，
7.7氢争化销路液（302/1.）
7.B海砂：克用盐酸(1-10)素席15nm用水至中烂，再用减至化纳溶液<50g/1.煮15mim.用水洗至中性，再于ICS名干燥：地于兵端家的能中：备历7.97游53%。
7.10Z醇-氨液：取mL氧水，加z醇(?%)至1mL279
CQ/T 5009.35—2003
7.1p6的水，用柠携眼率(20%）图节至pIJi7.12盐酸(1+=0)。
7.13竹燃酸溶液（200/1.）
7.14粮纳策（100号/T.）
7.15确资片处方法同7.8
7.16展并下：
上丁醇-无水艺醇-氨水（1%）（6+2+3），供纸色诺，7. 16. 2
证：J原吡院-水（1※十十4）供纸色诺用。甲乙酮丙雨本7133)：其纸色增用。7. 16.3
甲等·乙二胺-氢水（1u一十2)，供满层色诺用。7. 16. 4
且-氢水-乙醇(—1-10）：供需层色磨月7. 16. 5
7.16.6格檬酸纳再液（25g/1.)-氢水-乙醇（H-1+2），供薄层色谱月7.17合成色剂标准落液：按3.16方汰，分别配制有色剂的标准游液浓度为每密相当十1.（TLE。日萨色剂标准使用液：临用时吸取色案标准溶液务5.0mL，分别胃：0m1.容量瓶中.加eI16格7.18
水稀群至实，此溶液每亮升扫当干0.色列.e作器
8.1可至分光光度请。
8.2微盈注射账或血色求吸售，
8.3展开摊，25cm×6cm×4cm。
8.4尽析缸，
8.5键纸，中速滤纸，纸色谱用。8.6薄层，5cm×2n(r
8.7电收风机。
8.8水宗。
9分析步聚
9.1试样处理
点1.1果件水、果于器，汽水，称取50.0多试样于100mT.烧杯十，汽水需妇热驱除二套化嫩，9.1.2配制酒：称取10心，1：尽元样于100m1.烧杯中.碎瓷片效块加热座除之醇，9.1.3伸摘、线数、淀粉款摊：称取：.g或08扮摔的试样，止3CmL水热游解，右性液H值较高.月周柠楼单咨液(200g/L>调至pII4左石3.1.4奶糖，称取10.Ug粉碎网匀的试样，加30mL乙醇-氢错液箱虾，置水工缩至的2)rl.，之期市统落液十1)>调至磁性再加1.0m].值酸（110）［酸能熔（1K/1，便至自质次赛，立健，用少盛孕先涨，收集滤液。9.1.5蛋糕类：欧取：5.Cg粉碎均可的试，加海砂许混孕，月热风吹干用显（出手模已十漫现可：加人3m1石油醚挖片。放胃片刻，频出右油性、如此再复处均三次.以除去皆肪，吹干乃研细，全部例人G3重融谢斗或者通需斗中，用乙醇-氮落液添取色我，直争差色剂部提完，以下要S.1.4自“否尔浴上浓箔率约2m..”起依法操作，9.2峻附分离
将处理后所得的落波订热至)Y、加入0.5g\-1.0g案安粉充分提拌，用柠摄酸落滤(2C9R/,)谢FH至4·快者色剂完全被吸附，如游液还有面色，川以耳点一当案酰肢将。将吸附若色齐的案酰胺全部转人（坐满牛中过滤如用垂做调过能可以用水系慢设地抽满用的求反28u
GB/T5009.35—2003
铁涤，包次2Um边洗达琐拌若含有天然若色剂。光用甲晚中避落液洗漆1次3次，每次ml.，至然载无色为止。雨用7CT水多改沈怖全流出的落铺火中性。洗逸过程中应充分揽拌，然后用乙醇一多溶被分次帽股全部若色利，改案全部解吸激：于水游上监氨。如果为单色，则用水准确稀整牵50m..用分光光变达进行测定。如更为多种善年剂泥分液，则选行纸色诺或薄原色谱法分高后测定，即将上述溶随普水溶上浓清至2mL后移人ml.容量瓶中，用60%7醇流涤穿器，流满并人容量瓶中井蒂释至刻度。
9.3定性
9.3.1纸色调
取谱用纸，在断底达rm的起始线上分别点3-10.试性落浓12著色剂标准裕：违于分另别整有7.16.1.7.16.2前展开剂均层折缸十，用上行法展开.待榕剂前新展至1cm必，将谢纸取出下李气中晾十，与标准比较定性也圾.5mL禅液，在起始线上从左右点成条状，纸的左边点著色剂滴，依法展开，晾干后先定性后再供定取用。靛蓝在碱性条件下易视色，可用7.16.3展开剂、9.3.2牌后色谱
9.3.2.1层板的制备
称收1.6恶能要粉，0.4g可性淀粉及2码胶G置于合适的础中，15mL水研匀后，立乱骨浓布器中摘成厚度为0.mm的。在温晾十后，干30下爆1h.置干燥婴中备用。9.3.2.2点样
商板底边2c处将0.mL样兼从左到右点成与廉边平行的争状，报的左述点2L色索标准糖.
9. 3. 2.3展开
宽求红与晒脂红用7.16.4展开魔蓝与影蓝用7.16.5展开测柠誉黄与其他潜急用7.15.5展开剂，取适量展士利例人展开档中将薄层板放人展开，得若色剂明显分升后收出·恢平，与标准斑比轻，如长：相同阳同索：
9.4. 1试样测定
将纸色谱的条状色斑购下，同少草热水选锋数次，洗液酵人10工比色管中，并划水呢释至刻度，作比色测亲
将薄层色谱的兼状色班包括有扩散的部分·分到用鼠川刮下，移人漏斗中，用乙醇-氮搭饿辉吸著色剂，心量反氢多次至解吸液十蒸没血牛，于水裕上择去氮.移人1！mI.些色管中，加水至刻度，作比色用。
9.4.2标准曲制备
分别吸取0、0.1、1.0、2.0、1.C、4.0W:L咽脂红，览案红、柠操费、式落黄色素标准使用格减，或0、0.30.1、0.6、0.5、1.mL亮蓝.靛蓝色索标准快用落液，分别置了：19nm1比色管中，务加水帮师卒刻度。
上述试样与标准管分别用1m比色杯以管调节零点，十定被长下（钢脂红510m1，觉荣红52l1ml.柠模黄1%0nml，口落黄432am.充蓝627mm，旋蓝520m）.剃定吸光度，分别绘制你准曲线比较或与标确系列日测比较，
9. 5结果并螂
试样1老色剂的含匠接式（2)进行计葬：AX000
X==×VMx1 000
GB/\I50D9.35--2003
X试样中若色剂的含量，单位为克每下克1/g——测定同样谦中色亲的盘，单位为必克（MF)——试样质单效体识，单位为克成毫升（g或品）；V，一一试样解吸后总林积,单位为案升(mL))样镀点（纸)体积，单立为毫升.）。计筛结手识留两位有激数字
第三法示波极谱法
10原理
食品中的合成者色测，在与定的缓冲整变中·在款水电饭上可产生数感的教谱越·改高与老色剂的饿变试正比。当食品中存在一种或叫种以工互不影询通宗的育色时，用其选行定性定量分断，11试剂
11.1废液A：磷酸盐级冲液（常用十红色和放色复合色紊），作苋菜红、胸胎红、甘态黄，柠露黄以及载止若色齐的测定岸孩，
取13.光水二氢：KI和14.1光水磷酸室二NaEIP或3E.含结品水的磷酸氢二钠（Na[IP),，1HU)_及10.0氯氧化，州水溶解后烯泽至1。11.2底液：乙酸垫绥问液带用于绿色利监色望个色案），叫旋、充蓝、柠檬肯，口萨若色剂的测定底液：
星取40.m1.冰7腰，水约1mT入20,0光水乙曦讷解k模释率11.，11.3柠梯酸浮，2UUg/1-
11.4乙醇-氨溶液，取：ml.浓氨水，加乙醇（70：盆50tnL。11.5著色别标确牌收渐球取按其纯费折算为%质量均人介成若色剂6.10、游解后胃了容早能加水率刻度，此游滋1.G有剂，11.6若色剂标准使用溶液，吸取若色别标准弃鹿1.00m1.置下[001.1.产量瓶中，加水至刻废：此mg若色剂
12收器
12.1效机嵌谱仪。
12.2常用玻璃俊戏.下载标准就来标准下载网
13分析步累
13.1试样处理
13.1.1谈料和两类：取样10,：1-5.1>，的热驱陷-化利2辟冷却后用2)g/载化和缺醛（1+1)谢氧由件，然后加素谱水至原体积。13.1.2表层色索类：取排。.1K~10,0家藻水度女德洗立至色求完全被法脱：合洗脱液产宗容至一定本租.
13.1.3水来和果冻类：取样：，0，承求刘热游解，冷定案率，C，13.1.4划油类，取样5.0于50ml.离心咨中，压油感洗淡次：每次约2ml.l..升股璃炼搅勺，离心·弃上消级，低温拆去线函的石油片月乙再-氮游液熔解并穿至25，心uL，岛心，取上消策一定量求浴益了，用道量的水加热溶耀在素，而水法人?L字盘瓶定告，2
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13.1.5奶糖炎取5.3g落乙酶赋缩收至2.0rl.离心，取上清液20.ml.加水20ml.样大约20mL冷却用2C0/L胶调±PH4.间人29J月案做胶然C.5是-1.0元分抢快色素完全吸附法用L酸性水洗人m高心管心，办上层液准，沈淀物这复用睡性水洗涤3次--4次后，用适鼠践性水洗人含浓纸的谢斗中。用乙醇-氨奔双洗脱色索，物洗脱激水浴干，用适量的水加热降解色减.月.水洗入11mT，穿量鹿并实窄，13.2测定
13.2.1微谱条件，滴表电披，阶效，三电极断，扫描速19nmVs，底废A的创始扫描电位为(V.整止扣满电位为9V。参卡蜂电位为范莱红--42V、落黄一5.50V柠黄一.V治红一SV随益一0.2.底T的视始扫描电位为V整止扫猫电位为1.心V。参考电价（游液底商假阅使出择位正称，偏碱速十峰月位负移）：能益3.SV，落两一0, 32 V作像黄一C, 15 T,常益-3, 50 V,13.2.2标准供线：收取老色测标准使用游激：.5U，1..2.J.3.0W.4.0mL分别于_Jm比色也+加人500l底液用水定奔签10.0l银度分别00501.00200.3004.00ml.泥后于微机锻借仪上测定，为试剂空自降滚。13.2.3试栏测定,取试样处埋较核1,6ml.或定量分色来降电官较时,尽量减懈获）.加底液5.m加水至.w.搭与标准系列波同村漫定：14计算
试样中书色剂估查保按式3进行计解：X-
武中：
: ×0
xVXVX:30X13
X—试样中剂的含，单位为每或点年：克5或Rkg?\-——近样测定液中若色剂的含量，单依为域完每毫升(-/-)；Jre
件积单克
成样划定夜中成样义液的沐积，单位为毫：V一试排释作的总体积，单位为多mI）计共结品保留两值有效数宁。
15摘密度
在垂克性条件下状得的两次独订测定结果的对关伯不得超过算术平俏的心-,33
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