【农业标准】 动物衣原体病诊断技术

中华人民共和国农业行业标准

NY/T 562—2002

动物衣原体病诊断技术

Diagnostic techniques for animal chlamydiosis

2002-08-27 发布 2002-12-01 实施

前 言

衣原体病是由衣原体感染引起的一类具有公共卫生意义的自然疫源性疾病。目前已发现鸭、火鸡、鸡、鸽、鹅等140余种禽鸟和数十种哺乳动物，如绵羊、山羊、牛、牦牛、马、骡、驴、猪、犬、猫、兔、豚鼠、小鼠等可被衣原体感染，表现不同症状或呈亚临床经过。

衣原体病病毒对人体的健康构成直接威胁，人与病畜禽接触，往往会被感染，表现感冒样症状、眼疾和孕妇流产等。因此加强对本病的口岸检疫具有十分重要的公共卫生学意义。

衣原体属包括：鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci)、反刍动物衣原体(Chlamydia pecorum)、沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)和肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)，这4种衣原体具有共同的特异性属抗原。引起动物衣原体病的病原主要为鹦鹉热衣原体和反刍动物衣原体，而沙眼衣原体感染猪一般呈隐性经过。

在80年代，衣原体病补体结合试验(CF)操作规程和间接血凝试验(IHA)操作规程已被分别纳入农业部颁布的动物检疫规程，多年来被广泛地用于畜禽衣原体病监测和诊断。

本标准的附录A、附录B、附录C、附录E和附录F为规范性附录，附录D为资料性附录。

本标准由农业部畜牧兽医局提出。

本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：中国农业科学院兰州兽医研究所。

本标准主要起草人：邱昌庆、高双娣、周继章、杨学礼。

动物衣原体病诊断技术

1 范围

本标准规定了补体结合试验(CF)的直接法与间接法和间接血凝试验(IHA)技术。

本标准的直接补体结合试验(DCF)适用于猪以外的哺乳动物和鹦鹉、鸽(老龄鸽除外)衣原体病的进出境检疫和定性诊断，间接补体结合试验(ICF)适用于禽鸟(鹦鹉、鸽除外,但包括老龄鸽)和猪衣原体病的进出境检疫和定性诊断；IHA 试验适用于动物衣原体病的产地检疫、疫情监测和流行病学调查。

2 补体结合试验(CF)

2.1 材料准备

2.1.1 器材：$12\text{ mm} \times 37\text{ mm}$ 试管、试管架、水浴箱、U型 $96(8 \times 12)$ 孔微量滴定板、生理盐水。

2.1.2 补体：商品补体，按说明书使用和保存，试验前对供试补体需经补体效价测定。补体效价滴定方法见附录A。

2.1.3 溶血素：试验前对供试溶血素需经效价滴定。溶血素效价滴定见附录B。

2.1.4 $1\%$绵羊红细胞悬液，制备方法见附录C。敏化红细胞制备见第A.2章。

2.1.5 被检血清：应无溶血、无腐败(可加入 $0.01\%$硫柳汞或 $0.2\%$叠氮钠防腐)，试验前需灭能。不同畜禽血清灭能的温度和时间见附录D。

2.1.6 标准抗原和标准阳性、阴性血清(抗原和阳性血清效价测定的方法见附录E)，指示血清¹⁾。

2.2 操作方法

2.2.1 直接补体结合试验(DCF)(包括试管法和微量法)

2.2.1-1 试管法

按表1的程序操作。试验要同时设抗补体对照、阳性血清对照、阴性血清对照、抗原对照、溶血素对照和生理盐水对照。

2.2.1-2 微量法

用U型96孔反应板，按表2的程序操作。试验同时设抗补体对照、阳性血清对照、阴性血清对照、抗原对照、溶血素对照和生理盐水对照。

2.2.1-3 DCF 试验结果判定

在最后一次 $37^\circ\text{C}$水浴 $30\text{ min}$后，立即进行试验结果判定。

1) 指示血清：与该抗原相应的哺乳动物抗体。