【农业标准】 亚洲梨火疫病监测技术规范

NY

IICS 65.020.01
B 15

中华人民共和国农业行业标准

NY/T 2292—2012

亚洲梨火疫病监测技术规范

Guidelines for quarantine surveillance of
Erwinia amylovora (Burr.) Winslow et al.

中华人民共和国农业部 发布

前 言

本标准按照 GB/T 1.1 给出的规则起草。

本标准由农业部种植业管理司提出。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC 271)归口。

本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、浙江省植物保护检疫局、浙江大学。

本标准主要起草人：冯晓东、许志刚、林云彪、李红叶、胡白石、楼兵干、王荣渊。

亚洲梨火疫病监测技术规范

1 范围

本标准规定了农业植物检疫中亚洲梨火疫病的监测区域、监测时期、监测方法等。

本标准适用于全国范围内亚洲梨火疫病的监测。

2 原理

2.1 分类地位

亚洲梨火疫病菌 Erwinia pyrifoliae Kim et al. 属于肠杆菌科 Enterobacteriaceae,欧文氏菌属 Erwinia。病原菌呈短杆状，周生鞭毛，兼性好氧，不形成芽孢，不合成氧化酶，不还原硝酸盐。28℃在YPDA培养基上生长24 h~48 h后，可形成2mm的圆形白色菌落，菌落凸起不透明。该病菌主要为害亚洲梨(Pyrus pyrifoliae)，由其危害引起的亚洲梨火疫病为亚洲梨树上的重要检疫性病害。

2.2 监测原理

亚洲梨火疫病的田间症状、生理生化反应、致病性测试和PCR反应特征等是监测、检测与鉴定的重要依据。

3 仪器设备

显微镜、培养箱、摇床、高压灭菌器、微量移液器、PCR仪、凝胶成像仪、离心机、电泳槽和电泳仪等。

4 药品和培养基

4.1 药品

牛肉浸膏，蛋白胨，酵母提取物，蔗糖和琼脂等。所有试剂均为分析纯。

4.2 培养基

4.2.1 NA培养基

牛肉浸膏3 g,蛋白胨5 g,酵母提取物1 g，蔗糖10 g，琼脂15 g，蒸馏水定容至1000 mL,pH调至7.0~7.2,121℃灭菌20 min。

4.2.2 YPDA培养基

酵母提取物5 g,蛋白胨10 g，葡萄糖10 g,琼脂粉20 g，蒸馏水定容至1 000 mL,121℃灭菌20 min。

5 疫情监测

5.1 监测植物

梨、苹果、棠梨、山楂等蔷薇科植物，主要监测亚洲梨。

5.2 监测区域

重点监测疫情发生高风险区域，如亚洲梨集中种植区，境外引种繁育基地、集散地及周围其他寄主作物种植区。

5.3 监测时期

梨树开花期开始到果实膨大中期结束。

5.4 监测方法

5.4.1 访问调查