【轻工标准】 食品添加剂乳酸链球菌素

前 言

本标准非等效采用美国食品用化学品法典(FCC N1996)有关部分。由于英国阿普林巴雷特公司(Aplin &. Barret Ltd)是世界上首先生产乳酸链球菌素产品厂家，其质量较好，技术较先进，因此，鉴别及效价测定是参照 FAO/WHO1969 及营养会议报告集 No.45A,也就是英国阿普林 巴雷特公司现用的方法。

本标准由国家轻工业局行业管理司提出。

本标准由全国食品发酵标准化中心、卫生部食品卫生监督检验所技术归口。

本标准由浙江天台制药厂银象分厂、中国食品发酵工业研究所、中科院微生物研究所负责起草。

本标准主要起草人：姚目标、刘莲芳、吴玉宏、还连栋。

中华人民共和国轻工行业标准

QB 2394—1998

食品添加剂 乳酸链球菌素

1 范围

本标准规定了食品添加剂——乳酸链球菌素的技术要求、试验方法、检验规则及包装、标志、贮存、运输的各项要求。

本标准适用于由乳酸链球菌经微生物发酵提取而获得的天然的乳酸链球菌素，在食品工业中作为防腐剂。

2 引用的标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

• GB 4789.2—1994食品卫生微生物学检验 菌落总数测定
• GB 4789.3—1994食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定
• GB 4789.4—1994食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验
• GB/T 5009.3—1985食品中水分测定方法
• GB 5461—1992食用盐
• GB/T 8450—1987食品添加剂中砷的测定方法
• GB/T 8451—1987食品添加剂中重金属限量试验法

3 分子式、分子量

分子式：C₁₄₃H₂₂₆O₅₇N₄₉S₇

相对分子量：3348

4 技术要求

4.1  外观：灰白略带黄色粉末。

4.2  理化指标：见表1。

表1

4.3  微生物指标：见表2。

QB 2394—1998

表 2

5 试验方法

本标准所用的试剂和水,在没有其他特殊要求时,均使用分析纯试剂和蒸馏水或相当纯度的水。

5.1 鉴别

$\alpha$-胰凝乳蛋白酶对乳酸链球菌素具有专一性,在乳酸链球菌素中加入$\alpha$-胰凝乳蛋白酶(根据酶活力而定),乳酸链球菌素活性立即消失。同时,乳酸链球菌素热稳定性与其它蛋白相比具有特殊性,在pH值为2的乳酸链球菌素悬液,121 C,30 min,乳酸链球菌素活力保持不变。

5.2 效价的测定

5.2.1 试剂和溶液

5.2.1.1 0.02 mol/L盐酸。

5.2.1.2 1.5%的Tween(吐温)-20。

5.2.1.3 标准溶液的制备

准确称取乳酸链球菌素标准样品,悬浮于0.02 mol/L盐酸中,使浓度为2 mg/mL,摇匀,用0.02 mol/L盐酸稀释成300,600倍,即成高低剂量标准溶液。

5.2.1.4 培养基为S₁,其配方为:

5.2.1.5 菌株悬浮液的制备

用接种环取一环已培养好的检测菌(黄色微球菌,NCIB 8166)放于6 mL灭菌生理盐水中,充分震荡、混匀,即成。

5.2.2 测定步骤

5.2.2.1 样品溶液的配制

称取一定量的样品,用0.02 mol/L盐酸溶解后,稀释成高低剂量样品溶液,具乳酸链球菌素含量,按估计单位高、低剂量与标准品溶液大致相当。

5.2.2.2 平板的制备

将S₁培养基冷却至约70℃,加入1.5% Tween-20充分混匀,待冷却至50 C。加6 mL菌株悬浮液,混匀后小心倒入已水平放置的平板上。待凝固后,放置无菌室内约1 h,置4℃冰箱存放至次日使用。使用前用打孔器在平板上打出所需的孔数,小心弃去孔中琼脂块。

5.2.2.3 滴加溶液

用取样器向琼脂孔滴加等量的高、低剂量标准溶液和样品溶液。

5.2.2.4 恒温培养

滴加样品溶液后,水平移入30℃恒温箱中培养20 h~24 h。

5.2.2.5 测量与计算

用卡尺测量抑菌圈直径,取其平均值,按下式计算: