【国家标准】 新城疫检疫技术规范

中华人民共和国国家标准

GB 16550—1996

新城瘟疫检疫技术规范

Technical code of quarantine for newcastle disease

1 主题内容与适用范围

本标准规定了新城疫群体检疫、个体检疫、实验室检验和检疫后处理的技术规范。

本标准适用于鸡和其他可感染新城疫的禽类。

2 引用标准

GB 16548—1996 畜禽病害肉尸及其产品无害化处理规程

3 群体检疫

对养鸡场、独立饲养的禽群及外售、外运的禽群施行检疫。

3.1 查明疫病背景

通过询问兽医人员或检查疫病史，核查被检禽场（群、室）在过去一年内是否出现过新城疫临床病例，是否有与新城疫病倒接触史，周围 2 km 范围内是否发生过新城疫。

3.2 查清免疫状况

通过查验免疫证明或查询其他资料，核查被检禽群是否已按规定注射合格疫苗。如按规定免疫并正处于规定的保护期内，禽只健康状况良好，被认为免疫合格。如免疫不符合规定要求，要以合格疫苗再次接种，隔离饲养观察至群体抗体滴度达 $2^5$ 以上，全群健康，认为免疫合格；观察期内发现疑似新城疫病禽，须按 3.3 条和 3.4 条要求进一步检查。

3.3 群体临床检查

首先作静态检查，让禽群处于静止状态，观察营养状况、精神状态、呼吸、粪便、鼻及口腔分泌物有否异常。然后观察禽只运动状况，有无跛行、共济失调、痉挛等异常现象。检查中重点注意以下情况：

• 精神沉郁或无任何症状而死亡；
• 体温升高，食欲减退，精神萎顿，产蛋减少或停止；
• 口腔和鼻腔分泌物增多，嗉囊胀满；
• 呼吸困难、喉部发出“咯咯”声（晚间较明显）；
• 下痢，粪便成绿色；
• 偏头转颈，作转圈运动或共济失调。

若发现疑似病例，按 3.4 条要求进一步检查，同时对全群隔离饲养。

3.4 病理解剖检查

对临诊疑似病例，应全部或抽样解剖，依据下述病变作出初步判断：

• 口腔、咽喉部有粘液，咽部粘膜出血；
• 腺胃乳头肿胀，挤压后有豆腐渣样坏死物流出，乳头有散在的出血点；
• 肌胃角质下层有条纹状或点状出血，有时见不规则溃疡，腺胃与肌胃交接处有出血斑、条。

国家技术监督局1996-10-03批准1997-02-01实施

GB 16550—1996

d. 小肠前段有大面积散在出血点，或肠粘膜有纤维性坏死并形成假膜，假膜下出现红色粗糙溃疡；

e. 盲肠和直肠被褶处有出血，盲肠扁桃体（淋巴结泡）出血坏死；

f. 气管粘膜充血、出血、气管内有粘液；

g. 心冠脂肪、心耳外膜及心尖脂肪上有针尖状小出血点。

4 个体检查

4.1 在无群体检疫条件的场合，须进行个体检疫。个体检疫合格的禽只一般供食用，如继续饲养应隔离三周，经观察无异常后，方准与其他禽只混养。

4.1.1 查明是否来自疫区。

4.1.2 查验免疫证明。

4.1.3 临诊检查和病理解剖检查

检查内容参照3.3条和3.4条进行，发现疑似新城疫染疫禽只，立即作无害化处理。

5 实验室检验

5.1 下列情况进行实验室检验

a. 产地定期检疫；

b. 监测免疫状态；

c. 疑似病鸡的定性，或临诊及解剖检查初步诊断为新城疫，需进一步确诊；

d. 检疫中发现重大疫情（如禽流感），须作鉴别诊断；

e. 行政主管部门、饲养单位、收购或争议双方要求进行实验室诊断。

5.2 实验室检验方法

a. 病毒分离鉴定试验，见附录A（补充件）。

b. 血凝抑制试验，用于免疫监测，见附录B（补充件）。

6 检疫后的处理

6.1 经临诊检查、解剖检查和实验室诊断等综合判定，确诊为新城疫的禽群或禽只，按GB 16548处理。

6.2 经初步诊断为新城疫可疑的禽群（禽只），按下述方法之一处理：

a. 除将可疑禽只按6.1条处理外，全群隔离饲养，并进行紧急免疫接种，如在接种后观察期内出现可疑禽只，亦按6.1条处理。观察21d后，对临床健康，免疫滴度达到2⁴以上的禽只，经体表消毒后按健康禽只对待。

b. 经初步诊断为新城疫可疑的禽群（禽只），在全群隔离饲养的同时，对可疑禽只采样作实验室诊断；如确为新城疫者，全群即按6.1条处理。

6.3 发生过新城疫的禽场在半年之内，其禽只不准出售、外运。

附录 A
病毒分离鉴定试验
(补充件)

A1 仪器设备

• a. 注射器：1 mL；
• b. 注射针头：5～5 $\frac{1}{2}$号；
• c. 血凝试验板，V型、96孔；
• d. 微量移液器；50 μL；
• e. 恒温箱；
• f. 超净工作台或无菌室。

A2 试剂

• a. 无菌生理盐水；
• b. 青霉素；
• c. 链霉素；
• d. 标准阳性血清。

A3 样品采集及处理

A3.1 活禽用气管拭子和泄殖腔拭子（或粪）。

A3.2 死禽以脑为主；也可采心、肝、脾、肺、肾、气囊等组织，

A3-3 样品用生理盐水研成 1：5 乳液；拭子浸入 2～3 mL 生理盐水中，反复吸挤压至无水滴出，弃之。溶液中加入青霉素（使终浓度为 1 000 单位/mL）、链霉素（使终浓度为 1 mg/mL）。泄殖腔拭子（或粪）样品，青霉素、链霉素量提高 5 倍。然后调 pH7.0～7.4,37℃作用 1 h,再 1 000 r/min 离心 10 min,取上清 0.1 mL 经原囊腔接种 9～10日龄 SPF鸡胚。

A4 培养物的收集及检测

A4.1 培养 4~7 d的尿囊液经无菌采集后-20℃保存。

A4.2 尿囊液按附录B(补充件)作血凝试验,并与标准阳性血清作血凝抑制试验,确定有无新城疫病毒繁殖,

A4.3 MDT(最小病毒致死量引起鸡胚死亡的平均时间)的测定:将新鲜尿囊液用生理盐水连续 10倍稀释,$10^{-6}$~$10^{-7}$的每个稀释度接种5个9～10日龄SPF鸡胚,每胚0.1mL,37℃孵化。余下的病毒保存于4℃，8h后以同样方法接种第二批鸡胚,连续7d内观察鸡胚死亡时间并记录,测定出最小致死量,即引起被接种鸡胚死亡的最大稀释倍数。计算MDT。

A4.4 以 MDT确定病毒的致病力强弱,40～70 h死亡为强毒,140h以上为弱毒。