【地方标准】 猪瘟抗体金标试纸检测方法

DB35/T916—2009 福建省地方标准 猪瘟抗体金标试纸检测方法 发布：2009-04-24 实施：2009-05-30 发布单位：福建省质量技术监督局 前言 为开展猪瘟免疫监测，了解生猪猪瘟抗体水平，指导猪瘟免疫工作，特制定本标准。本标准由福建省农业厅提出并归口，由福建省质量技术监督局批准发布。 本标准起草单位：福建省动物疫病预防控制中心、福建省标准化研究所。 本标准主要起草人：金颜辉、林臻毅、吴波平、林芬、梁静、许先明、黄雁、洪英、王海瀛。本标准为首次发布。 1 范围 本标准规定了猪瘟抗体的免疫金标试纸法检测方法，适用于猪血液或血清中猪瘟抗体水平的测定。 2 试验原理 本方法应用酶联免疫原理和胶体金层析技术制成快速检测猪瘟抗体的免疫金标试纸。试纸由加样区、检测区和吸水区三部分组成。 在检测区中，将猪瘟抗原和兔抗猪瘟抗体分别包被于检测线（T）和对照线（C）；在加样区包被胶体金标记的猪瘟抗原。 检测时，在加样孔（S）中加入待检猪血液或血清样品，在层析作用下样品向试纸上部移动，首先溶解干燥的猪瘟胶体金标记抗原，并携带其向检测区移动至检测线（T）。 若样品中存在猪瘟抗体，则检测线（T）上的猪瘟抗原与金标抗原及样品中的抗体形成免疫复合物，出现紫红色条带；若样品中无猪瘟抗体，则检测线（T）不显色。 随后，样品继续移动至对照线（C），与兔抗猪抗体结合形成紫红色条带，以证明试纸有效。 检测线（T）色带的深浅与样品中猪瘟抗体水平呈正相关：抗体水平越高，色带越明显。 3 测试卡 猪瘟抗体免疫金标试纸封装于塑料卡中形成测试卡，采用铝箔密封，并内置干燥剂以防吸湿。测试卡可在室温或冷藏条件下保存。 测试卡结构包括：加样孔（S）、检测区、检测线（T）及对照线（C）。 4 试验仪器及材料 微量加样器或滴管。 5 试验步骤 5.1 将测试卡平放在桌面上，在加样孔（S）中加入50μL～100μL待检样品，或用滴管滴加2～3滴样品（样品不得腐败变质）。 5.2 在常温下静置20min～30min后判定结果。