【GB国家标准】 牙膏中维生素z维生素B3和维生素B的测定高效液相色谱法

ICS71.100.40
中华人民共和国国家标准
GB/T36921—2018
牙膏中维生素B2、维生素B3和
维生素B6的测定
高效液相色谱法
Determination of vitamin B2,vitamin B and vitamin Be in toothpaste-Highperformanceliquidchromatography2018-12-28发布
国家市场监督管理总局
中国国家标准化管理委员会
2019-07-01实施
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。GB/T36921-—2018
本标准由全国口腔护理用品标准化技术委员会牙膏分技术委员会（SAC/TC492/SC1）归口。本标准起草单位：苏州质量检测科学研究院、好来化工（中山）有限公司、完美（中国）有限公司、广州质量监督检测研究院、苏州世谱检测技术有限公司、广东华鑫检测技术有限公司、江苏省食品药品监督检验研究院、江苏省产品质量监督检验研究院、河北省食品检验研究院本标准主要起草人：车文军、李晓敏、黄金凤、张征、黄荣荣、方萍、袁利文、刘园、廖华勇、郭新东、卢剑、武中平、侯向昶、张岩。I
1范围
牙膏中维生素B2维生素B3和
维生素Bs的测定
高效液相色谱法
本标准规定了牙膏中维生素B、维生素B和维生素B的测定方法。本标准适用于牙膏中维生素B、维生素B3和维生素B。含量的测定。2规范性引用文件
GB/T36921—2018
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
试样用水提取，丙酮沉淀后，采用高效液相色谱法测定，以保留时间定性，外标法定量。4试剂或材料
水：GB/T6682规定的一级水。
浓盐酸：分析纯。
4.3甲酸：液相色谱级。
甲醇：液相色谱级。
4.5丙酮：液相色谱级。
庚烷磺酸钠：优级纯。
丙酮溶液：准确量取10mL丙酮（4.5）和90mL水，混匀。4.8
盐酸溶液：准确量取100mL浓盐酸（4.2)缓慢倒入100mL水中，混匀。庚烷磺酸钠溶液：准确称取1.0g庚烷磺酸钠（4.6），用950mL水溶解，用甲酸（4.3）调节至4.9
pH=2.5.用水定容至1L。经0.45μm滤膜过滤。对照品：维生素B（核黄素）、维生素B（烟酸、烟酰胺）和维生素B（盐酸吡哆醛、吡哆醇、盐酸吡4.10
哆胺），纯度≥99%，其中文名称，英文名称、CAS登记号、分子式参见附录A中表A.1。4.11核黄素贮备液（0.25mg/mL）：用分析天平称取25mg（精确至0.1mg）核黄素对照品（4.10），加人2mL盐酸溶液（4.8），超声溶解后，用水转移至100mL棕色容量瓶中，定容至刻度。贮备液在0℃~4℃避光条件下保存，可保存3个月。4.12烟酸、烟酰胺、吡哆醛、吡哆醇、吡哆胺贮备液（各为1mg/mL)：准确称取0.1g（精确至0.1mg）相应的对照品（4.10），分别置于100mL棕色容量瓶中，用水溶解、定容至刻度，配制成浓度为1mg/mL的贮备液。贮备液在0℃～4℃避光条件下保存，可保存3个月。注：使用盐酸吡哆醛、盐酸吡哆胺作为对照品时，溶液的浓度换算成以吡哆醛、吡哆胺计。1
GB/T36921—2018
5仪器设备
高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器。5.1
5.2分析天平：感量为0.1mg和0.01g。5.3
3离心机：转速不低于15000r/min。5.4涡旋混合器。
滤膜：0.45μmc
6试验步骤
试样处理
用分析天平准确称取10g（精确至0.01g）试样，加人15mL水，于涡旋混盒器上混匀1min后，移人25mL棕色容量瓶中，加人2.5mL丙酮（4.5），用水定容至刻度，摇匀取部分溶液于离心管中，15000r/min
高心3min，上清液经0.45μm滤膜过滤后测定。6.2
液相色谱参考条件
液相色谱
考条件如
T3，25
柱：WatersAtlantie
流动相：A：甲醇08
.0mL/min
桂温：3o℃，
内径），
um.或相当者：
庚烷磺酸钠溶液（4.9）梯度洗脱参数见表1；进样量：10μL：
波长：核黄素、烟酸、烟酰胺261nm.吡哆醛、吡唑醇、吡噬胺290mm。表1梯度洗脱参数
时间/
标准工作曲线制作
流动相A/%
流动相B/%
用丙酮溶液（4.7）逐级稀释对照品贮备液（4.11和4.12），得到各系列标准工作溶液（见表2），按色谱条件（6.2.1)进行测定，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标作图，制作标准工作曲线。1）AtlantisT3是由Waters公司提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。2
对照品的液相色谱图及光谱图参见附录B中图B.1和图B.2。表26种对照品的标准工作溶液
对照品
核黄素
烟酰胺
吡哆醛
吡哆醇
吡哆胺
6.2.3试样测定
系列标准工作液浓度/（mg/L）
GB/T36921—2018
测定试样溶液（6.1），记录峰面积，以外标法定量。试样溶液中的被测物的响应值均应按色谱条件
在仪器测定的线性范围之内。被测物含量高的试样可取适量试样溶液用丙酮落液（47）稀释后进行测定。
空自验
除不加试样外，按上述提作步账试验数据处理
试样中各待测组分的含量的计算7.1
素B（核黄素烟酸烟酰胺吡哆醛，吡哆醇、吡哆腰的含量按式（1）试样中各待测组分[维生
计算：
式中：
X,=(p.-po)×V×f
试样中被测组分的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）试样溶液中被测组分的质量浓度，单位为室克每升（mg/L）空白试验溶液中被测组分的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；定容体积，单位为毫升（mL）
稀释倍数：
试样质量，单位为克（g）。
试样中维生素B的含量的计算
试样中维生素B的含量按式（2）计算：式中：
X烟酸脏
X烟酸
X=X烟酰胺+X烟腐X0.992
试样中维生素B的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）：试样中烟酸胺的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；试样中烟酸的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；+**（1）
GB/T36921—2018
烟酸的含量换算成烟酰胺的系数。注：试样中维生素B含量以烟酰胺计。结果保留三位有效数字。
7.3试样中维生素B的含量的计算试样中维生素B的含量按式（3）计算：X=X+XmX1.012+XX1.006
式中：
试样中维生素B的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；试样中吡哆醇的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）：试样中吡哆醛的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）试样中吡哆胺的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；吡哆醛的含量换算成吡哆醇的系数；吡哆胺的含量换算成吡哆醇的系数。注：试样中维生素Be含量以吡哆醇计。结果保留三位有效数字。
8检出限与定量限
·..中.........（3)
本标准的方法检出限为：核黄素、吡哆醛、吡哆醇为0.60mg/kg，烟酸、烟酰胺、吡哆胺为1.20mg/kg。
本标准的方法定量限为：核黄素、吡哆醛、吡哆醇为2.00mz/kg，烟酸、烟酰胺、吡哆胺为4.00mg/kg。
准确度
核黄素、吡哆醛、吡哆醇在添加浓度2.00mg/kg~20.0mg/kg范围内，回收率均在90%~110%之间。
烟酸、烟酰胺、吡哆胺在添加浓度4.00mg/kg~40.0mg/kg范围内，回收率均在90%~110%之间。
10精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。4
附录A
（资料性附录）
对照品的信息
GB/T36921—2018
对照品的中文名称、英文名称，CAS登记号、分子式、相对分子质量及结构式表A.1
中文名称
核黄素
烟酰胺
盐酸吡哆醛
吡哆醇
盐酸吡哆胺
英文名称
Riboflavin
Nicotinic acid
Nicotinamide
Pyridoxal
hydrochloride
Pyridoxine
Pyridoxamine
dihydrochloride
登记号
83-88-5
59-67-6
98-92-0
65-22-5
65-23-6
524-36-7
分子式bzxZ.net
CHsNOz
CHCINO
CHClNOz
相对分
子质量
结构式
GB/T36921—2018
附录B
（资料性附录）
维生素B2、维生素B和维生素B对照品溶液的液相色谱图及光谱图mAU
2=261mm
元=290mm
烟酰胺
核黄素
吡哆醇
吡哆醛
保留时间/min
维生素B2维生素B和维生素B对照品溶液的液相色谱图30
吡哆胺
波长/nm
烟酰胺
波长/nm
核黄素
波长/nm
吡哆醛
波长/mm
波长/nm
吡哆醇
吡哆胺
波长/nm
GB/T36921—2018
维生素B2、维生素B,和维生素B对照品溶液的紫外吸收光谱图
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