【国家标准】 食品安全国家标准 食品中乙氧基喹的测定

中华人民共和国国家标准
GB5009.129—2023
食品安全国家标准
食品中乙氧基喹的测定
2023-09-06发布
中华人民共和国国家卫生健康委员会国家市场监督管理总局
2024-03-06实施
本标准代替GB/T5009.129—2003《水果中乙氧基喹残留量的测定》。本标准与GB/T5009.129—2003相比，主要变化如下：标准名称修改为“食品安全国家标准食品中乙氧基喹的测定”；增加了液相色谱法：
一修改了第二法气相色谱法的试样处理方法、色谱参考条件和定量方法。GB5009.129—2023
1范围
食品安全国家标准
食品中氧基喹的测定
本标准规定了食品中乙氧基喹的液相色谱测定方法和气相色谱测定方法本标准适用于新鲜水果中乙氧基喹的测定。液相色谱法
第一法
2原理
GB5009.129—2023
试样中的乙氧基喹在碱性条件下经正已烷提取，氮吹至干后，含抗坏血酸的乙睛溶液复溶，液相色谱仪测定，外标法定量。
试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。3.1
氢氧化钠（NaOH）。
抗坏血酸（C.H.O）。
乙睛（CHN）：色谱纯
正已烷（CHi）。
试剂配制
氢氧化钠溶液（0.1mol/L）：称取4g氢氧化钠，溶于水并定容至1000mL含抗坏血酸的乙腈溶液：称取抗坏血酸0.1g，溶于100mL乙睛中，充分振摇，过滤，取滤液，临用现制。
3标准品
乙氧基标准品（ClHsNO，CAS号：91-53-2）：纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。
3.4标准溶液配制
3.4.1乙氧基喹标准储备液（1.00mg/mL）：称取乙氧基标准品100mg（精确至0.1mg）于100mL容量瓶中，用含抗坏血酸的乙腈溶液溶解并定容至刻度，混匀。将溶液转移至棕色玻璃容器中，于一18℃下避光保存，有效期为3个月。
3.4.2乙氧基喹标准中间液（10.0μg/mL）：吸取标准储备液（1.00mg/mL）1.00mL于100mL容量瓶1
GB5009.129—2023
中，用含抗环血酸的乙睛溶液定容至刻度，混匀。将溶液转移至棕色玻璃容器中，于一18℃下避光保存，有效期为1个月。
3.4.3乙氧基喹标准使用液（1.00μg/mL）：吸取标准中间液（10.0μg/mL)1.00mL于10mL容量瓶中，用含抗环血酸的乙睛溶液定容至刻度，混匀。临用现配。3.4.4乙氧基喹标准系列工作液：分别吸取标准使用液（1.00μg/mL）40.0μL、100μL、200u山、500μL、1000μL于10mL容量瓶中，用含抗坏血酸的乙睛溶液定容至刻度，混匀。乙氧基喹标准系列工作液的浓度分别为4.00ng/mL，10.0ng/ml.20.0ng/mL，50.0ng/mL、100ng/mL。临用现配4
仪器和设备
液相色谱仪：配有荧光检测器
组织揭碎机。
分析天平：感量分别为0.01g和0.1mg涡旋混合器
振荡器。
氮气浓缩装置。
离心机。
分析步骤
试样制备
取代表性试样可食部分500g，加入抗坏血酸10g，用组织捣碎机粉碎混勾加工成浆状，装入洁净的容器中，密封。制备好的试样于一18℃冷冻保存，尽快测定。注：当采用GB2763进行判定时.测定部位按GB2763的规定执行5.2
试样提取
称取5g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加人氢氧化钠溶液（0.1mol/L）5mL，涡旋混匀30s后，加入10mL正已烧，涡旋混匀30s，振荡提取15min后，以4000r/min离心5min，将正已烧层转移至25mL容量瓶中，向残渣加人10mL正已烷，重复提取1次，以4000/min离心5min，合并正已烷层于同一容量瓶中，加正已烷定容至刻度，混匀。吸取5.0mL正己烷提取液，于30℃下氮气浓缩至干，迅速加人含抗坏血酸的乙睛溶液5.0mL，涡旋混匀30s，经0.45μm有机微孔滤膜过滤，制得试样待测液。此内容来自标准下载网
3液相色谱参考条件
色谱柱：Cls色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）或性能相当者。b)
流动相：乙睛-水（65：35.体积比）。c)
流速：1mL/min。
柱温：30℃。
激发波长：365nm；发射波长：435nm进样体积：10μL。
5.4标准曲线的制作
将标准系列工作液分别注入液相色谱仪中，测得相应的峰面积，以标准系列工作液中乙氧基喹的浓2
GB5009.129—2023
度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。乙氧基喹标准溶液的液相色谱图参见附录A中图A.1。
试样溶液的测定
将试样待测液注入液相色谱仪中，以保留时间定性，测得相应的峰面积，根据标准曲线得到试样待测液中乙氧基喹的浓度。试样溶液中乙氧基喹色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间比较，变化范围应在土2.5%内。
分析结果的表述
试样中乙氧基喹的含量按式（1）计算X
式中：
pxV,xVix1000
VzXmX1000X1000
试样中乙氧基喹的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；由标准曲线得到的试样溶液中乙氧基喹的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；试样溶液的体积，单位为毫升（mL）；提取溶液的定容体积，单位为毫升（mL)；提取溶液分取体积，单位为毫升（mL)；单位换算系数；
试样的取样量，单位为克（g）：试样制备过程中添加抗坏血酸产生的换算系数。以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，计算结果保留2位有效数字。精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。8其他
本方法的检出限为0.01mg/kg，定量限为0.02mg/kg。第二法
气相色谱法
9原理
试样中的乙氧基醛在碱性条件下经正已烷提取，氨吹至干后，正已烧复溶，用配有氮磷检测器的气相色谱仪测定，外标法定量。
10试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。3
GB5009.129—2023
10.1试剂
氢氧化钠（NaOH)。
抗坏血酸（CH：O）。
正已烷（CH）。
试剂配制
氢氧化钠溶液（0.1mol/L)：称取4g氢氧化钠，溶于水并稀释至1000mL。10.3标准品
同3.3。
10.4标准溶液配制
乙氧基喹标准储备液（1.00mg/mL）：称取乙氧基喹标准品100mg（精确至0.1mg）于100ml容量瓶中，用正已烷溶解并定容至刻度，混匀。将溶液转移至棕色玻璃容器中，于一18℃下避光保存，有效期为1个月。
2乙氧基喹标准中间液（10.0μg/mL）：吸取标准储备液（1.00mg/mL）1.00mL于100mL容量10.4.2
瓶中，用正己烷定容至刻度，混勾。将溶液转移至棕色玻璃容器中，于一18℃下避光保存，有效期为1个月。
3乙氧基喹标准系列工作液：分别吸取标准中间液（10.0μg/mL）20.0μL、50.0μL、100l、10.4.3
200μL、400μL于10mL容量瓶中，用正已烷定容至刻度，混勾。乙氧基喹标准系列工作液的浓度分别为20.0ng/mL、50.0ng/ml100ng/ml.200ng/mL、400ng/mlL临用现配。11
仪器和设备
气相色谱仪：配有氮磷检测器。组织捣碎机。
3分析天平：感量分别为0.01g和0.1mg。11.3
11.4涡旋混合器。
振荡器。
氮气浓缩装置。
离心机。
分析步骤
试样制备
同5.1。
12.2试样提取
称取5g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加人氢氧化钠溶液（0.1mol/L）5mL，涡旋混匀30s后，加人10ml正已烷，涡旋混勾30s，振荡提取15min后，以4000r/min离心5min，将正已烧层转移至25mL容量瓶中，向残渣加人10mL正已烷，重复提取1次，以4000r/min离心5min，合并正已烷层于同一容量瓶中，加正已烷定容至刻度，混匀。吸取5.0mL正已烷提取液，于30℃下氮气浓缩4
GB5009.129—2023
至干，迅速加人1.0mL正已烷，涡旋混匀30s，经0.45um有机微孔滤膜过滤，制得试样待测液气相色谱参考条件
气相色谱参考条件如下：
色谱柱：弱极性石英毛细管柱（内涂5%苯基甲基聚硅氧烷，30m×0.32mm×0.25μm）或等a)
效柱。
载气：氮气，流速为1.5mL/min。进样口温度：250℃。
检测器：温度300℃，空气流量120mL/min，氢气流量3mL/min，尾吹气流量3.5mL/min。d)
柱温程序：初始温度80℃，保持1min，以10℃/min的速率升温至130℃，以5℃/min的速率升温至180℃，以30℃/min的速率升温至300℃.保持3min。进样方式：不分流进样。
进样体积：2μL。
12.4标准曲线的制作
将标准系列工作液分别注人气相色谱仪中，测得相应的峰面积，以标准系列工作液中乙氧基喹的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。标准溶液的气相色谱图参见附录A中图A.2。12.5试样溶液的测定
将试样待测液注入气相色谱仪中，以保留时间定性，测得相应的峰面积，根据标准曲线得到试样待测液中乙氧基喹的浓度。试样溶液中乙氧基喹色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间比较，变化范围应在士0.5%内。
分析结果的表述
试样中乙氧基喹的含量按式(2)计算。pxV×V×1000
V，XmX1000×1000
式中：
试样中乙氧基喹的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；由标准曲线得到的试样溶液中乙氧基喹的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）：试样溶液的体积，单位为毫升（mL）；提取溶液的定容体积，单位为毫升（mL)；单位换算系数；
提取液分取体积，单位为毫升（mL)；试样的取样量，单位为克（g）：试样制备过程中添加抗坏血酸产生的换算系数.（2)
以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，计算结果保留2位有效数字。14
精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。GB5009.129—2023
本方法的检出限为0.01mg/kg，定量限为0.02mg/kg。6
附录A
乙氧基喹色谱图
乙氧基喹标准溶液（20ng/mL）的液相色谱图见图A.1。A.1
乙氧基喹标准溶液（20ng/mL）的液相色谱图乙氧基喹标准溶液（100ng/mL）的气相色谱图见图A.2。pA
图A.2乙氧基喹标准溶液（100ng/mL）的气相色谱图GB5009.129—2023
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