【GB国家标准】 动物结核病诊断技术

GB/T 18645—2020 动物结核病诊断技术 Diagnostic techniques for animal tuberculosis 【目录】 1 范围 2 规范性引用文件 3 缩略语 4 临床诊断 4.1 流行特点 4.2 临床症状 4.3 病理变化 5 细菌学检查 5.1 器材 5.2 试剂 5.3 病料的采集、运送与处理 5.4 染色镜检 5.5 分离培养和生化鉴定 6 结核菌素皮内变态反应试验 6.1 器材 6.2 试剂 6.3 牛分枝杆菌PPD皮内变态反应 6.4 禽分枝杆菌PPD皮内变态反应 6.5 其他动物结核皮内变态反应 7 PCR检测 7.1 器材 7.2 试剂 7.3 采样及样品处理 7.4 PCR扩增反应 7.5 电泳检测PCR扩增产物 7.6 质控 7.7 结果分析及判定 7.8 PCR检测结果的确证 8 干扰素（IFN-γ）体外检测法（体外IFN-γ释放试验检测法） 8.1 器材 8.2 试剂 8.3 操作方法 9 诊断结果判定 附录A（资料性附录）试剂的配方 附录B（资料性附录）标本消化浓缩法 附录C（规范性附录）采样及样品处理（PCR检测用）DNA提取液 附录D（资料性附录）常规PCR扩增产物核酸序列 附录E（资料性附录）样品采集、包装和运输的要求 附录F（规范性附录） 【前言】 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 本标准代替 GB/T 18645—2002《动物结核病诊断技术》。与 GB/T 18645—2002相比，主要技术内容变化如下： 一、增加了引言； 二、增加了规范性引用文件（见第2章）； 三、增加了缩略语（见第3章）； 四、增加了临床诊断方法，包括流行特点、临床症状和病理变化（见4.1、4.2和4.3）； 五、增加了警示内容，对于剖检、采样及实验室开展相关病原检测部分及实验室接触有毒物质部分给以警示（见4.3）； 六、增加了其他动物皮内变态反应（见6.5）； 七、增加了 PCR 检测（见第7章）； 八、增加了干扰素（IFN-γ）体外检测法（见第8章）； 九、增加了诊断结果判定（见第9章）； 十、删除了动物接种试验的内容（见2002年版的2.3.1）； 十一、增加了常规 PCR 扩增产物核酸序列（见附录E）； 十二、增加了样品采集、包装和运输要求（见附录F）。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由中华人民共和国农业农村部提出。本标准由全国动物卫生标准化技术委员会 (SAC/TC181) 归口。本标准起草单位：中国兽医药品监察所、中国动物卫生与流行病学研究中心。本标准主要起草人：朱良全、丁家波、沈青春、孙明军、毛开荣、魏荣、许冠龙、冯宇。本标准所代替标准的历次发布版本情况为：GB/T 18645—2002。 【引言】 动物结核病是由分枝杆菌属的细菌引起的一种慢性、人兽共患性传染病，在全世界范围内严重威胁人类健康并影响畜牧业发展。分枝杆菌属主要由结核分枝杆菌复合群、麻风分枝杆菌以及非结核分枝杆菌所组成。而牛分枝杆菌、结核分枝杆菌是结核分枝杆菌复合群的成员，禽分枝杆菌属于非结核分枝杆菌成员。 牛结核病是国家二类动物疫病，也是《国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020年）》中16种优先防治的国内动物疫病之一，其病原主要为牛分枝杆菌。牛分枝杆菌的宿主谱广，几乎包括所有的温血脊椎动物。除牛最易感外，还可感染鹿、猪等多种动物；结核分枝杆菌主要导致人结核病，但也可感染牛；禽分枝杆菌禽亚种主要引起禽结核病。 动物结核病主要通过呼吸道和消化道感染，可侵害多种动物，家畜中奶牛最易感，其次为黄牛、耗牛、水牛、猪和家禽，野生动物中以鹿较为常见。该病临床上主要特征是病程缓慢、渐进性消瘦、咳嗽、衰竭，并在多种组织器官（如肺、肝、脾和肠道等）形成肉芽肿和干酪样钙化结节。近年来国内外对动物结核病防控十分重视，如发病率高、危害较为严重的牛结核病被世界动物卫生组织 (OIE) 列为必须通报疫病，也是国际贸易必检对象。随着国际贸易的蓬勃发展，动物结核病可在人及多种动物间传播，对畜牧业及公共卫生安全危害严重。目前我国采用的动物结核病的诊断技术国家标准为 GB/