【行业标准】 棉花抗棉铃虫性鉴定方法

ICS 65.020.01
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 2162—2012
棉花抗棉铃虫性鉴定方法
Rules of testing the resistance of cotton to cotton bollworm(HelicoverpaarmigeraHuibner)2012-06-06 发布
2012-09-01实施
中华人民共和国农业部发布
2009给出的规则起草
本标雅按照GB/T1.12
本标准由中华人民共和国农业部种植业管理可提出并归口。本标准起草单位：中国农业科学院棉花研究所。本标准主要起草人：珺瑜、崔金杰、马艳、土春义、张帅、品丽敏、辛惠江。NY/T2162—2012
1范围
棉花抗棉铃虫性鉴定方法
NY/T2162—2012
本标准规定了棉花对棉铃虫（Helteouerpa armigeraHubner)的抗虫性鉴定方法。本标准适用于转基因抗虫棉花(B1棉花、Bi十CpTI棉花）对棉铃虫的抗虫性鉴定。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注且期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本义件。GB 4407.1经济作物种子棉花种了3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3. 1
转基因抗虫棉花 Transgenic insect-resistant cntton通过基因工程技术将外源抗虫基因导人棉花基因组而培育出的具有抗虫新性状的转基风棉花品科（系）。
生物测定bioassay
在室内利用人工接虫的方法评价转基因抗虫棉花的组织器官对棉铃虫的抗性效果。3.3
幼虫死亡率larvalmortality
幼虫取食转基因抗虫棉花后死亡幼虫数占供试幼虫总数的百分率。3.4
蕾铃被害率rateof injaredcottonbuds and flower andbolls幼出取食转基树抗虫棉花后被害莆铃(包括花)占铃总数的白分率。4技术要求
4.1供试棉铃虫下载标准就来标准下载网
为人工饲料饲养的1d龄棉铃虫幼虫。4.2试验品种
转基因抗虫梯品种，常规棉对照品种。上述棉花种子质量达到CB4407.1中对种于质量要求。4.3试验设施
试验需在网室内进行，网室规格为长、宽、高分别为20m、3m和2m，龙龙网为60目。5试验方法
5.1试验设计与管理
网室内种植供试棉花品种或材料，每材料11株，每个网室为1次重复，共3次重复，以非转基因抗1
NY/T 2162--2012
虫棉品种为对照。网空内棉花栽培方式同人用，苗期可防治棉蚜，试验前7d～10d利用广谱性化学农药防治一次害出，使网空内昆虫干扰为零，5.2播种
按当地春棉或夏棉(短季棉）常规播种时期、播种方式和播种量进行播种。5.3试验方法
5.3.1第2代棉铃虫发生期棉花凿铃被害率检测5.3.1.1供试虫源和成虫释放量
试验书棉龄求对采自用们、经室人工何推羽化底的成求。释放前在养虫笼内自由交配，并喂送10环的蜂密水，3d后选择活动能力强的成虫释放于种植鉴定材料的网牵内成虫释放量为按继比1：1的比例,每10m2释放2对
5.3.1.2释放时期
棉花盛蕾期释放成虫，接虫吋间与棉日代棉铃虫发生期和一致。5.3.1.3结果记录
在成虫释放后第3d调香卵量，达到而株310粒卵为宜,香则要增加成虫释放量;第10d~15d调查各品种、材料的董铃被害数、健董铃数，分别计算蕾铃被害自分率，最后以常规棉为对照材料，算各鉴定材料的蓄饸被害减退率，计算公式为：凿铃被害率按式(1)计算：
式中：
Y一一蕾铃被害率，单位为白分率(%)；b一-被害蕾铃数，单位为个
-总酱数,革位为个。
筛铃被害减退率按式(2)计算：
我中：
Y,=Ye-Y
Y铃被害减退率,单位为而分率(%);Yi—-鉴定材料凿铃被害率,单位为白分率(%);Y。一对照材料蕾铃被害率，单位为白分率(%）。5.3.2第3代棉铃虫室内生物测定5.3.2.1取样方法
....(1)
在第3代棉铃虫发生盛期，分别从网率中采集鉴定材料和对照材料的顶部展开的第3片棉叶，每处理随机采集10件。
5.3.2.2操作步骤
在35mm×120mm试管中加1人20mL的琼脂培养基，将带有叫柄的叶片捕入培养基中保鲜，每试管放张叶片，每张叶片接棉饸1d龄幼虫5头。接虫后用脱脂棉瓣紧管口，以防棉虫逃逸放于25℃～28℃的养虫室或光照培准箱(L[)=14：10)中饲养。5.3.2.3结果记录
接后第5d检查幼出取食状况幼出死亡状况，记录幼业死亡虫数和活虫数，目测幼出取食状况，幼虫取食状况级别按表1执行，2
叶片被害级别
表1棉铃虫幼虫取食转基因抗虫棉叶片状况目测分级取食状况摘述
被害呈针头状不连片
被害呈小片，但不超过叶面积的25%被害成片超过叶面积的25%，但不超过叶面积的50%被害成片，超过叶面积的50%，但不超过75%被害成片-超过叶面积75为,叶片被大壁敢食，危害同常规对燕种劲出死亡率接式(3)计算：
式中：
X—幼虫死亡率,单位为百分率(%);-死虫数，单位为头
A—接虫数,单位为义。
校正死亡率按式(4)计算：
Xi-Xev
式中：
X,一幼虫校正死亡率,单位为百分率(%)；X1一鉴定材料死亡率,单位为百分率(%);X一对照材料死亡率,单位为百分率(%)。6判定
NY/T21622012
判定棉花对棉铃虫的抗虫性。转基因抗取棉抗性级别评定标准按表2执行。3项指标取其最低值判定。
表2转基因抗虫棉抗性评定
代棉铃虫发生期
黄铃被害减退率 Y,%
50Y≤80
30-Y≤.50
同对照品种
三代棉铃虫发生期
幼业校正死亡率X,%
叶片被害级别
10-x≤60
同对照品种