【行业标准】 番茄主要病害抗病性鉴定技术规程 第6部分：番茄抗番茄花叶病毒病鉴定

ICS65.020
中华人民共和国农业行业标准
NY/T1858.6—2010
番茄主要病害抗病性鉴定技术规程第6部分：番茄抗番茄花叶病毒病鉴定技术规程
Rules for evaluation of tomato for resistance to discasesPart 6:Rule for evaluation of tornato for resistance to tomato mosaic yirus2010-05-20发布
2010-09-01实施
中华人民共和国农业部发布
品伴网httr
NY/T1858.6—2010
NY/T1858—2010《番茄主要病害抗病性鉴定技术规程》为系列标雅，共8部分：第1部分：番帖抗晚疫病鉴定技术规程；--第2部分番加抗叶霉病鉴定技术规程，-第3部分：番茄抗枯萎病鉴定技术规程；一-第4部分：番茄抗青枯病鉴定技术规程；…一第5部分：番茄抗疮痴病鉴定技术规程，一”一第6 部分：番茄抗番茄花叶病毒病鉴定技术规程一第7部分：番茄抗黄瓜花叶病每病鉴定技术规程第8部分：番茄抗南方根结线虫病鉴定技术规程。本分为NY/T18582010的第6部分。本部分的附录 A为资料性附录。本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提并归口。本部分起芦单位：中国农业科学院蔬菜花卉研究所。本部分主要起草人：谢内炎、冯兰香、杨字红、杨翠菜、囊恐芝：T
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」范围
番茄主要病害抗病性鉴定技术规程NY/T 1858.6—2010
第6部分：番茄抗番茄花叶病毒病鉴定技术规程本部分规定了番茄抗番茄花叶病毒病鉴定的术语和定义、接种体制备、鉴定条件和试验设计，接种、病情调查、抗病性评价以及鉴定记载表格。本部分适用于栽培番茄（SotunurmntycupersicurmL）白交系、杂交种.群体、开放授粉品种以及野生番茄和番茄近种对茄花叶病毒病抗性的室内苗期鉴定和评价，2术语和定义
下列术评和定义适用于本部分。2. 1
番茄花叶病毒病Tomatomosnicvirus由番茄花叶病毒（Tomalumusuicuirus，IoMV)所引起的炳毒性炳害，病株呈现系统花叶，有瘤呼片偏小，稍为皱缩。病株时吓脉、叫柄和萃部往往出现长、短不一的坏死斑，果面也产生坏死斑；平病株稍矮化。
病原分离物pathogcnic.isolatc采用人工方法，从植物发病部位分离炭得的病原物的纯培养物2.3
株索strain
同种病牵中不同来源的、功清学相关的，但生物学性状不完全机同，或对不同穿主植物及不同品种具有致病力差异的变异类样。
鉴别寄主diagnostic host
川于鉴定利区分特定病原物的牛理小种/致病型/株系的一套情有不同抗性基因的寄土品种、品系或材料。
致病性pathogenicity
病原物所具有的破坏奇主植物和引起病变讷能力。2.6
接种体incnlun
府于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。2.7
接种悬浮液inoculunk suspersion用于接种的含有定量接种体的液体2.8
人工接种artificial incnlationht
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在适宜条件下，通过人工操作将接种体置丁精物休的适当部位并使之发病的过程。2. 9
病情级别disease rating scale人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述。2. 10
病情指数diseaseindex(Dr)
通过对植株个体发病程度（病情级别）数值的计算所获得的群体发病程度的数值化描述形式2. 11
抗病性 disease resislanc
植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作月的可遗传性状。2.12
抗病性鉴定 ealuation of disease resistatace道过适宣疫术方法整定植物对特定病害的抵抗水平。2. 13
抗性评价evaluation of resistancc levels根据采用的技术标准判别植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述。3接种体制备
3.1病原物分离
以常规汁液摩擦法，从具有典型番茄化叶病毒病症状的病叶「分离病原物。分离物经血清学、寄主范围、枯斑寄主、理化性状及传播方式测定，电子显微镜观察病毒粒子形态等方法鉴定，确认为番茄花叫病毒后，再进行分离物纯化和致病性测定，保存备用、3.2株系鉴定
用于抗病性鉴定接种的病毒分离物首先进行株系鉴定，鉴定方法参照附录A的A.2。3.3接种体繁殖和保存
3.3.1接种体繁殖
取少量番茄花叶病毒供试株系的新鲜病摩擦接种在“丽春\或“Maneymaker\番茄的健康叶片上，置防虫温室内(25℃～28%)培养约2周，采收病叶.1g鲜病叶加50mL的0.01T1ol/L磷酸盐缓冲液（p117.0)句浆，纱布过滤或3000r/min离心15tnim其滤液或上消液为接种悬浮液。3.3.2接种体保存
一种方法是将茄花叶病毒不同的株系接种在不闹的希茄品种上，即0株系，1株系，2株系和1，2株系分别接种在GCR26（或丽春番茄）、（GCR237、GCR526和GCR254潘茄植株上，置防出温室内长期保存，缺点是病毒容易被污染；另一种方法是将番茄花叶病毒不问株系的新鲜病叫制作成冻干叶，在一200以下保存2～3年。
冻干病叶的简易制作法：将新鲜病叶用淡菌剪刀剪成小映，在吸水纸上均勾匀地铺放一层，可照此连续铺放数层.但各层吸水纸之间应刀硅胶或氯化钙隔开，然后冒丁密封的容器里，再将容器置子4℃冰箱。头两天每天史换一次干燥剂，以后每两天更换一次，直到碎疯叶彻底干燥，整个制作过程应防止其他病霉的污染。
4鉴定条件和试验设计
4.1鉴定室
苗期抗病性鉴定的鉴定室川调节温度和光照的防出日光温空，使之具备良好的发病环境。2
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4.2鉴定设计
鉴定材料随机排列或顺序排列，每份鉴定材料重复3次，短一重复10株苗，4.3鉴定对照材料
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设“丽春”或\Moneymiakc\番茄为感病对照品种：抗病对照品种依接种的病毒株系而定，如接种0株系川GCR237番郝，1株系川GCR236番茄4.4鉴定材料育苗
鉴定种在10%磷酸三钠溶液中双池15min，清水冲洗片置于恒温培养箱中28C催芽，播种丁育苗筐内。育苗基质为草炭,蛭有和菜Ⅲ土（2：1：1)经高温蒸汽灭菌（134,30 min）。在口光温案里育首，室内溢度为18℃~25℃。幼苗应生长健壮、致。5接种
5.1接种时期
幼凿在2～3片真叶期进行接种，5.2接种方法
接种前，将番茄幼苗经黑暗处理·居夜，再在叶面「撒薄层600日金捌砂。常用两种接种方法：少量鉴定可采用摩搽接种法，即充分洗净的手指蘸取接种悬浮液，在叶而轻度摩擦造成微伤，每株苗接种第1~2片点大量鉴定采用喷枪接种法，即喷枪的杯内盛接种悬浮液，喷枪嘴叶片约2（m，空气乐缩机压方为205.9kPa～245.1kI\a，接种后立即川清水冲洗叶面上多余的病素汁液。无论采川哪利接种方法，一殿需接种两次：间隔3～5d。5.3接种后的管理
接种当天的室内温度为25℃～28%以后白天温度为22℃28%，夜间温度为20℃~22℃，常规光照，正常栽裁培管理。
6病情调查
6.1病情级别划分
幼苗病情级别及其相对成的症状描述见表1。表1番茄花叶病毒病病情级别的划分病情级别
6.2调查时间
接种后约21进行，
6.3病情记载
无症状
整状描述
心叶的为明脉，12片点叶旱现花啡中上花汁
多数叶片花叶，少数叶片崎形
多数叫片为重花叶,崎形、皱缩
几平所有叶片都为重花叶、畸形,皱缩，植株矮化较明显调查记载每一鉴定植株的病情级别,并计算病情指数，病情指数按公式(1)计算：
E(sXn)
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式中：
DI— 病情指数：
5—各病情级的代表数值；
n各病情级别的植株数；
N—.谢查总植株数；
S-最高病情级别的代表数值。
7抗病性评价
7. 1抗病性评价标准
依据鉴定材料3次复的病情指数（1)1)平均值确定其抗性水平，划分标准见表2。表2番茄对番茄花叶病毒病抗性的评价标准病情指数(DT）
抗注评价
免疫Tramme()
高抗Highly resislan(HR)
抗病 Resistant(R)
中抗 Moclerately rcsistant(MR)病 Snsceptible(S)
高越Highly ssyrible(IIS)下载标准就来标准下载网
2鉴定有效性判别
感病对照材料达到其相应感病程度（D150)时.该批饮鉴定视为有效，9
鉴定记载表格
番茄抗番盐化叶病毒病鉴定结果记载表格表3。番茄抗番茄花叶病毒病鉴定结果记载表表3
品种/种质
1.添种民划，
3，接种生肯期：
5.株系类型：
病情级别
2.接种口期：
4.接种病原菌分离物编号：
6，调查口期：
htti
鉴短技术负资人(签字)：
A.1学名和理化特性
A.1.1学名
附录A
【盗料性附录
番茄花叶病霉病病原和株系
番灿花叶病薄，学名Tumato yrosuicirus，缩写ToMV。A.1.2理化特性
NY/T 1858. 62010
病卓粒子直杆状，大小为 300nm×15nm，分子量为3.9×10，沉淀系数为177S，等电点为pHA.64，A20/A20为.17。核含量5%，单链RNA.分量为2X10%，G23：A28：C19：U30。外壳蛋自分子最为 2.000,含有 158个氨基酸,其红分为:Cys 1,Asp 17,1hr 15,Ser 14,Glu 17,Pro 8,Gly7,Ala 11,Val 14,Ileu 8,Leu 12,Tyr 3.Phe 8,Lys 3.Ar 14, Try。 病钝化温度 85℃-~90℃,稀释限点703~10-7，体外保毒期500d
A.2株系
A.2.1采用的鉴别寄主
鉴别主为6个GCR系统的番粘品种：GCR26、GCR237、GCR236、GCR526,GCR251和 GCR267。A.2.2株系鉴定
病原病毒分离物接种鉴别寄后，根据鉴别寄主病情级别算其病情指数(DI)从而确定抗性反应,以特的反应组合划分病毒株系(表A.1)。表A1番花叶病毒株系的鉴定
别主因型
心株系
1林系
2株系
1.2院系
2°株系
(+/ -)
GCR237
(in - 1/lm - 1)
GCR236
(Iin- 2\/n
GXR526
(lin -2/\lin -2)
GCH254
(lm-1/linl.h2
Ifm:2~)
注1:H.无病毒侵染,DI-D;S:有病毒接染并出现症状,0DI≤100,II+:无症带毒,DI=U.注2病市株系按Pelham(1970)的分类法划分，http
GCR267
2/Tm-2°)
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番茄主要病害抗病性鉴定技术规程第6部分：番茄抗番茄花叶病毒病鉴定技术规程NY/T 18E8.5 2010
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开本 880mm×1230mm 1/16
2019年5月第1版
印张 0. 75
字数7千字
2010年5月北京第1次印刷
书号：16109·2039
定价：18.00元
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