【国家标准(GB)】 食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法

IcS 67. 050
中华人民共和国家标准
GB/T23503—2009
食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法，Deicrmination of deoxynivalenol in food-Iligh performanceliquid chromatographic method with immunoaffinity column clean-up2009-04-08发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标雅化管理委员会
2009-05-01实施
中华人民共和国
国家标雅
食品中脱氧雪腐镶刀菌烯醇的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法GB/T 235032009
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本标准由全国食品I业标推化技术委员会(SAC/TC:61)提H。GB/T23503—2009
本标准由全图食品T.业标准化技术委员会食品通用检测技术分技术委员会（SAC/1C61/SC8):
木标雅起草单位：青岛市产品质员监督检验所、中华人民共和国东出人境检验检疫局、中检维康技术有限公司、青岛啤酒股份有限公司。本核滩主婴起草人：张群珍、下晓滨，节连菊昊嵌兴、林艳、李惠赖、下罐合品k伴网httn：//wuny：foodmatene1范围
食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法GB/T 23503--2009
本标准规定食品中脱氧弯腐镰刀菊烯醇含量的免疫亲和层析净化高效液相色谱测定方法，本标推适用丁粮食和粮食制品、酒类、酱油、醋、酱及酱制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量的测定。本标准的方法检出限：粮食和粮食制品的检出限为0.5mg/kg·酒类的检出限为0.1mg/kg，酱油、醋、酱及酱制品的检山限为 U.1 mg/kg。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注Ⅱ期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使这些文件的最新版本，凡是不注日期的引用文件，其最新版木适用丁木标准。G13/T6682分析实验宰用水规格和试验方法（(G3/T66822008，IS0）369G：1987,MOI))3方法提要
闭提取液提取试样中的脱氧舌腐镰刀菌烯醇，经免疫亲利耗净化后，用高效液相色谱紫外检测器测定，外标法定量。
4试剂和材料
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇:色谱纯。
4.2乙腈色谱纯，
4. 3案7二醇(相对分 \质量 8 000)4.4PRS清洗缀冲液：称取8.Cg氯化钠.1.2g磷酸氢二钠、0.2名磷酸.氨钾，0.2g氯化钾，用990 nl水将上述试剂溶解，然后用浓盐酸调节 pII至了.0.再用水释释至11-s4.5脱氧驾腐镰刀菌烯醇标准品：纯度298。4.6脱氧雪腐镰刀菌烯醇标雄储备液：准确称取一定量的脱氧背腐镰刀菌烯醇标准品，用中醇溶解，配成0. 1 g/mL的标准倦备液，在一20 ℃保存，可使用 3个月。4.7脱氰工腐镰刀菌烯醇标症工作液：根据使用需婴，准确吸收一定量的脱氧雪魔镰汀菌烯醇标准储备液用流动料稀释分别碰成租当0，1/m0./0././20/m5. 0 μ/n 的标独亡作液,4 C保存,川使用 d4.8脱氧腐镰刀菌烯醇免疫亲和柱4.9玻璃纤维滤纸：直径11cm.孔径1.5m。5仪器和设备
5.1大平感最0.0018.
5.2高效液相色谱仪配有紫外检测器或极管阵列检测器。5.3均质器：转速大于10000r/rminGB/T 23503—2009
5.4高速万能粉碎机：转速10ocot/min，5.5玻璃注射器：10ml.，
5.6试验筛：1mm孔径。
5.7空气压力象。免费标准bzxz.net
6分析步骤
6.1试样制备与提取
6.1.1粮食和粮食制品：将样品研离，硬质的粮食等用高速方能粉碎机磨细并通过试验筛（5.6），不要磨成粉未。称收25只精确到0.01g）磨碎的试样了100ml.容量瓶中加入5g聚乙二醇（4.3），用水定容至刻度，混勾，转移至均质杯巾，高速撒拌21in。定量滤纸过滤后以玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清，收集滤液A于于净的容器中。
6.1.2酒类：敢脱气酒类试样（含一氧化碳的酒类样品使用前先置于4C冰箱冷藏30tmin，过滤或超声脱气)或其他不含二氧化碳的酒类战样20g（精确到0.01g），加人1g聚7.一醇（4.3）,用水定容至25.0ml.，混匀，用玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清，收集滤液B下净的容器中。6.1.3酱池、醋、酱及酱制品：圾样品25g（精确到0.01g）加入5g聚乙二醇（4.3）.用水定容至1n0.0inL，高速搅拌提收2min。定量滤纸过滤所i，用玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清，收集滤液C于于净的容器中。
6.2净化
将免疫亲和杆连接于玻璃注射器（5.5）下，准确移取6.1中滤液A或B或C2.0ml.注人玻璃注射器巾。将空气压力泵与陂璃注射器相连接，调节压力，使溶液以约1滴/的流速道过免疫亲和柱，直至空气避入亲和柱中。用5mLPBS清洗缓冲被（4.4）和5ml.水先后淋洗免疫亲和杜，流速约为【滴/s2滴/，占至空气进人亲和柱中,弃个部流比液，抽干小柱，6.3洗脱
准确加入1.CmL甲醇洗脱流速约为1滴/s，收集全部洗脱液T1净的玻璃试管中，HPI测定。6.4高效液相色谱参考条件
a）色谱栏:Cl柱,5 μ,150 mX4.6 nm 或相当者：b）流动柏：甲醇「水(20+80);
c）流速:C.8 nL/min;
c杜温:35 ℃：
e）逃样量：50 μL；
检测波长.218nm。
6.5定量测定
以脱氧盂腐刀菌烯醇标准工作液浓度为坐标、以峰面积积分值为纵能标，绘制标推工作曲线：标工作曲线对试样逃行定量.标推工作溶液和试样溶中脱辑雪腐镰刀菌烯醇的响应值均应在仪器检测线性范制内。在.[.述色谱条件下，脱氧雪腐镰月菌烯醇标推品色谱图参见图A，1。6.6空白试验
除不加试样外，空白诚验应与测定平行进行，并采用相问的分析步骤。6.7平行试验
按以比步，对同一试样进行平行试验测定。7结果计算
试样中脱我雪腐镰刃菌橘醇的含量按式(1)计算：2

式中。
X-- (G -c)×V×1 000
mx1000
试样中脱氧舌腐镰』菌烯醇的含斥,单位为克每下克(mg/kg);试样溶被中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的浓度，单位为微克每亳升（μg/InL)；GB/T 23503—-2009
空自试样溶液巾脱氧雪腐镰刀菌烯婷的浓度，单位为微克衔毫升（/㎡L）；-甲尊洗脱液体积，单位为毫升（mL)m试样的质量，单莅为克g）：
于稀释倍数。
检测结果以两次测定值的算术平均值表示。计算结果表示到小数点后1位。8回收率
添加浓度在6,6ng/kg~2.1/时，向收率在70%~-100%之间。9重复性
在重复性条件下，获得的脱氧当腐镰刀菌烯醇的两次独立测试结果的绝对差值不大丁其算术评均值的【0%，
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GB/T23503—2009
GB/T 23503-2009
附录A
（资料性附录）
脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准品的液相色谱图2. 0
该长：21Rmml
脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准品液相色谱图图A.1
期： 200961H
http：
版权专有 侵权必究
号：155066·135052
定价：
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