【农业行业标准(NY)】 农药室内生物测定试验准则 杀虫剂 第2部分：胃毒活性试验 夹毒叶片法

ICS65.100
中华人民共和国农业行业标准
NY/T1154.2—2006
农药室内生物测定试验准则
第2部分：胃毒活性试验
杀虫剂
夹毒叶片法
Pesticides guidelines for laboratory bioactivity testsPart 2: The leaf sandwich test for insecticide stomach poisoning activity2006-07-10发布
2006-10-01实施
中华人民共和国农业部发布
《农药室内生物测定试验准则杀虫剂》为系列标准本部分是《农药室内生物测定试验准则杀虫剂》的第2部分。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：农业部农药检定所。本标准主要起草人：姜辉、欧晓明、倪珏萍、陶岭梅、王晓军、曹兵伟、本标准由农业部农药检定所负责解释。NY/T1154.2—2006
1范围
农药室内生物测定试验准则杀虫剂第2部分：胃毒活性试验夹毒叶片法本部分规定了夹毒叶片法测定杀虫剂胃毒活性试验的基本要求和方法。NY/T1154.2—2006wwW.bzxz.Net
本部分适用于杀虫剂胃毒活性测定的农药登记室内试验，其他试验参照本部分执行。2试验条件
2.1试验靶标
试验靶标应选择龄期一致、敏感的鳞翅目幼虫，包括黏虫（Mvthimnaseparata）小菜蛾（PlutellaTylostella）、菜青虫（Pieris rapae）茶尺（Ectropis obliqu）棉铃虫（Heliothis armigera）、斜纹夜蛾（Prodenia litura），甘蓝夜蛾（Mamestrabrasicae）、甜菜夜蛾（Spodopteraerigua）等2.2仪器设备
2.2.1电子天平（感量0.1mg）：2.2.2打孔器，毛细管点滴器：
2.2.312孔组织培养板；
2.2.4直径为9cm培养皿；
2.2.5烧杯；
2.2.6移液管或移液器；
2.2.7毛笔：
2.2.8镶子等。
3试验设计
3.1试材准备
选择室内饲养、3龄以上，龄期一致的敏感试虫。3.2药剂
3.2.1试验药剂
试验药剂采用原药（母药），并注明通用名、商品名或代号、含量、生产厂家。3.2.2对照药剂
对照药剂采用已登记注册且生产上常用药剂的原药。对照药剂的化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。
3.3试验步骤
3.3.1药剂配制
水溶性药剂用蒸增水溶解后用有机溶剂（内酮）稀释，其他药剂选用合适的有机溶剂（如内酮、二甲基亚矾，乙醇等）溶解并稀释。根据预备试验，按照等比或等差的方法设置5个一7个系列质量浓度。
3.3.2试虫准备
NY/T1154.2—2006
挑选龄期一致的试虫，饥饿4h8h，选取50头幼虫，用电子天平称量，计算每头平均质量。3.3.3夹毒叶片制作
用直径1cm的打孔器打取叶碟，放人培养血，并注意保湿。用毛细管点滴器从低浓度开始，每叶碟点滴1证一2药液，待溶剂挥发后和另一片涂有淀粉糊（或面粉糊）的叶碟对合制成夹毒叶碟，制作完毕放于12孔组织培养板的孔内。每处理4次重复，每重复不少于12个夹毒叶碟，并设不含药剂的相应的有机溶剂的处理作为对照。3.3.4药剂处理
组织培养板每个孔内接1头试虫，置于正常条件下培养。接虫2h～4h后，待试虫取食完含药叶碟后，在培养板孔内加人清洁饲料继续饲养至调查，淘汰未食完一张完整叶碟的试虫。4调查
处理后24h调查试虫死亡情况，记录总虫数和死虫数。根据试验要求和药剂特点，可缩短或延长调查时间。
5数据统计与分析
5.1计算方法
根据调查数据，计算各处理的试虫吞食药量和校正死亡率，计算结果均保留到小数点后两位。试虫吞食药量按式(1)计算：
式中：
Vi=exVx10.
（1）
每克质量昆虫吞食药液量，单位为微克每克（μg/g）：V
处理药液的质量浓度，单位为毫克每升（mg儿)；V2——滴加药液体积，单位为微升（μL)；昆虫质量，单位为克（g）。
校正死亡率按公式（2）、(3)计算，单位为百分率%）：P
PI—死亡率；
K—死亡虫数；
式中：
处理总虫数。
P2——校正死亡率；
处理死广室：
Po—空白对照死亡率。
（3）
若对照死亡率<5%，无需校正；对照死亡率在5%~20%之间，应按公式（3）进行校正：对照死亡率>20%，试验需重做。
5.2统计分析
用统计分析系统（SAS）、数据处理系统（DPS)等软件进行分析，计算各药剂的LCO、LCoO、b值（标准2
误）等值及其95%置信限，评价供试药剂对靶标昆虫的胃毒活性结果
根据统计结果进行分析评价，写出正式试验报告，并列出原始数据。NY/T1154.2—2006
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