【国家标准(GB)】 粮油检验 酶改性磷脂中1-和2-溶血磷脂酰胆碱的测定 高效液相色谱法

TCS 67.040
山华人民共和国国家标准
GB/T22506—2008
粮油检验
酶改性磷脂中 1-和
2-溶血磷脂酰胆碱的测定
高效液相色谱法
Inspection of grain and oils-Determination of 1- and 2- acyllysophosphatidylcholine in enzymatically modified phospholipids-High performance liquid chromatography2008-11-04发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2009-01-20实施
本标准的附录A为资料性附录。
本标准由国家粮食局提出。
本标准由全国粮油标准化技术委员会归口。本标准起草单位：江南大学
本标准主要起草人；王兴国，金青哲、单良、刘无法、宋志华、潘秋琴。GB/T22506—2008
1范围
粮油检验酶改性磷脂中-和
2-溶血磷脂酰胆碱的测定
高效液相色谱法
GB/T22506—2008
本标准规定了用高效液相色谱法测定酶改性磷脂中 1-溶血磷脂酰阻碱([-arly lysophosphatidylcholinr;l-LPC)和 2-溶血避脂疏胆碱(2-acly lysophasphatidyleholine;2-LPC)的原理，试剂、仪器设备、样品备、操作步骤、结果表示及精密度和准确度。本标准适用以大豆磷脂、蛋黄磷脂,藻籽磷脂为原料制备的溶血磷脂酰胆碱的测定。本标准的检出限为0.1g
2规范性引用文件
下列标准中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款，凡是注口期的引用文件，其随后所有的修改单不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标推达或协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标雅，GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T66822008，ISO3696：1987MOD）3原理
酶改性磷胎产品中的1-和2-溶血磷脂酰胆碱与磷脂酰胆碱(PC)等其他或分用高效液相色谱分离，采用示差折光检测器检测，外标法定量。4试剂
以下所用的试剂,除特殊注明外，均为分析纯试剂；水为符合GB/T6682规定的一级水。4.195%乙醇。
4.2草酸(H,C,0,·2H20)。
4.3草酸液(0.02mal./1.).准确称取1.261g草酸（4.2),加水溶解并稀释至500mL。4.4磷脂标品:磷脂酰胆碱(PC),1-棕榈酰-溶血磷脂酰胆碱(1-LPC),2-棕榈酰-溶血磷脂酰胆碱(2-LPC)。
5仪器设备
5.1高效液相色谱仪：配折光检测器。5.2高速离心机：10000r/min。
5.3纤维膜：0.45μm
5.4超声波清洗仪：180 W。
5.5天平：分度值0.0001g。
1）标准品可使用Sigraa公司的产品。给出 Sigma公司为方便用户使用本标准，并无其他商业行为，其他凡是能够达到要求的标准品，均可以选择使用。1
GB/T 22506—2008
6样品准备
称取50 mg~-100 mg酶改性磷脂样品(m）,用 95%乙醇溶解稀释至25 mL，用离速离心机(5.2)离心，取上清液用0.45μm纤维膜（5.3)过滤，现配现用。7操作步骤Www.bzxZ.net
7.1色谱条件
色谱柱：氮基柱,250 mm×4.6 mml,粒径5μI.或分离效果相当的色谱柱。流动相：95%乙醇（1.1)：草酸率液（1.3）=2：8（体积比）,通过0.151m纤维膜（5.3)，并经过超声波(5.4)脱处理
流速;1 mL/min。
柱温：25℃.
进样脉：10μL。
7.2标准曲线
分别精确称取适量预先经五氧化二磷于爆两天的磷脂酰肥碱、1 溶血磷脂酰肝碱、2 溶血磷脂酰胆碱标准品（4.4),用95乙醇(4.1)溶解、稀释，配置一系列浓度的标准溶液，标准溶液中各磷脂组分的浓度在 0.05 mmnL/l.~2.0 mmoL/1.范围内，现配现用。用微量进样器准确注人10l现配的各浓度标准溶液于高效液相色谱仪（5.1.)中，记录峰面积，以峰面积对进样量绘制标准曲线，标准品的色谱图参见附录A。
社：配制好的标准游液应在 12 h内完成测定。7.3色谱测定
用微量进样器雅确注人10现配的样品滋（6）子高效滋相色谱仪（5.1)中，按照（7.1）靓的色谱条件进行色谱分析，记录峰面积。样品液中待测组分浓度较高时应进行适当稀释.保证其响应值均在仪器检测的线性范用内。根据保留时间定性，外标法定量，得到样品中1-溶血磷脂酰胆碱和2-溶血磷脂酰肛碱的摩尔浓度（c)。
注：配制好的样品滋应在12h内完成诞定，8结果表示
样品中 1-或2-溶血磷脂酰胆碱的含量按式(1)计算：P= cxm.×Vx0.1
武中：
P--样品中 1-或2溶血磷脂酰胆碱的含量,以质量分数计,%:由外标法测得的样品中1-和I2-溶血磷脂酰胆碱的浓度，单位为毫摩尔每升（mmol/L)；M一1-或2-溶血磷脂酰胆碱摩尔质量的半均值,单位为克每摩尔(g/ml)；V.—样品最终定容体积，单位为毫升（mL)；m-样品质量，单位为毫克(mg）。9精密度和准确度
测定值的相对标推偏差小于5光。不同度水平条件下,方法的回收率为96.7%～103.5%2
附录A
(资料性附录)
磷脂酰胆碱(PC)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)标准品色谱图0.035
—0.005+
时间/min
GB/T22506—2008
图A.1磷脂酰胆碱(PC)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)标准品色谱图GB/T 22506-2008
中华人民共程国
国家标准
粮油检验酶改性磷脂中 1 和
2-溶血磷脂酰胆碱的测定
高效液相色谱法
GB/T 275062008
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开本 880×12301/16印张 0.5
享数7千字
2009年1月第一次印刷
2009年1月第一版
定价10.00元
转号：155066：1-35575
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