【国家标准(GB)】 表面活性剂生物降解度试验方法

ICS 71. 100. 40
中华人民共和国国家标准
GB/T15818—2006
代替GB/T15818-1995
表面活性剂生物降解度试验方法Test method for biodegradahility of surfactants2006-08-21发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2007-01-01实施
GB/T15818-2006
本标准是对GB/T15818—1995《阴离了和非离子表面活性剂尘物降解度试验方法》的修订，本标准与GB/T15818-1995相比主要变化如下：修订了标谁名称；
-增了术语与定义；
惨订了生物降解度计算公式：
修订了原标推附录3。1非离子表面括性剂的测定方法增加了阳离子和两性离子表面活性剂的测定方法；一增加了烷基多昔类表面活性剂的测定方法！修订了原标准附录B,2 的泡沫体积法；增加了DT-90试验：
修正了山梨醇脂肪酸酯的归属。本标准的附录 A,附录 B、附录 C,附录 D和附录 E均为规范性附录。木标准由中国轻工业联合会提出。本标谁由全国表面活性剂利洗涤用品标准化技术委员会归口。本标准起草单位：中国日用化学上业研究院、国家洗涤用品顶量监督检验中心（太原)：本标准主要起草人：赵郁梅、案勇。本怀准手1995年12月 8日首发布，本次为第-次修订。本标准自实随之日起，代替GH/T158181995：1
GB/T15818—2006
GB/T15818--199阴离子和非离了表面活性剂生物降解度试验方法是等效采用几本工业标准JISK363-[9904合成洗涤剂牛物降解度试验方法制定的。10年来精细化1行业得到了长足的发展·出现多种新型的阴离子型、非离子型表面活性剂：凡两性离子阳离了型表面活性剂的生产和使用量也逐年扩大，为保证此类产品与环境的相容性，特征原标推基础上增加有关检测产品内容和检测方法要求，修订完成本标准。
1范围
表面活性剂生物降解度试验方法本标准舰是了老面活性剂初级生物降解的迅验法GB/T 15818—2006
本标麗适用于测定具有酸基和硫酸辈的阴离子表而活性剂；聚氧乙烯基团单链EO抑合数为3~40和二，三、四链总EO加合数6～60的表面活性剂；烷基糖开类表面活性剂；阳离子与两恤离子表面活性剂和具较丰富泡沫的：表面活性剂的牛物降解度。本标谁亦适用于洗涤剂中上述表面活性剂生物降解度的测定
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标唯时引用而成为本标准的条款，凡是注日期的引用文件，其随后所有的修收单【不包括助误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励报据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文竹的最新版本，凡是不让日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。G/T5173表面活性剂和洗涤剂阴离子活性物的测定直接两相滴定法（eqISO2271：1989)
GB/T5174表而活性剂洗涤剂阳离子活性物含量的测定（VIS）2871.1188、S02871,21990)
GB/T5327表面活性剂名称术讲（idtJSO862：1984）G:75328表断薪性剂筛化分类(idt1SO 2123:1972)GB/15560非离子表面活作剂聚乙二醇含最和非离子活性物（加成物）含量的测定Weilbull法(id1 ISO 2268: 1972)
GB/T13173.1洗涤剂样品分群法(egVISO 607:1980）GB,/T 13173. 2选激剂中总活性:物含量的测定GB/T13173.3洗染剂中非离了表而活性剂含量的测定（离子交换法）（c9J1SK3362:1998）GI3/ 19464烷基糖甘
两表面活性剂脂肪烷基二甲基甜菜碱QB/T2344
术语与定义
下列术语和定义适用于本标准：生物降解biodegradabilily
有机物在生命有机休的复杂活动下发生的分子降解。3.2
初级生物降解printaryhiadegradability原始母体分子特性在定程度上的消失。3.3
消失时间DT-90disappear time
表面活性剂生物降解度达到初始浓度的90%时所消耗的时间。4方法概要
以表面活性剂试样经培养别化的活性污泥做降解牛物源，加人试验份中避行振荡培养，测定培养后1Www.bzxZ.net
GB/T15818—2006
期中表面活性剂的减少量，得到试样的DT-90和规定时间的生物降解度。5仪器和设备
普通实验室仪器和以下器血，设备：5.1振荡培养瓶
容量1000mL，用棉塞塞紧，于烘箱中在170℃灭1h～2h。5.2振荡培养机
振幅24mm~51mm，振荡频率200次/min~250次/min的回转式振荡机，或振幅50mm~100mm振满频率100次/min~130次/mi的往复式振荡机。5.3压力蒸汽灭菌器
额定温度 126,额定压力 0. 14 MPa。6 试剂和材料
除非另有说明，在分析中仪使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。氯化铵(GH/T 658);
6.2 磷酸氢二钾(HG/T 3487);
6.3硫酸镁（GB/T671)
6.4氯化钾(GB/T 646)
6.5硫酸亚铁(GB/T664)；
6.6酵母浸膏（生化试剂)，
直链十二烷基苯磺酸钠：含堡95%以上，生物降解度大于99%6.B直链十二醇聚氧乙烯醚(7E0):含量98%以上,生物降解度大于99%；6.9微生物源
活性污泥取自处埋民用废水的污水处理厂，活性泻泥悬浊物的浓度应谢整为 10 000 m/L一20 000 mg/L,采样后在 5 h 内使用。6.10甲醛(GB/T685)。
7：测试程序
7.1试样的制备
7.1.1试样若以洗涤剂或其他混合物形式存在时应按 GB/T 5173、GB/T13173.1,GI/T 13173.2、GB/T13173.3制备表而活作剂试样。7. 1.2试验份参照物(6. 7,6. 8)制成中性1 g/L落液,备用。7.1.3分离后的表面活性剂试样制成中性1B/L溶液，备用。7.2基础营养基溶液的制备
用于试验的培养基溶液组成如下：水
氯化铵
磷酸氨二钾
硫酸镁
氯化钾
硫酸业铁
醉母浸
1000mL
酵母浸高在使用前加人，已加入酵母误膏的营养基溶液存放超过8h，则要进行高压灭菌处理（于2
GB/T 15818-2006
0.11MPa~0.13MPa,122℃~～125℃,灭苗20min),试验中所采用的水应不含抑菌物。7. 3试验溶液的制备
7.3.1在含500ml.基础营养基溶液(7.2)的培养瓶中，加人试验份(7.1)，浓度约30mg/L。7.3.2为了验证试验条件，在另一份500mL基础营养基溶液（7.2)中加入直链于二烷基苯磺酸钠溶被或肖链十二醇聚氧乙烯醚(7E0)浒液(7.1.2)作为对照试验培养瓶，使浓度约30mg/L.7.3.3空白试验液基础营养基溶液（7.2)500mL，不加表面活性剂。7.4活性污泥的接种
在7.3的各培养瓶中，分别加人5m活性污泥悬浊被（6.9)。7.5培养
将培养瓶安装在振菌培养机（5.2)上，于25℃上30℃进行振荡，开始培养72h。7.中删化
量取基础营养基浴液（7.2)500ml.于别化瓶中，加人培养液（7.5)5ml，加人试验溶液（7.1.2)(7.1.3)后，将驯化版安装在振蓄培养机（5.2)上，于25℃二3℃进行振荡，斤始驯化72h。7.7生物降解度试验
鼠取基础营养基溶波（7.2)500)mL于降解瓶中，加人驯化液（7.6)5mL,加人试验裕液（7.1.2）、(7.1.3)后，将降解瓶安装在振荡培养机(5.2)上，于25℃士3℃:进行振荡.振荡30mi1后取样，按录中相应的定量方法测定初始降解液的表面活性剂度。以后根据要求在需要时问内取样测定，遂步得到DT90试验结果。或在满71及满8d时，分别从各降解液瓶中胶样测定整解液中的表面活性剂浓度：测定方法据试样特性分别按附录A、附录B、附录C、附录D、附录E进行.附录中涉及的表面活性剂测定方法可极据工作曲线直接使用，也可按一-无回归方程=α十h:计算使用。如果不及时测定，则按每100m1.阴离子表面活性剂试样溶液中加人1ml.甲醛济液(6.10)以便保存。其他表面活性剂试验溶液不可加甲醛保存，否则会影响结果的推确性。8结果计算
表面活性剂的生物降解度由降解初始质量浓度（mg/l,）或初始泡沫体积（mI.）与降解陪质量浓度(mR/I.)或降解后泡沫体积(mL)之差对降解初始浓度或初始体积的比俏，求出相应时间的表面活性剂降解百分率，按下式计算出生物降解度D,所得结果修约至小数点后一位：Ve-V-×100
D= %_× 100 或 =
戏中：
—3:时后的生物降解度，%：
降解开始时降解中表面活性剂的浓度,mg/I-;降解时间后降解液中表面活性剂的浓度,mg/ L-V-降解开始时降解液中表面活性剂的泡沫体积,mL;V降解时间后降解液中表面活性剂的泡沫体积，mL9试验条件
如果参照物直链十一烷基苯磺酸钠的生物降解度低于97.5%或直链十二醇聚氧乙烯醚（7EO）的生物降解度低于95.0%，以及第7天和第8天的降解度之差天于2.0%时，则试验无效10结果报告
根据要求，DT-90的结果以降解度达到90%所消耗的时间报出：利（或）最终降解结果以第7天的降解度(%)报出。
GB/T 15818—2006
A，1方法概要
附录A
（规范性附录）
阴离子表面活性剂的测定——亚甲基蓝法阴离子表面活性剂与亚中基蓝形成的络合物用三氧氯甲烷萃取然后用分光光度法测定阴离子表面活性剂含量。
A.2应用范围
本方法适用丁含磺酸基和硫酸基的阴离子表而活性剂。A.3试剂
A.3.1阴离子表面活性剂
按GH/T5173测定纯度。
表面活性剂标准溶液：称取相当于100%的参照物（6.7)1g（准确至0.001），用水率解，转移并定容至1000mL，混勾。此溶液阴离子表面活性剂质量浓度为1g/1.移取此溶液10.0mL，于1000mL容量瓶中，加水定容,混勾，则该使用溶液阴离子表面活性剂质量浓度为0.01 mF/mL。A,3.2硫酸(GR/T 625)
A.3.3磷酸二氢钠（GB/T1267）
磷酸二氢钠洗涤液：将磷酸二氢钠50g溶于水中，加人硫酸（A.3.2)6.81nL，定容至1000mL。4. 3. 4亚甲基蓝
亚甲基蓝落液:称取亚甲基蓝 0, 1 %:用水溶解并稀释至 100 mL,移取此溶液 30 mL,用磷酸二氢钠洗涤液(A.3.3)稀释至1000mL.
A, 3. 5-氯甲统(GI3/T 682) :
普通实验室仪器和分光光度计，波长360nm-~800nm。A,5工作曲线的绘制
准确移取质量浓度为0.01mg/mL附离子表面活性剂使用溶液（A.3.1)0mL（作为空白参比液）、3. 0 mL,6. 0 mL,9. 0 mL12. 0 L,15, 0 mI:别于 250 mL 分被漏斗中,加水使总体积达 100 m1.加人亚甲基蓝溶液（A.3.4)25mT.,混匀后加人氯甲烷(A.3.5)15mT.，报荡0s，静置分层：若水层巾中蓝色褪去，应补加亚甲基蓝溶液10 inl.,再振荡30 s,静胃10 min将三熟中烷层放人另一250mL分液漏斗中（划勿游界面絮状物随三氣甲烷带出），重复萃敢至三氟甲烧层无色：
合并的=氣甲烷萃取没中加人磷酸二氢钠溶液(A. 3. 3)50 ml. ,振菌 30 s.静置 10 min,将三氯甲烷层通过净的脱脂棉过滤到 IUU mT.容量瓶中,加入王氯甲烷 mL到分液漏斗中,重复萃取至三氯甲烷层无色，所有的三甲烧层均经脱脂棉过滤到100 mL容量中，以必许三氯甲烷淋洗脱脂棉，是容，混到
用分光光计于被长650mm，101mm比色池，以空户攀比液做比，侧试薇的净吸光值。以表而活性剂质量（rg>为横坐标，净吸光值为纵坐标，绘制工作曲线或以·元回归方程y一α十6t计算。1
A.6降解试液中表面活性剂含量的测定GB/T15818—2006
准确移取适鼠体积（降初始取样量2mL~5mL，降解过程取样量可适当增加至50mL)的降解液（7.7于250mL分液漏斗中，加水至100mL.以下步骤按A.5\加人亚中基蓝溶液25mL定穿，混勾”程序进行。
以同样程序测定空白试验液（7,3.3）用分光光度计手波长 650 nm,10 mm 比色池,以空白试验液做参比,测定试液的净吸光值,由净吸光值与工作曲线或 =b计算得到表面活性剂质最涨度，以μg/mL表示.A.
结果计算
阴商子表面活性剂的质量浓度按(A,1)计算92
式中：
一阴离子表面活性剂的质量浓度，产g/mL，n2:
一从工作曲线或计算得到的试液中阴离子表面活性剂含量ug取样体积，mL。
.....( A.1?
GB/T15818—2006
B.1方法概要
附录B
【规范性附录》
乙氧基型表面活性剂的测定—硫氯酸钻法乙氧基型表面活性剂与硫鼠酸钻所形成的络合物用三氯甲烷萃取，然后用分光光度法测定表面活性剂含量。
B.2应用范围
本方法适用」聚氧乙烯型单链EO加合数3～40，双链、一链、四链总E加合数6～~60的表面活性剂以及聚乙二醇<摩尔质量300g/mol~1000g/t1ol)、聚髓等表面活性剂。B.3试剂
B,3.1表面活性剂
按GB/T13173.3测定纯度。
表面活性剂标准熔液：称取相当」100%的参照物<6.8)1（推确至0.0018），用水溶解，转移并定容至1000ml.,混勾。此溶液表面活剂质量浓度为1g/L。移取此液25.0mL于250mL穿量瓶中，加水定容，混勾,则该使用溶液表面活性剂质量浓度为0.1m/L。B.3.2硫氟酸铵(GB/T 660)
B.3.3硝酸钻（六水合物)(GB/T15898)B.3. 4苯(GB/T 690)
B.3.5硫氰酸钻铵溶液
将 620 β统鼠酸铵(B. 3. 2)和 280 B硝酸钻(B. 3. 3)溶于少量水中,混合均勾后定容至 1 000) mL,然后分别用30mI.苯萃取两次后备用。B.3.6氯化钠(GB/T 1266)
B.3.7三氯甲烷(GB/T 682)
B,4仪器
普通实验室仪器；
紫外分北光度计，波长200nm--800nn。B. 5工作曲线的绘制
推确移取质量浓度为 0.1 rg/mL.表面活性剂使用溶波(B.3. 1)0 mL(作为空白参比液）.5,0 mL、10.0mL.20.0ml.25.0mI.,30.0ml.,35ml,分别于250mL分液漏斗中,加水使总体积达100mL，加人硫氰酸钴铵溶液(B.3.5)15 mI.销混匀加入35,5多氯化钠（B.3.6）.充分振萄 1 min,静置15min后加人三熟甲烷(B. 3. 7)15 ml,再振荡 1 nin.静置 15 min后将三氯甲烷层放人50 mI容量瓶中(切勿将界面藜状物随三甲烷层带山），再重复萃圾两次，用一氯甲烷定容，混勾。用紫外分光光度计于波长319nrm.10mm比色池，以窄白参比液做参比，测定试液的净吸光值。以表面活性剂质量（g)为横坐标，净吸光值为纵坐标，绘制工作曲线或以一元归方程一4十计算。B.6降解试液中表面活性剂含量的测定确移取降解试液(7.7)50.0 mL于250-rL分液漏-斗中,加水 50mL<降解近终点时降解试被移5
GB/T15818-—2006
取量应增加至100mL，不再补划水），以下步骤按B.5\加人硫氰酸钴铵溶液15mL..用三氟甲烷定容，混句”程序进行。
以同样程序测定空白试验液(7.3.3)。用紫外分光光度计于波长319m，10mm比色池，以空白试验液做参比，测定试液的净吸光值。由净吸光值与T.作曲线或y=a+52计算得到表面活性剂质量浓度，以rg/mL表示。B,7结果计算
乙氧基型表面活性剂的质量浓度按式(B.1)计算：p=V
p—乙氧基型表面活性剂质量浓度：1g/mL；m一从:L作曲线或计算得到的试液中乙氧基型表面活性剂含量：：一敢样体积，mI.
注：阴商子表面活性剂、阳离于表面活性剂、两性表面活性剂及聚乙二醇的存在，会影响分析结果的准确性，应预分离除去。聚乙二醇的分离见GB/工5560其他表而活性剂的分离见GB/T13173.3
GB/T 15818—2006
C,1总则
附录C
【规范性附录】
阳离子和两性离子表面活性剂的测定金橙-2法PH=1缓冲体系适用于两性离子表而活性剂、阳离子表面活性剂及二者混和物：pH=5缓冲体系适用于阳离子表面活性剂。当试样为阳离子和两性离子表面活性剂混合物时，在pH=5时得到阳离子表面活性剂的吸光值.在pH-1时得到阳离子和两性离子表而活性剂的.总吸光值，二者之差即为两性离子表面活性剂吸光值。
C.2阳离子表面活性剂的测定
C. 2. 1方法概要
附离子表面活性剂与金橙-2在pH=5的缓冲条件下形成的络合物用二氯甲烷苯取，然后用分光光度法测定离子表而活性剂含量。C.2.2应用范围
本方法适用于阳离子表而活性剂，C.2.3试剂
C.2.3.1十六烷基三甲基漠化铵溶液按GH/T 5174定纯度。
表而活性剂标准游液：称敢相当于[00%的下六烷基一甲基溴化饺1. 0 g(准确至0.001 g),用水溶解,转移并定容至 1 U00 mL,混匀,此溶被表而活性剂质量浓度为 1 g/L。移取此溶被 10. 0 ml. 丁1000mL容量瓶巾，加水定容，混匀，则该使用溶液表面活性剂质量浓度为0.01mg/mL。C.2. 3.2企橙-2 榕液
称取 0. 1 B金橙-2溶于 10U mL水中，混匀。C,2.3.3Z酸(GB/T 676)
0.2mo1/1.乙酸溶液。
C.2.3. 4无水乙酸钠(GB/T 694)0. 2 mol/L乙酸钠溶,
C.2.3.5缓冲溶液,pH=5
量取0.2mol/L乙酸浒液59mL0.2mol/L乙酸钠溶液141mL混匀备用。C. 2. 3. 6二氯甲烷(GB/T 682)C.2.4仪器
普薄实验室仪器；
分光光度计，波长360tm~-800nm。C.2.5工作曲线的绘制
准确移取浓度为 D. 0l mg/tnL表而活性剂使用溶液(C. 2.3,17)0 mL(作为牢白参比液),5. 0 InL1, 0 mL,15. 0 mL,20. 0 ml.,25. 0 mL,30, 0 mL,35. 0 mL分别于 250 mL 分液漏斗中.加水使体积达100mL，加人pH=5缓冲溶液（C.2.3.5）10ml，企橙-2溶液（C.2.3.2)3mL，滤勾后加人三氯中烷10 ml,振荡 30 s,静置 10 min后放人 50 mL容量瓶中(均勿将絮状物随三氯甲烷带山),重复萃取，自至兰氯甲烷无色,用三氯甲烷定容，混匀。用分光光度计于波长485mm，l0 mm比色池，以空白参比羧做参比，测定试液的净吸光值，以表面8
(GB/T 15818—2006
活性剂质量（g）为横坐标.净吸光值为纵坐标，绘制作曲线或以·-元回归方程y-《十让算。C,2.6降解试液中表面活性剂含量的测定谁确移降解液（7.7)10ml.于250rmL分液漏斗中，以下步骤按C.2.5\加水至1001mL用三氯中烷定容，泥勾程序进行：
以同样程序测定空白试验（7.3.3)。用分光光度计于波长485nn、10)tmm比色池.以空白试验液做参比，测定试液的净吸光值。由净吸光值与工作曲线或y=αc计算得到表面活性剂液度，以/ml.表示。C. 2.7结果计算
阳离于表面活性剂的质量浓度按式(C.1)计算：C.1)
阳离子表面活作剂质量浓度.g/ml.；m—·从上作曲线或计笋得到的战液中阳离子表面活性剂含量，.
一取样体积,ml.
南性离子表面活性剂的测定
方法概要
两性离子表面活性剂与金橙-2在pH=1的缓冲条件下形成的络合物用三氧氯中烷萃取，然后用分光光度法测定两性离子表面活性剂含量：C. 3. 2 应用范围
本方法适用于两性离子表面性剂，也适用于阳离了表面证性剂及二者的混合物，C, 3.3试剂
C.3.31脂肪烷鼎二甲基甜束碱溶液按Q3/T2341测定纯度。
表面活性剂标推榕液：准确称取相当于 100不的脂防烷基二甲基甜菜碱1.0 g(准确至(1.001 ),用水溶解.转移并定容至1U00mL，泥勾。此溶液表面活性剂质鼠浓度为1g/L。移取此溶液10.0tmL于1000ml.容量瓶中，加水定容，混匀，则该使用落液表而活性剂质量浓度为0.01ug/ml.。C.3.3.2金搭-2溶液
配制同 C. 2. 3. 2 :
C. 3. 3, 3缺(GB/T 63)
0.2 oi/L盐酸济液
C. 事. 3. 4 氯化钾(GB/I 646)0.2mol/L氧化钾溶液
C. 3.5缓汕溶液,PH-1
量取0.2nlol/L盐酸溶液(C.3.3.3)97mI.,0.2mol/L氯化钾落液(C.3.3.4)531L，加水50mL摇匀备用。
C.3.3.6氯甲烷(GB/T 682)
C.3.4仪器
同C.2.4，
C.3.5工作曲线的绘制
参照C2.5进行
C.3.6降解试液中表面活性剂含量的测定参照C.2.进行。
C. 3. 7 结果计算
表面活性剂的质量浓度参照C,2.7计算。
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。