【国家标准(GB)】 牙鲆

ICS 67. 120. 30
中华人民共和国国家标准
GB/T21441—2008
Olive Tounder
2008-02-15发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2008-05-01实施
本标准的附录A为规范性附录。
本标雄由中华人民共和国农业部提出。本标雅出全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会归口。本标准超草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所、中国海大学。本标准主要起草人：子东祥、陈四清、张岩、孔晓瑜、喻子牛、柳学周、雷骅霖。GB/T 21441-2008
1范围
GB/T21441—2008
本标给出了牙鲆(Paralichthys alivaceus Temminck &Schlegcl)的主要形态构造特征，生长与繁殖特征、细胞遗传学和生化遗传学特性以及检测方法。本标准适用于牙鲆种质的监测和鉴定。2名称与分类
2.1学名
牙鲜ParalichthysotizuceusTemminck&Schlegel2.2分类位置
蝶形目(Pleuroncctiformes)，牙鲆科(Paralichthyidae);牙鲆启（Paralichthys)。3形态特征
3.1形态
身体呈长圆形，扁平，双位于头部左侧：有眼侧披小栉鳞，呈褐色，黄褐色或灰黄色，道常县三个暗黑色班点，无眼侧披阅鳞，呈白色。左右侧线同样发达，无题上枝。尾柄长瓶高。有眼侧的两个穿孔约位下眼间隔正中的前方，前孔后缘有一获长辨片；尤眼侧两个鼻孔接近头部背缘，前帛孔办有一狭长瓣片。口人，前位，下颌稍突出；口裂斜，左右对称。肯鳍约始于上眼前缘，左右腹鳍略对称，路鳍后缘呈双截形；奇鳞均有暗色斑纹，胸有暗点或横条纹：牙尖锐，呈锥状，下各-行，均同样发达前部牙齿较大，呈犬齿状，
牙鲆的外形见图1.
3.2可数性状
3.2.1背鳍鳍式：D.63~81
3.2.2腹鳞鳍式：V.6。
3.2.3臀鳍鳍式：A.48~~65。
3.2.4侧线鳞数：108~-130
图 1 牙鲆外形
3.3可量性状
3.3.1体长为体高的2.3倍～2.7倍，为头长的3.4倍～8:9倍。GB/T 21441—2008
3.3.2上颌骨长等于或大于头长的1/2。4生长与繁殖
4.1生长
在自然海区不同年龄组牙鲆的全长和体重情况见表1。表1不同年龄组牙鲆全长和体重的实测值年龄/龄
全长/mm
体熏/区
4.2.1性成熟年龄
230-320
146--393
在自然海区雌性牙
4.2.2生物学最小型
牙鲆生物学最小型雌
4.2.3卵于特征
卵径 c. 9 mrm
4.2.4 产卵量
300~-459z
1505892h
520-·680
1553~2 811 11 687 773
龄为 3龄,蜓性为2龄。
nm，呈浮
牙绑为多次型。
产卵量高者叫达
5细胞造传学特征
5.1染色体数
一尾信
粒～3. 63
体细胞染色懂
5.2核型
核型公式：48
染色体组型见图
6生化遗传学特征
6.1同工酶的谱型
620--730
2860-5063
640860
3 145--7 633
0°粒～45置101，一个产卵期的生
nnnnuann
R0#sAga
nP AA n作
图2染色体组型
牙鲜肌肉中苹果酸脱氢酶（MI)H)同工酶、6-麟酸葡萄糖构酶（GPI)同工酶、磷酸葡萄糖变位酶2
(PGM)同工酶电泳图谱见图3
6.2群体变异
牙鲜群休氣
密点比例为
(H）为 0.09有）
14；平均有
检测方法
7.1染色体检
7.1. 1 标本的制备
采用体内
16 h~36 h后再
按带规气干达制备
（甲醇：冰乙酸一3
体标本;空气下煤，
7.1.2核型分析
物血凝集
射秘水行
藝玻片样
，镜检
赛80个以上中期赛
7.1.3核型分析Www.bzxZ.net
.25682
MDH电泳图满（单态）
GPI电泳图谱（多
糖就数以确定一倍体染色体数
GB/T 21441--2008
0.086士018平均薪合度期望值
0μg/g鱼重剃量体腔注射PHA;
μg/g鱼体重/4 h~5 h后,取头肾无处理（10
min30min）；固定液
电悬液蠡片（冻或热滴片)制成染色从中选取10个分散良好，形态精晰的中期分裂相进行显微摄影，并放大，测最，按如下规定对染色体分类：臂比1.0~1.7为中部着丝粒染色体组g.0亚中部着丝粒染色体9m组，3.0~7.0为亚端部着丝粒染色体αt组，7一o为端部着丝粒染色体1组。统计处理测量数据，分析染色体特征。7.2生化遗传分析
7.2.1样品制备
活休解剖取肝脏和肌肉，密封放入超低温泳箱（一76℃）或液氮髓中贮存。将部分纽组（约0.5g)取放入玻璃匀浆器中，以质量分数50%加入0.1mol/L磷酸缓液（pH7.0)，冰水浴中勾浆后，例入1.5mL离心管内，4℃冰箱中抽提0.5h～1h，然后在0℃~～4℃冷冻离心机中以11000r/min离心20 min，离心后的上清液作为电泳样品。7.2.2电泳分析
深用水平淀粉凝胶电泳方法，凝胶浓度为12%，电泳缓冲系统为三中基氨基中烷（Tris)-柠檬酸3
GB/T 21441—20Q8
缓冲液pH7.0恒流（电流大小为12mA）电泳12h。电泳过程在4C冰箱中进行：胶厚度为6mm，电泳后切成4片～5片，分别进行各种酶的染色，染色过程在37℃C恒温箱中进行，各种同工酶染色液的配制见附录 A。
7.2, 3结果计算
多念位点比例（P），平均杂合度观察值（H.)、平均杂合度期望值（H)、平均有效等位基因数（N.)分别按式(1),式(2)、式(8)式(1)计算;P-Ni/NX100%
式中：
P——多态位点比例；
N.多态位点数：
N.所测位点总数。
式中：
H。——平均杂台度观察值；
Ha\\\多态位点架合度观察值；一观察位点总和。
式中：
I。平均杂合度期望值；
H.多态位点杂合度期望值
观察位点总和。
N.平均有效等位基内数
观察位点总和
8判定规则
检测结果不欲合第3章、第5章中任一章要求的，则判定为不合格项；有不合格项的样品为不合格样品。
附录人
（规范性附录）
同工酶染色液的配方
A.1磷酸葡萄糖变位酶(PGM)染色液的配方Tris(三羟甲基氨基甲烷)-HCl
0.2 mol/L, pH 8, 0
辅酶T（NADP）0.25%
MgClz1.0mol/L
6-磷酸葡萄糖脱氢酶(NAD)
1-磷酸葡萄糖
噻噬蓝(MTT)
崂嗪甲硫酸(PMS)0.5%
6-磷酸葡萄糖异构酶(GPD染色液的配方Tris-HCl
0.2 mal/L, pH 8. 0
1. 0 mal/L
6-磷酸果糖
A.3苹果酸脱氢酶（MDI)染色液的配方0.2 mol/L, PH 8. 0
Tris-HCl
0. 5 mol/L
华果酸<用1.0 ml/L NaOH调 pH至 7.0)M 0.5%
GB/T 21441--2008
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