【地方标准】锦鲤疱疹病毒病诊断技术规范

本网站发布时间： 2026-04-08 23:18:29

DB11/T819-2011
现行
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基本信息

标准号：
DB11/T 819-2011
标准名称：
锦鲤疱疹病毒病诊断技术规范
标准类别：
北京市地方标准(DB11)
标准状态：
现行
发布日期：
2011-08-09
实施日期：
2011-12-01
出版语种：
简体中文
下载格式：
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下载大小：
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标准分类号

标准ICS号：
11.220
中标分类号：
B41

关联标准

出版信息

其他信息

归口单位：
北京市农业局

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标准简介：

DB11/T819-2011标准提供锦鲤疱疹病毒病（KHMD）的诊断技术规范，包括样品要求、临床症状、流行病学特征、PCR检测方法及结果判定。适用于锦鲤和鲤的病毒病诊断，涵盖水温、采样品种、样品状态和信息采集等要求。

标准内容

部分标准内容：

DB11/T819-2011 锦鲤疱疹病毒病诊断技术规范

前言
本标准按照B/T1.1—2009的规则起草，由北京市农业局提出，由北京市农业标准化技术委员会归口组织实施，起草单位为北京市水产技术推广站。主要起草人包括王姝、徐立蒲、张振国、王静波、曹欢、贾丽、殷守仁。

1 范围
本标准规定了锦鲤疱疹病毒病（KHMD）的样品要求、临床症状及流行病学特征、PCR检测方法和结果判定标准，适用于锦鲤疱疹病毒病的诊断。

2 规范性引用文件
- GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法
- SGT7103 水生动物产地检疫采样技术规范

3 缩略语
- KHV：锦鲤疱疹病毒（Koi herpesvirus）
- KHMD：锦鲤疱疹病毒病（Koi herpesvirus disease）
- PCR：聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）
- DNA：脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleic acid）
- Taq酶：Taq DNA聚合酶（Taq DNA polymerase）
- dNTP：脱氧核糖核苷三磷酸（Deoxyribonucleoside triphosphate）

4 样品要求
4.1 水温：采集样品时水温应在16℃～32℃。
4.2 品种：采样品种为锦鲤或鲤。
4.3 数量：按SGT7103规范执行。
4.4 状态：采集的样品不得腐败。
4.5 信息采集：需记录发病情况、混养鱼类发病情况、水温等信息。

5 锦鲤疱疹病毒病临床症状及流行病学特征
5.1 临床症状：患KHMD的锦鲤和鲤主要表现为烂鳃、鳃出血并产生黏液、鳃丝溃烂、体表苍白块斑和水泡、鳍条及尾鳍充血、鳞片上出现血丝、眼球凹陷、口腔和腹部充血及出血。
5.2 流行病学特征：混养池塘中仅锦鲤或鲤发病死亡，其它鱼种不受影响；水温18℃～30℃，尤其25℃～28℃时死亡率高；从出现临床症状到死亡通常24～48小时；疾病发生后10天内死亡率可达80%～100%。

6 PCR检测方法
6.1 试剂和材料
6.1.1 水：符合GB/T6682-2008中一级水规格。
6.1.2 KHV阳性核酸片段：由农业部指定机构提供。
6.1.3 Taq酶：20℃保存，避免反复冻融和剧烈温度变化。
6.1.4 dNTP：10 mmol/L。
6.1.5 氯化镁溶液浓度：25 mmol/L。
6.1.6 TK基因引物（409 bp）：KHV-TK-F: 5'-CCGTTACCT-GTACGAG-3'; KHV-TK-R: 5'-CACAGTAGAT-TAT-CC-3'
6.1.7 Sph基因引物（292 bp）：KHV-Sph-F: 5'-GACACCACATCT-GCAAGGAG-3'; KHV-Sph-R: 5'-GACACATGTTACAAT-GCT-CGC-3'
6.1.8 DEPC水：用焦碳酸二乙酯处理。

6.2 器材和设备
6.2.1 普通冰箱和超低温冰箱
6.2.2 组织研磨器

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