【地方标准】 辣椒品种抗辣椒脉斑驳病毒鉴定技术规程

本标准（DB44/T2207—2019）规定了辣椒品种抗辣椒脉斑驳病毒（Chilli veinal mottle virus，ChiVMV）的鉴定技术，涉及术语与定义、毒原准备、室内抗性鉴定、病情调查、抗性评价以及鉴定报告撰写等内容，适用于辣椒（Capsicum annuum L.）品种及材料对辣椒脉斑驳病毒的抗性室内鉴定及评价。 本标准按照GB/T 1.1-2009的规则起草，附录A为规范性附录，附录B、C、D为资料性附录。标准的起草单位为广东省农业科学院植物保护研究所、湖南省植物保护研究所。主要起草人有何自福、汤亚飞、余小漫、刘勇、蓝国兵、邓铭光、于琳、李正刚。 1. 范围 本标准规定了辣椒品种抗辣椒脉斑驳病毒鉴定技术的相关要求，适用于辣椒对该病毒的抗性室内鉴定及评价。 2. 术语与定义 2.1 辣椒脉斑驳病毒（ChiVMV）：属于马铃薯Y病毒科（Potyviridae），马铃薯Y病毒属（Potyvirus），主要通过蚜虫传播，病株汁液和机械接触也能传播，但不能通过种子传播。辣椒感染后，表现为叶脉暗绿条纹，叶缘皱缩，叶片畸形及变小，早期感染会抑制植株生长，主茎和分枝上呈现暗绿条纹，最终导致落花、落果和果实畸形。 2.2 毒原（Virus Source）：ChiVMV-GD样本来源于广东辣椒主产区，通过检测、纯化、扩繁后保存，用于后续实验。 2.3 人工机械摩擦接种（Artificial Mechanical Inoculation）：通过人工在植物叶面上造成微小伤口，使病毒通过伤口进入细胞引发发病的过程。 3. 毒原准备 从广东辣椒主产区采集表现症状如皱缩、花叶、斑驳的病叶，经分子检测确定含有ChiVMV后，采用人工机械摩擦接种的方法，接种到健康的三生烟叶片上，再通过RT-PCR检测确认病毒存在，最终接种至健康辣椒植株上繁殖。 4. 仪器设备 包括电子天平、恒温培养箱、研钵、超低温冰箱、PCR仪、离心机等实验设备。 5. 室内抗性鉴定 5.1 接种室：室内抗性鉴定应在60目防虫日光温室中进行。 5.2 育苗：辣椒种子用10%磷酸三钠溶液浸泡20分钟，清水冲洗后，放在28°C恒温培养箱内催芽，待露白后，种植在黑色塑料育苗杯中。 5.3 鉴定品种设置：鉴定品种随机设置，每个处理30株，进行4次重复。 5.4 接种：接种病原时，病原悬浮液由病叶匀浆后过滤得到，使用金刚砂摩擦叶片，轻轻将接种悬浮液涂抹在叶片上。 5.5 接种后管理：将供试幼苗置于接种室内，继续培养，保持温度25°C至30°C，进行常规水肥管理。 6. 病情调查 6.1 调查时间：接种后15天进行病情调查。