【地方标准】 实验动物 病毒PCR定性分析

ICS 65.020.30
CCS B44
DB44/T 2336—2021
广东省地方标准
实验动物 病毒PCR定性分析
Laboratory animal Qualitative analysis of virus with polymerase chain reaction method
2021-10-18发布
广东省市场监督管理局 发布
2022-01-18实施

前言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件的某些内容可能涉及专利，发布机构不承担识别专利的责任。本文件由广东省科学技术厅提出并组织实施，由广东省实验动物标准化技术委员会（GD/TC 93）归口。本文件起草单位：广东省实验动物监测所。本文件主要起草人：王静、袁文、闵凡贵、潘金春、黄树武、罗银珠、何丽芳、张钰、黄韧。

1 范围
本文件规定了实验动物病毒的PCR定性分析方法，适用于实验动物相关病毒核酸的定性分析。

2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。凡是注日期的引用文件，仅注日期版本适用本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB 19489 实验室生物安全通用要求
GB/T 19495.2 转基因产品检测实验室技术要求

3 术语和定义
3.1 聚合酶链式反应（PCR）
在体外利用DNA聚合酶进行特异DNA片段扩增的方法。模板DNA经变性成为单链后，引物与互补序列退火结合，在DNA聚合酶作用下延伸，通过重复变性、退火和延伸循环，使目标DNA片段呈指数扩增。

3.2 逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）
以RNA为模板，在逆转录酶作用下合成cDNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增的方法。

3.3 巢式PCR
通过两轮PCR反应及两套引物进行扩增，第二轮引物针对第一轮产物内部序列，从而提高检测的特异性与灵敏性。

3.4 实时荧光PCR（real-time PCR）
在PCR体系中加入荧光探针，通过荧光信号实时监测扩增过程，根据扩增曲线对目标核酸进行定性或定量分析。