【地方标准】 食用菌菌种真实性鉴定 RAMP法

ICS 65.020 B61 备案号：42283-2014 DB22/T2083-2014 《食用菌菌种真实性鉴定 RAMP法》由吉林省质量技术监督局发布，2014-05-04发布，2014-06-01实施。本标准仅供内部使用，不得翻印。 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009和GB/T 20001.4-2001的规则起草。本文件的部分内容可能涉及专利，发布机构不承担专利识别责任。本标准由吉林省农业委员会提出并归口，起草单位为吉林农业大学。主要起草人包括宋慧、刘晓龙、金周雨、汤海峰、宗立立、李雨婷、王健、谭旭华、李艳丽。 1 范围 本标准规定了利用RAMP技术鉴定食用菌菌种真实性的分析步骤、结果记录和分析鉴定的方法。适用于猴头菌（Hericium erinaceus）、小刺猴头菌（Hericium caput-medusae）、珊瑚状猴头菌（Hericium coralloides Pers）、黑木耳（Auricularia auricular）和光帽鳞伞（Pholiota nameko）等食用菌菌种的真实性鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本标准的应用是必不可少。凡注日期的引用文件，仅所注日期版本适用于本标准；凡不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本标准。 - GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 - GB/T 12728 食用菌术语及界定 3 术语和定义 3.1 随机扩增微卫星DNA多态性标记（Random Amplified Microsatellite Polymorphism, RAMP） 是以一条与微卫星序列互补的SSR引物和一条RAPD随机引物组合，对基因组中的微卫星序列与随机引物互补序列之间的DNA片段进行随机扩增的技术。 3.2 菌种真实性（Verification of Spawn） 指供检菌种与对照菌种的符合性，用于判定菌种是否真实。 4 RAMP标记原理 通过RAMP标记扩增基因组中微卫星序列与随机引物互补序列之间的DNA片段，比较试样与对照指纹图谱，从而对菌种进行鉴定。 5 仪器设备及试剂 详细内容见附录A，包括所需仪器、设备及试剂的配制方法和使用说明。