【地方标准】 饲料中盐酸吗啉胍的测定 液相色谱-质谱质谱法

ICS65.120 B46 DB37/T3043-2017 《饲料中盐酸吗啉胍的测定 液相色谱-质谱/质谱法》由山东省质量技术监督局发布，2017-10-25发布，2017-11-25实施。 前言 本标准按照GB/T1.1-2009的规则起草，由山东省质量技术监督局提出并归口，由山东省畜牧业标准化技术委员会组织实施。起草单位包括山东省产品质量检验研究院、山东省食品药品检验研究院。主要起草人包括王骏、周莉莉、杨昊、于文江、尹丽丽、刘桂亮。 1 范围 本标准规定了配合饲料中盐酸吗啉胍的液相色谱-质谱/质谱测定方法，检出限为0.05mg/kg。适用于配合饲料中盐酸吗啉胍的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对本标准的应用必不可少。注日期的引用文件仅适用于所注日期版本，不注日期文件的最新版本（含修改单）适用本标准：GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 原理 试样中的盐酸吗啉胍用乙酸溶液提取，经乙腈稀释后，以亲水性液相色谱柱分离，带电喷雾电离源的串联四极杆质谱测定，采用外标法定量。 4 试剂和材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂，水为GB/T6682规定的一级水。主要试剂包括：乙腈（色谱纯）、正己烷、乙酸铵、乙酸溶液。盐酸吗啉胍标准品纯度不低于98.0%，标准储备液及工作液按规定配制，储存于4℃避光条件下，有效期3个月。微孔滤膜孔径0.22μm。 5 仪器设备 主要设备包括液相色谱-串联质谱仪（配电喷雾离子源和串联四极杆分析器）、分析天平（感量0.1mg、0.01g）、超声波清洗器、离心机（5000r/min）、涡旋混合器。 6 测定步骤 6.1 样品处理 称取2.0±0.05g试样于30mL具塞离心管中，加入10mL乙酸溶液，在涡旋混合器上混匀1分钟，超声提取10分钟，5000r/min离心10分钟。取上清液5mL于30mL离心管中，用5mL正己烷两次提取，弃去正己烷层。准确移取下层清液0.5mL于10mL容量瓶中，加入8mL乙腈混匀，室温放置后定容并摇匀，经微孔滤膜过滤后待测。 6.2 基质空白溶液制备 称取2.0±0.05g阴性试样，按6.1操作制备基质空白溶液。 6.3 系列基质标准溶液制备 准确移取适量标准工作液，用基质空白溶液稀释，制成盐酸吗啉胍浓度分别为0.5ng/mL、1.0ng/mL、5.0ng/mL、10μg/mL、50μg/mL的基质标准溶液。 6.4 仪器参考条件 6.4.1 液相色谱条件 色谱柱：内填亲水性色谱填料，100mm×2.1mm，粒径1.7μm或相当者。流动相：乙腈、10mmol/L乙酸铵溶液。梯度洗脱：0min 95%乙腈，4min线性变化至60%乙腈，保持60%至6min，6.1min 95%乙腈，保持3min。流速0.3mL/min，柱温40℃，进样体积10μL。 6.4.2 质谱条件 参见附录A。 6.5 测定 将基质标准溶液和样品溶液在相同条件下进样测定。若样品溶液在色谱图中盐酸吗啉胍的保留时间与基质标准溶液一致，定性定量离子信噪比均大于3，且定性离子对的相对偏差符合表1规定，则判定样品中检出盐酸吗啉胍。以基质标准溶液定量离子峰面积对浓度绘制标准曲线，采用外标法定量。