【卫生行业标准(WS)】 尿中五氯酚的高效液相色谱测定方法

中华人民共和国卫生行业标准
尿中五氯酚的高效液相色谱
测定方法
Urine Determination at pentachlorophcnol-High performance guid chromatographic method1主题内容与适用范围
本标准规定广限中丘氟酚的高效液机包谱测定力法。本法最低燃测浓没为.3门八本标准用丁接触五氯酚(PCP)的.人求中五氮酚的测定、2原理
尿样加盐酸加热水解后·喊性下用二甲烷萃取，除法郭分干扰物，然后在酸性下用乙醛醚举取尿摔中五录酚，液缩后逆高效液和色谱仪测定，以保留时间用254mm与313nm响应值比值定性，用峰面积定量，
3仪器
3.1高效液相色谱义.紫外检测器，离心机.3 c00 r/mia
全啵璃蒸馏器，2010ml，
消化瓶，带内衬聚四氟乙烯薄膜的塑料螺帽玻璃璇，3们ml.。微量注射器..0u1.
梨彤分液漏斗,2.ml.，
容民瓶.10 ml..
量简.25ml.及50ml..
具塞刻度离心管.5ml.，
聚乙烯塑料瓶.50~100ml.
尿比重计。
4试剂
本标准所用试剂除另有说明者外，均为分析纯试剂。4.1实验用水，经全玻璃蒸溜器重蒸馏的水。4. 2 硫酸,P23=1. 84 g/ml.
4-3盐酸.pn-1.1u g/ml.
4.4磷酸氢二铵。
4. 5 二氯甲烷。
4.6乙醚，优级纯，
中华人民共和国卫生部1996-10-14批准1997-05-01实施
4.7中醇.軍蒸馏的，
WS/T 61 1996
4.8 磷酸氢 铵溶液1/2(NH,),[IP0:1-0, 015 mol/L4.9至氙化钊溶液,mol/.
4.10氢氧化钠溶液.0.：mol/1.
4.11五氯酚钢.优级纯。
4. 12升氯酚标准济滚：准确称取 1C. 0 img的五策酚或 1C.9 nmg 五氟钠下25 m1. 烧杯中.加 0. 5 mL氢氧化铜溶泄71.1价）.待溶解后机水稀释至10ml.。此溶液1ml.柑当十100五氯酚：4.13质控：间标前模拟录接触析混合尿或加标的正常人混合尿作质控样。5采样、运输和保存
聚乙烯塑料瓶或硬质玻璃瓶收集接触卫氯酚或正氯酚钠1人「作固最后个班的班片尿,在低F10（下运输，尽决测定比重后,每100 ml.尿样加2~3滴盐酸-4（下保在,二周内分析完毕，6分析步骤
6. 1 仪器操作条件bzxZ.net
色谱拉：柱长 20 cm.内径 4 nin.不锈钢。柱填料：反相C键合质定相，5um。柱温：室温。
流动栏:甲醇+0.015 r101/L磷酸氢二铵=50+50(V/）流速:1.C mL/min.
检测器波长：254nm。
6. 2 空白试验
政2ml.正常人混合尿与样品司时进行测定6.3样品处理
取2 Inl 尿样于消化瓶中,加0.5 ml浓盐酸·摇匀，加盖.放在沸水浴中加热1h,取出冷至宰温，定量转移至分液漏斗中,用5 mol/L氢氧化钠溶液调至碱性后,用2 mL.二氯中烷苯取出尿中部分干扰物质,再用硫酸调尿液至酸性,用乙醚萃取三次(3 ml.,2 ml.,2 ml.),合并乙醚萃取液下 5 ml. 离心管中,白然蒸发或在氮气流中浓缩乙醚溶液至小f-0. 1 ml.-b甲醇稀释至 2 ml.。6.4标准曲线书绘制
取6个窄量施(3.7).按下表配制标准管。五氯酚标准管的制备
玉能龄标润溶液t4,:2).l
甲醇.ml.
无紫酸依度+/ml
加至1℃ml
由以上 6 个济液中各取 10 L 进HPLC,楼 6. 1条操作条件,重复逆样三次，以冠酚浓度为横坐标,峰面积平均镇为织坐标,绘制标准曲线。6.5样品测定
将各管样品液（6.3）割烈地上下操动，使残渣充分溶解，离心10min，取上清液10ul.进HPl.C.用保留时问定生，峰面积定量。五氯酚色谱图见下图。在测定前后以及每测定10个样品后，测定一次质控样。
7 计算
WS/T 61
绿中五氛酚色谱图
7.1按式(1)计算尿样换算成标推比重（1.020）下的涨度校正系数（）1. 020 -- 1. 000
实测比重-1.000
7.2按式（2)计算尿中五氯酚的浓度。X-CR
一尿中i氯酚的浓度.ng/l.;
式中：X-
由标准曲线查得的五氯酚浓度·Ig/1.8说明
.（2)
8. 1本法的捡测限为 3 ng(3倍噪声）,线性范围为 0～12 nig/L,尿中五氯酚浓度为 0. 6,1. 5,6. 0 mg/L时,变异系数分别为 4. 6%,3. 7※及 1. 5头:尿中五等酚浓度为 1. 0~~3. 0 mg/L 时,加标回收率平均为85%
8.2采集尿样时，「人要脱离生产场所·换下工作服.洗净手、臂及面部,以防五氯酚的污染，采样底应尽早加酸低温保存。
8.3测定尿中工氯酚总含量是有卫生学意义的·必须将结台态的五氯酚充分水解。尿样经酸化后于沸水浴中加热1h·使结合的PP释放出米。而带螺帽的消化瓶进行水解，可减少i氯酚的浑发损失及尿液的飞溅
8.4加酸水解后的尿样基体中有大量极性化合物干扰测定，刮用五氯酚在碱性条牛下济于水.用二氯甲烷萃取出尿液中大部分干扰物质，既改善了五氯酚的峰形，也保护了色谱代，使其不受污染。8.5九系酚是一个弱酸,在碱性溶液中以离子状态存在·测定时它在甲醇-水-磷酸氧一铵体系中比在常用的甲醇-水-乙酸中拘应值大。但每次工作结束后+必须用水冲洗色谱柱,直到冲洗液呈中生，再用甲醇冲洗，以保护色谱柱，延长其使用寿命。8.6五氯酚有一定的挥发性.应在低于 35C时自然蒸发乙醚萃取液,或在 35~40℃水浴中吹氮浓缩,残留的少量乙醛不干扰在氛酚的测定。8.7如有可变波长紫外检测器时.可用五氣酚的最大吸收波长220 nIm)进行检测，从而提高本方法的灵敏度
WS/T 61-—1996
液相色谱柱可使用任何厂牌的反相C:柱.值粒度以5的填料分离效果较好.10um)的填料需8.8
要较长的性了。流动相配比及流速可根据各自的仪器条件进行选择，8.9质挖样用加标的模拟尿或加标的人尿时可考察准确度和精密度.用接触者尿时！能旁察精密度。但人尿不能久存。模拟尿只合人尿大量成分，附加说明
本标准由正生部[生监督司提出。本弥准出中国筑肪医学科学院劳动卫生与职业病研究所负贞起草，本标准主要起草人虞爱如
本标准由工生部委托技术归口单立中国预防医学科学院劳动卫生与职收病研究所负责解释：
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。