【地方标准】 饲料中氨基酸的测定 离子交换色谱法

ICS 65.120 B25 DB12 天津市地方标准 DB12/T946—2020 饲料中氨基酸的测定 离子交换色谱法 Determination of amino acids in feeds - Ion exchange chromatography 2020-06-29发布 2020-08-01实施 天津市市场监督管理委员会 发布 前言 本标准依据GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由天津市农业农村委员会提出并归口。本标准起草单位：天津市畜牧兽医研究所。本标准主要起草人：杨鸿雁、梁世岳、李玉鹏、陈龙宾、范寰、乔家运。 1 范围 本标准规定了饲料中氨基酸的离子交换色谱法测定方法的原理、试剂和材料、仪器设备、样品的采集与制备、测定步骤和结果计算。 本标准适用于饲料原料、配合饲料及浓缩饲料中氨基酸含量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用。 GB/T 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料采样 GB/T 20195 动物饲料试样的制备 3 原理 3.1 常规酸水解法 饲料中的蛋白质在盐酸作用下水解为单一氨基酸，经离子交换色谱法分离，并以茚三酮柱后衍生测定。水解过程中色氨酸全部被破坏无法测定，胱氨酸和蛋氨酸部分氧化。 3.2 氧化酸解法 将含硫氨基酸（胱氨酸和蛋氨酸）用过甲酸氧化为对酸稳定的氧化物，再经酸水解释放，通过离子交换色谱法分离并进行柱后衍生测定。 3.3 碱水解法 饲料蛋白质在碱作用下水解释放色氨酸，经离子交换色谱法分离并进行柱后衍生测定。 4 试剂和材料 本标准所用试剂及水均为分析纯及GB/T 6682规定的一级水，溶液按GB/T 603制备。 盐酸、盐酸溶液（6 mol/L、7.2 mol/L）、茚三酮溶液、pH缓冲液及再生液按说明书配制或购买。 甲酸、过甲酸溶液、氢氧化锂溶液、柠檬酸钠缓冲液、氢溴酸、高纯氮气等按规定配制。 氨基酸混合标准储备液、磺基丙氨酸-蛋氨酸砜标准液及色氨酸标准储备液用于定量分析。 5 仪器设备 样品粉碎机、筛网（0.18 mm）、分析天平（0.1 mg）、恒温鼓风干燥箱、氮吹仪、旋涡混合仪、氨基酸分析仪（配离子交换柱及柱后衍生系统，具570 nm与440 nm检测器）。 6 样品的采集与制备 按GB/T 14699.1采集样品，按GB/T 20195制备样品。样品粉碎至0.18 mm筛孔，通过筛后充分混匀，密封保存备用。 7 测定步骤 （内容未完全提供）