【国家标准(GB)】 水果、蔬菜汁 游离氨基酸含量的测定

中华人民共和国国家标准
水果、蔬菜汁游离氨基酸含量的测定Juice of fruits and vegetablesDetermination of free amino acid主题内容与适用范围
本标准规定了水果、蔬菜汁中游离氨基酸的提取净化及测定方法。2
测定原理
GB/T12292-90
水果、蔬菜汁通过阳离子交换树脂,固定及净化氨基酸。用2mol/L氢氧化铵把氨基酸洗脱后,脱氨浓缩。用氨基酸分析仪测定含量。3仪器设备
3.1氨基酸分析仪或高压液相色谱仪：3.2玻璃柱，高20cm,内径2cm；
3.3捣碎机；
3.4离心机；
3.5天平；
3.6旋转蒸发器。
3.7真空干燥器。
4试剂
全部试剂均为分析纯,配制试剂均用去离子水。4.1阳离子交换树脂，Dowex50W×4型，100～200目或其他适宜的树脂。4.2盐酸溶液6mol/L.0.1mol/L。4.3氢氧化铵溶液2mol/L。
4.4氢氧化钠溶液3.5mol/L。
4.5每种氨基酸标准溶液0.0025M。4.6仪器分析用的各种缓冲液。
4.7仪器分析用的三酮试剂。
5试样选取和制备
5.1液体产品需充分混匀。
5.2固体产品选取有代表性的水果和蔬菜洗净，擦干，剥去或削去果皮，用四分法取样150g左右。
5.3称样称取样品100150g准确至0.01g，置于捣碎器的玻璃缸内，加入等量的水。5.4样品捣碎将盛样品的玻璃缸装在捣碎机上,在1档速度捣碎1min,取出倒入烧杯中。5.5过滤及离心把已捣碎的样液过滤，吸取10mL滤液放入离心管中，在4000r/min的转速下离心15min。
5.6脱果胶对含果胶丰富的样液需用乙醇处理.准确吸取样液5mL，加入34mL96%乙醇过滤，用15mL80%乙醇分三次冲洗滤纸，将滤液在35℃下减压蒸馏。6分析步骤
6.1固定柱的装置将Dowex50W×4树脂装入玻璃圆柱中，离上端空出约10cm,用6mol/L盐酸250mL活化树脂然后用水洗至无氯离子为止（用硝酸银检查，不产生白色沉淀）。调节活塞，使溶液流速为1mL/min。6.2固定及洗脱吸取5mL样液或液体产品，除果胶物的样液则取全部，置玻璃圆柱中再加5mL水，待液体通过树脂后再加2mol/L氢氧化铵50mL,可分3～4次加完，用50mL水洗涤，下载标准就来标准下载网
将加2mol/L氢氧化铵流出的溶液收集在圆底烧瓶内，在减压真空和加热（40～45℃c）条件下蒸发至干，用5mL0.1mol/L盐酸溶解。6.3脱氨吸取待测液1mL,加入3.5mol/L氢氧化钠溶液2~3滴，调至pH10~11,放在真空干燥器中减压蒸干。用1mL水洗涤，再抽真空蒸干。这样重复2次，加入pH2.2缓冲液0.5mL和0.1mol/L盐酸0.5mL,使pH达到2.2,再稀释5~10倍后测定。6.4测定用氨基酸分析仪测定氨基酸含量,测定前需做2~3个氨基酸标样,待仪器稳定后再测试样。
7结果计算
7.1结果表示用mg/kg或mg/L。
7.2计算公式
某个氨基酸含量(mg/kg)=
某个氨基酸含量(mg/L)=
X10**(-3)Xd
-X10**(-3)Xd
式中：NG一从仪器测得的某个氨基酸的质量,Ng:m新鲜样品重，g；
mL一原始取样体积,mL；
d—稀释倍数。
7.3允许差
水果、蔬菜汁游离氨基酸平行测定的结果,相对相差不得大于5%。附加说明：
本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由中国农业科学院分析测试中心负责起草。本标准由上海农科院分析中心参加起草。本标准主要起草人季伟格、顾金炎、陈必芳。本标准参照采用NFV76--1151983《水果蔬菜汁中游离氨基酸的测定》。国家技术监督局1990-03-29批准1990-12-01实施
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