【国家标准(GB)】 水果、蔬菜及制品 山梨酸含量的测定

中华人民共和国国家标准
水果、蔬菜及制品
山梨酸含量的测定
Fruits, vegetables and derived products -Determiantion of sorbic acid contentGB 12290—90
本标准参照采用国际标准ISO5519一1978《水果、蔬菜及制品山梨酸含量的测定》。1主题内容与适用范围
本标准规定了水果、蔬菜及制品中山梨酸的提取方法和提取物中山梨酸的两种测定方法。本标准适用于水果、蔬菜及制品中山梨酸的测定。2原理
匀化样品，存在于试样中的山梨酸通过蒸汽蒸馏，可定量地蒸出。所得馏出物在铜催化剂的作用下使二氧化硫氧化以除去干扰，然后用紫外分光光度法测定山梨酸含量，或者通过铬酸氧化后用硫代巴比妥酸处理得到粉红色溶液，用分光光度法测定。3试剂和溶液
本标准所用试剂均为分析纯试剂，使用蒸馏水或相应纯度的水。3.1酒石酸，结晶状，
3.2山梨酸标准溶液，0.01g/L：准确称取0.100g山梨酸溶于10~12mL0.1m01/L氢氧化钠溶液中，定量的移人1000mL容量瓶里，用水稀释至刻度。吸取上述溶液50.0mL置于500mL容量瓶中用水稀释至刻度；3.3氢氧化钙溶液：0.02mol/L，3.4铜催化剂溶液：
称取0.5g碳酸氢钠（GB640）和0.001g硫酸铜（GB665）（CuSO4·5H,O）用蒸馏水溶解并稀释至1 L。
3.5铬酸-硫酸溶液：
3.5.10.15mo1/L硫酸溶液：取8.4mL比重1.84g/mL的浓硫酸（GB625）加人水中，稀释至1L.
3.5.2铬酸-硫酸溶液：称取0.05g重铬酸钾（GB624）溶于90mL水，移人200mL容量瓶中，加人0.15mol／L硫酸溶液，用水稀释至刻度，3.6硫代巴比妥酸溶液：
称取0.500g硫代巴比妥酸溶于50mL水中。加人10mL1mo1/L氢氧化钠溶液，移至100mL容量瓶中，加人11mL1mol/L盐酸溶液，用蒸馏水稀释至刻度。该溶液不稳定，必须在配制后5h内使用。4仪器、设备
常用实验室仪器、设备。
4.1分析天半：感量0.001g，
国家技术监督局1990-03-29批准1990-12-01实施
4.2捣碎机或研钵，
4.3电热恒温水浴，
4.4蒸汽蒸馏装置，见下图：
蒸汽发生器
GB12290—90
分馏柱
起泡器
蒸汽蒸馏仪图
冷疑器
接收烧瓶
4.4.1蒸汽发生器：烧瓶容量为1000.1500mL，4.4.2起泡器：玻璃管直径30mm，高270mm下部封闭，末端扩大为直径60mm的球体，试样放在球体内，供气管末端与起泡器底部之间距离为10mm。用电炉或火焰加热均可，若用火焰加热时，起泡器底部应放在一个具有孔径为40mm金属板的孔上，使火焰反射，避免试样焦化。控制加热使起泡器中试样的体积的蒸馏期间减少或增加的量不超过5mL4.4.3分馏柱：直径20mm，高500mm的玻璃柱内装螺旋形100号不锈钢网，螺旋环间距15mm。或是直径20mm，高600mm具有玻璃定心孔的分馏柱。或是具有同等分馏功能的其他装置。4.4.4冷凝器：有效长度400mm，垂直放置，以保证蒸汽的冷凝和馏出物的完全冷却。4.4.5接收烧瓶：200、500mL容量瓶。4.4.6蒸馏装置效果检查：在正常蒸馏条件下，用20mL0.1mol/L乙酸溶液加人起泡器中，在15~20min内收集蒸馏液200mL，乙酸的回收率应达99.5%。4.5分光光度计：检测波长256nm或532nm。5分析步骤
5.1试样的制备
GB 12290-90
5.1.1液体样品（汁、液、糖浆等）和粘稠样品（果酱、菜泥等），将样品充分混合后匀化。5.1.2固体样品（水果、蔬菜）
将样品切成小块，检去种子和果壳，取约40g，在捣碎机或研钵中（4.2）使其匀化。冷冻的样品，首先在密闭容器中融化，将融化的液体与样品合并后匀化。5.2试样的分取
5.2.1液体样品
吸取10.0mL试样（5.1.1）放到起泡器（4.4.2）里。或称取试样10g，精确至0.01g。5.2.2粘稠或固体样品
称取10g试样（5.1.1）精确至0.01g，放人起泡器（4.4.2）里，加水量至少需要淹没全部样品，摇勾，使其充分液化。若需要可将试样在水里浸泡1～2 h。5.3蒸馏
将0.5g酒石酸（3.1）放进盛有试样的起泡器里，把起泡器与烧瓶（4.4.1）和冷凝器（4.4.4）连结，同时加热烧瓶和起泡器，进行蒸馏，保持起泡器内容物体积增减在5mL以内。5.3.1对液体样品（5.2.1），收集蒸馏液于200mL的容量瓶（4.4.5）内，当达到刻度时，停止蒸馏。免费标准bzxz.net
5.3.2对粘稠或固体样品（5.2.2），收集蒸馏液于500mL容量瓶（4.4.5）内，蒸馏液的体积至少比起泡器内容物体积大20倍。
5.4测定
5.4.1方法A：用紫外分光光度法测定5.4.1.1如果原产品含有大蒜、洋葱、韭菜的香精油时，为消除香精油的吸光度，用移液管取25mL蒸馏液（5.3）移人小蒸发血中，加1.5~2.0mL的氢氧化钙溶液（3.3）使其呈碱性，在沸水浴（4.3）上蒸十，然后用蒸馏水溶解残渣使其恢复到原来的体积。5.4.1.2吸取10.0mL蒸馏液（5.3）或蒸干后重新得到的溶液（5.4.1.1）置于50mL锥形瓶内，加10mL铜催化剂（3.4），摇动，静置与空气接触几分钟。以试剂空白作对照，于分光光度计（4.5）256nm波长处测定溶液的吸光度。注：通常分取10.0mL，相当于200mg/L或kg，对于高含量的样品只取5.0或2.0mL用水稀释至10.0mL5.4.1.3标准曲线的绘制
吸取山梨酸标准溶液（3.2)0.0、1.0、2.0、3.0、5.0、10.0mL分别置人50mL锥形瓶中，相应加人蒸馏水10.0、9.0、8.0、7.0、5.0、0.0mL使体积为10mL，所得溶液的浓度为：0、1、2、3、5、10mg/L的山梨酸，分别向每瓶中加铜催化剂10mL。以试剂空白为对照，于分光光度计256nm波长处测定溶液的吸光度。以山梨酸的含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。5.4.2方法B：分光光度法
5.4.2.1如果原产品中含乙醇，吸取25mL的蒸馏液（5.3）移人小蒸发皿中，加1.5～2.0mL的氢氧化钙溶液使之呈碱性，在沸水浴上蒸发到原体积的一半，用蒸馏水冲洗Ⅲ，定量转移至25mL的容量瓶中，定容、摇匀。
如果原产品含（柑桔、大蒜、洋葱、韭菜的）香精油时，可按步骤5.4.1.1进行。5.4.2.2吸取10.0mL蒸馏液（5.3）或经处理制得的溶液（5.4.2.1）于25mL容量瓶中，加人4mL铬酸-硫酸溶液（3.5），放人沸水浴中10min。加4mL硫代巴比妥酸溶液（3.6），再置沸水浴中20min。溶液呈粉红色，取出放在冰水浴中冷却，用蒸馏水稀释至刻度。同时按上述方法制备试剂空白溶液。在30min内，以试剂空白作对照，于分光光度计532nm波长处测定溶液的吸光度。5.4.2.3标准曲线的绘制
配制2.0mg/L山梨酸标准液，用4体积水稀释1体积的标准溶液（3.2）。吸取该液0.0、2.0、165
GB 12290—90
4.0、6.0、8.0、10.0mL分别置人6个25mL的容量瓶内，相应加人水10.0、8.0、6.0、4.0、2.0、0.0mL，使体积至10mL，所得标准系列的浓度为0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0mg/L山梨酸。以下步骤按试样的测定（5.4.2.2）进行。以山梨酸的含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。6分析结果表示
6.1计算方法和公式
6.1.1液体样品
山梨酸含量以mg/L表示，按式（1）计算：山梨酸（mg/L）
式中： m1-
m1×200
在标准曲线上查得蒸馏液（5.3.1）中山梨酸的含量，mg/L在5.4.1.2或5.4.2.2中所取的体积，mL（见5.4.1.2“注”）。6.1.2粘稠或固体样品
山梨酸含量以mg/kg表示，按式（2）计算：山梨酸（mg/kg）\=m1×V×10.m.xV,
式中： ma-
6.2允许差
一试样的重量，g，
在标准曲线上查得蒸馏液（5.3.2）中山梨酸的含量，mg/L3收集蒸馏液的体积（5.3.2），mL，在5.4.1.2或5.4.2.2中所取的体积，mL（见5.4.1.2“注”）。同一人员对同一试样同时或连续两次测定结果之间差异不超过平均值的5%。附加说明：
本标准由中华人民共和国农业部提出，全国农业分析标准化技术委员会归口。本标准由中国农业科学院分析测试中心负责起草。本标准主要起草人李伟格、陈必芳。166
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