【地方标准】 饲料中喹烯酮的测定 高效液相色谱法

ICS 65.120 B46 DB43/T 1064—2015 饲料中喹烯酮的测定 高效液相色谱法 Determination of Quinocetone in Feeds — High performance liquid chromatographic method 2015-07-20发布 2015-09-20实施 湖南省质量技术监督局 发布 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009的规则编制。 本标准部分内容可能涉及专利，发布机构不承担识别责任。 本标准由湖南省畜牧水产局提出并归口。 本标准起草单位：湖南省兽药饲料监察所、湖南省畜禽水产品质量检验检测中心。 本标准主要起草人：欧阳龙、匡光伟、肖安东、徐丽枚、谭美英、陈启友、隆雪明、邓防、魏群、张俊波、周玉洁、江燕、邓均红。 1 范围 本标准规定了饲料中喹烯酮的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料及添加剂预混合饲料中喹烯酮的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料采样 GB/T 20195 动物饲料试样的制备 3 原理 采用乙腈提取试样中的喹烯酮，经固相萃取柱净化后，采用高效液相色谱-紫外检测法测定，以外标法定量。 4 试剂与材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T 6682一级水要求。 主要试剂与材料包括：甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱纯）、固相萃取柱（中性氧化铝，1000ng/6mL）、喹烯酮标准品（纯度≥98.0%）。 喹烯酮标准储备液：称取25mg标准品溶解定容至25mL，浓度1.0mg/mL，4℃以下避光保存，有效期3个月。 喹烯酮标准工作液：用标准储备液配制0.2、0.5、1.0、5.0、10、50μg/mL系列标准液，现配现用。 微孔滤膜：0.22μm有机膜。 5 仪器与设备 高效液相色谱仪（配紫外或二极管阵列检测器）、分析天平（0.00001g及0.001g）、离心机（≥10000r/min）、超声波清洗机等。 6 采样与试样制备 采样按GB/T 14699.1执行。 试样制备按GB/T 20195执行。 7 测定步骤 7.1 提取 称取试样2.5g，加入25.0mL乙腈，超声提取10min，静置后10000r/min离心5min，取上清液备用。 7.2 净化 上清液通过中性氧化铝固相萃取柱，弃初滤液，收集滤液，经0.22μm滤膜过滤后待测。 7.3 高效液相色谱条件 色谱柱：C18柱（250mm×4.6mm，5μm或等效柱） 流动相：甲醇:水=60:40 流速：1.0mL/min 进样量：10μL 检测波长：314nm 7.4 试样测定 以保留时间定性，以峰面积外标法定量，保证标准与样品响应值在线性范围内。 8 结果计算 试样中喹烯酮含量按外标法计算，结果以两次平行测定的平均值表示，保留三位有效数字。