【国家标准】 防霉剂防治木材霉菌及蓝变菌的试验方法

前 言

本标准非等效采用日本木材保存协会标准第2号1979——杀菌剂防霉和边材变色效力试验方法〔Japan Wood Preserving Association Standard (2) 1979—Method for Testing Effectiveness of Fungicides against Sapstain and Mould Fungi〕。

本标准的附录A是标准的附录。

本标准由中国木材标准化技术委员会提出并归口。

本标准起草单位：中国林业科学研究院热带林业研究所、中国林业科学研究院木材工业研究所。

本标准主要起草人：施振华、周明、骆土寿。

中华人民共和国国家标准

防霉剂防治木材霉菌
及蓝变菌的试验方法 GB/T 18261—2000

Testing method for anti-mould chemicals in controlling mould
and blue stain fungi on wood

1 范围

本标准规定了防霉剂防治木材霉菌及蓝变菌的实验室及野外试验方法。

本标准适用于实验室测定防霉剂对木材霉菌及蓝变菌的毒性及野外试验评估防霉剂防治木材霉菌及蓝变菌的效果。木制品、人造板、竹材及藤类的防霉和防蓝变试验亦可参照使用。

2 定义

本标准采用下列定义。

2.1 防霉剂 anti-mould chemicals

防治木材霉菌与蓝变菌的化学药剂。

2.2 木材霉菌 wood mould fungi

侵害木材的霉菌类真菌。

2.3 木材蓝变菌 wood blue stain fungi

侵害木材的蓝变菌类真菌。

2.4 毒性极限浓度 toxic limits concentration

木材防霉剂有效抑制霉菌与蓝变菌侵害木材的最低有效浓度。

3 实验室试验

3.1 试验设备

3.1.1 蒸汽高压灭菌器：压力 0.25 MPa，温度 138℃。

3.1.2 超净工作台，或无菌箱、接种室等。

3.1.3 摇床。

3.1.4 电热恒温培养箱，或培菌室。

3.1.5 天平，感量 0.01 g。

3.2 试样制备

3.2.1 试样树种

采用最容易蓝变和长霉的马尾松（Pinus massoniana Lamb.）或橡胶树（Hevea brasiliensis (H.B.K.) Muell.-Arg.）分别代表针叶树木材和阔叶树木材。

3.2.2 试样制备

取马尾松或橡胶树一种 2～3 株树，胸径 20～30 cm，每株树在胸高部位向上取长 1.2 m 试材一段。试样从新鲜边材中选取，要求无节、无虫蛀、无蓝变、无霉斑，马尾松有明显树脂集中现象的锯材不宜选。

3.3 试菌

3.3.1 蓝变菌：可可球二孢 Botryodiplodia theobromae Pat.

3.3.2 霉菌：黑曲霉 Aspergillus niger V. Tiegh
桔青霉 Penicillam citrinum Thom
绿色木霉 Trichoderma viride Pers. ex Fr.

3.4 药剂处理

3.4.1 药液配制

水载型防霉剂用普通自来水稀释，有机溶剂型防霉剂用甲苯或其他合适的溶剂溶解和稀释。药液浓度以质量百分比计算，并注明有效成分浓度。易分层或沉淀的药液，应在规定的使用期内使用。一种药剂至少设5个梯度浓度，其中2个浓度低于极限浓度。最好先做预备试验，以便估计极限浓度的大致范围，除试验的防霉剂外，通常还以五氯酚钠作对比试验，设3～5个梯度浓度，其中1～2个梯度浓度和试验药剂的浓度相同。

3.4.2 试样的药剂处理

每一个浓度至少有6块试样。处理前先逐块编号；测量长、宽和厚度尺寸，准确至0.1mm；称量，准确至0.01g。采用冷浸法处理，将同一组的试样放在烧杯中井字形堆放，重物压顶，防止浮动，倒入药液，液面高出材堆顶面2cm。浸渍3min后取出，擦掉表面流动水分后立即称量。吸药量按式(1)计算。

R = \frac{(m_2 - m_1) \times c}{2(HW + WL + HL)} \times 10^6

……………………………………………………(1)

式中：$R$——吸药量，g/m²；
$m_1$——浸渍前质量，g；
$m_2$——浸渍后质量，g；
$H$——试样厚度，mm；
$L$——试样长度，mm；
$W$——试样宽度，mm；
$c$——药液浓度($m/m$)，%。

3.5 试菌的接种与培养

3.5.1 马铃薯、葡萄糖、琼脂平板培养基制备

洗净去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000mL，煮沸30min后过滤，在滤液中加入葡萄糖20g、琼脂20～25g，加水补足至1000mL，再加热，待琼脂溶化后分装在3个500mL细口三角瓶内，瓶口加棉花塞并包防水纸，置于蒸汽灭菌器中，压力0.1MPa，温度121℃，灭菌30min。灭菌后的培养基先放于无菌室或超净台上冷却至不烫手时，倒入已灭菌的培养皿(直径10cm)中，每个培养皿15mL～20mL，制成平板培养基备用。

3.5.2 试菌的培养

在无菌条件下，将供试菌接种在平板培养基上，每一种试菌不少于3个培养皿。置于培养箱中保持25～28℃、相对湿度85%，培养1周，即可用于配制孢子与菌丝体的悬浮液。

3.5.3 菌丝体与孢子悬浮液的配制

在无菌条件下用接种针挑取供试菌的菌丝体及孢子，挑取时应沿菌落的前缘向内连培养基一起切割，放入已灭菌的组织研磨器内，加适量无菌水，适当磨碎后倒入已灭菌的有玻璃珠的三角瓶内，加少量无菌水，放在摇床上(转速100～120r/min)震荡，转10～15min制成悬浮液供接种用。

3.5.4 试菌的接种与培养