【国家标准】 畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定(高效液相色谱法)

ICS 67.040

C 53

中华人民共和国国家标准

GB/T 5009.116—2003
代替 GB/T 14931.1—1994

畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素
残留量的测定（高效液相色谱法）

Determination of oxytetracycline, tetracyline and
chlortetracycline residues in meat (HPLC)

2003-08-11发布 2004-01-01实施

中华人民共和国卫生部
中国国家标准化管理委员会 发 布

前 言

本标准代替 GB/T 14931.1—1994《畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量测定方法（高效液相色谱法）》。

本标准与 GB/T 14931.1—1994 相比主要修改如下：

• ——修改了标准的中文名称,标准中文名称改为《畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定（高效液相色谱法）》；
• ——按 GB/T 20001.4—2001《标准编写规则 第 4 部分：化学分析方法》对原标准的结构进行了修改。

本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。

本标准起草单位：辽宁省食品卫生监督检验所、大连卫生检疫所、沈阳市卫生防疫站、辽宁省卫生职工医学院。

本标准主要起草人：翟永信、阎勇、卫峰、吴伯禄、马勇。

原标准于 1994 年首次发布，本次为第一次修订。

畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素
残留量的测定(高效液相色谱法)

1 范围

本标准规定了畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的检测方法。

本标准适用于各种畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定。

本标准检出限为土霉素 $0.15 \text{ mg/kg}$，四环素 $0.20 \text{ mg/kg}$，金霉素 $0.65 \text{ mg/kg}$。

2 原理

试样经提取，微孔滤膜过滤后直接进样，用反相色谱分离，紫外检测器检测，与标准比较定量，出峰顺序为土霉素、四环素、金霉素。标准加法定量。

3 试剂

3.1乙腈(分析纯)。

3.2$0.01 \text{ mol/L}$磷酸二氢钠溶液：称取 $1.56 \text{ g}$ (精确到 $\pm 0.01 \text{ g}$)磷酸二氢钠($\text{NaH}_2\text{PH}_4 \cdot 2\text{H}_2\text{O}$)溶于蒸馏水中，定容到 $100 \text{ mL}$，经微孔滤膜($0.45 \mu\text{m}$)过滤，备用。

3.3土霉素(OTC)标准溶液：称取土霉素 $0.010 \text{ 0 g}$ (精确到 $\pm 0.000 \text{ 1 g}$)，用 $0.1 \text{ mol/L}$盐酸溶液溶解并定容 $10.00 \text{ mL}$，此溶液每毫升含土霉素 $1 \text{ mg}$。

3.4四环素(TC)标准溶液：称取四环素 $0.010 \text{ 0 g}$ (精确到 $\pm 0.001 \text{ g}$)，用 $0.01 \text{ mol/L}$盐酸溶液溶解并定容 $10.00 \text{ mL}$，此溶液每毫升含四环素 $1 \text{ mg}$。

3.5金霉素(CTC)标准溶液：称取金霉素 $0.010 \text{ 0 g}$ (精确到 $\pm 0.000 \text{ 1 g}$)，溶于蒸馏水并定容成 $10.00 \text{ mL}$，此溶液每毫升含金霉素 $1 \text{ mg}$。

以上标准品均按 $1\,000$单位$/\text{mg}$折算。3.3~3.5溶液应于 $4^\circ\text{C}$以下保存，可使用 $1$周。

3.6混合标准溶液：取 3.3、3.4 标准溶液各 $1.00 \text{ mL}$，取 3.5 标准溶液 $2.00 \text{ mL}$，置于 $10 \text{ mL}$容量瓶中，加蒸馏水至刻度。此溶液每毫升含土霉素、四环素各 $0.1 \text{ mg}$，金霉素 $0.2 \text{ mg}$，临时时现配。

3.7$5\%$高氯酸溶液。

4 仪器

高效液相色谱仪(HPLC)：具紫外检测器。

5 色谱条件

5.1柱：$\text{ODS-C}_{18}(5 \mu\text{m})6.2 \text{ mm} \times 15 \text{ cm}$。

5.2检测波长：$355 \text{ nm}$。

5.3灵敏度：$0.002\text{AUFS}$。

5.4柱温：室温。

5.5流速：$1.0 \text{ mL/min}$。

5.6进样量：$10 \mu\text{L}$。

5.7流动相：乙腈+$0.01 \text{ mol/L}$磷酸二氢钠溶液(用 $30\%$硝酸溶液调节 $\text{pH}2.5$)=$35+65$，使用前用超声波脱气 $10 \text{ min}$。