【其他行业标准】 苏云金杆菌原粉

HG 3616—1999 中华人民共和国化工行业标准 苏云金杆菌原粉（Bacillus thuringiensis technical） 苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis，B.t.）是目前应用最广泛的一种微生物杀虫剂，其主要杀虫成分为伴孢晶体中的毒素蛋白，其中对鳞翅目有毒力的蛋白相对分子质量为130000。 1 范围 本标准规定了苏云金杆菌原粉的要求、试验方法以及标志、标签、包装、贮运。本标准适用于防治鳞翅目害虫的苏云金杆菌原粉。 2 引用标准 下列标准所包含的条文通过在本标准中引用而构成本标准的条文。本标准出版时所示版本均为有效，所有标准均会被修订，使用本标准的各方应探讨使用最新版本的可能性。 GB/T 1250—1989 极限数值的表示方法和判定方法 GB/T 1600—1979（1989） 农药水分测定方法 GB/T 1601—1993 农药pH值的测定方法 GB/T 1604—1995 商品农药验收规则 GB/T 1605—1979（1989） 商品农药采样方法 GB 3796—1983 农药包装通则 GB/T 16150—1995 农药粉剂、可湿性粉剂细度测定方法 3 要求 3.1 外观：灰白色至棕褐色粉末。 3.2 苏云金杆菌原粉应符合表1要求。 表1 苏云金杆菌原粉控制项目指标：毒素蛋白（%）、毒力效价、pH值、水分（%）、细度（45μm，%）。 一等品指标：毒素蛋白≥7.0%，毒力效价≥50000，pH值5.5~7.0，水分≤6.0%，细度≥98%。 合格品指标：毒素蛋白≥6.0%，毒力效价≥40000，pH值5.5~7.0，水分≤6.0%，细度≥98%。 注：Px和Ha分别为小菜蛾（Plutella xylostella）和棉铃虫（Heliothis armigera）的缩写。 4 试验方法 除另有说明外，本方法所用试剂均为分析纯，所用溶液均为水溶液。 4.1 抽样：按GB/T 1605—1979（1989）“原粉采样”进行，用随机数表法确定包装件，抽样量不少于100g。 4.2 鉴别试验：当生物测定法评价产品质量产生疑问时，可采用SDS-PAGE方法测定有效毒素蛋白相对分子质量是否为130000，并测定其含量是否符合规定。 4.3 毒素蛋白含量测定方法：可采用SDS-PAGE-扫描法或SDS-PAGE-洗脱比色法，两者精密度接近，其中扫描法为仲裁法。 4.3.1 SDS-PAGE-扫描法（仲裁法） 方法提要：用碱性溶液处理原粉伴孢晶体，使其降解为毒素蛋白，经SDS-PAGE分离后，根据蛋白区带面积进行定量分析。 仪器设备包括电泳仪、垂直电泳槽、薄层扫描仪或电泳图像扫描仪、离心机（10000 r/min）、分析天平（0.0001g）。 试剂包括过硫酸铵（AP）、十二烷基硫酸钠（SDS）、四甲基乙二胺（TEMED）、氢氧化钠、丙烯酰胺溶液及各类Tris-HCl缓冲液等。