【国家标准】 食品安全国家标准 食品接触材料及制品 月桂内酰胺迁移量的测定

中华人民共和国国家标准
GB31604.56—2023
食品安全国家标准
食品接触材料及制品
月桂内酰胺迁移量的测定
2023-09-06发布
中华人民共和国国家卫生健康委员会国家市场监督管理总局
2024-03-06实施
1范围
食品安全国家标准
食品接触材料及制品
月桂内酰胺迁移量的测定
本标准规定了食品接触材料及制品中月桂内胺迁移量的测定方法。本标准适用于聚酰胺类食品接触材料及制品中月桂内酰胺迁移量的测定。第一法
液相色请法
2原理
GB31604.56—2023
食品接触材料及制品进行迁移试验后，采用液相色谱检测。其中水性、酸性、含乙醇食品模拟物及化学替代溶剂95%（体积分数）乙醇经过滤后直接进样：含油脂食品模拟物经液液萃取和固相萃取后过滤进样：化学替代溶剂异辛烷通过去除溶剂和乙睛复溶后过滤进样，保留时间定性，外标法定量。试剂和材料
除非另有说明·本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂
酸性、含乙醇、含油脂食品模拟物和化学替代溶剂：所用试剂按照GB5009.156的规定乙睛（CHN）：色谱纯。
甲酸（CHO）：色谱纯。
氨水：氨的质量分数为25%~28%，无水乙醇（C,HO)。
试剂配制
甲酸-水溶液：量取5.0mL甲酸和95mL水.混匀。氨水-乙晴溶液：量取2.0mL氨水、8.0mL水和90ml乙睛.混勺甲酸-乙睛-水溶液：量取20mL乙睛和80mL水，吸取100l甲酸，混勾。3.3
标准品
月桂内酰胺标准品（CHmNO.CAS：947-04-6.又称十二内酰胺或氮杂环十三烷-2-酮）：纯度≥98%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质3.4标准溶液配制
月桂内胺标准储备落液（1000mg/L）：称取100mg（精确至0.1mg）月桂内酰胺标准品.用GB31604.56—2023
无水乙醇溶解后定容至100ml.摇匀。将溶液转移至棕色玻璃容器中，于4℃避光保存，有效期3个月。
3.4.2月桂内酰胺标准中间溶液（200mg/L）：移取5.0mL月桂内酰胺标准储备溶液至25mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度摇匀。将溶液转移至棕色玻璃容器中，于4℃避光保存有效期3个月。3.4.3水性、酸性、含乙醇食品模拟物或95%（体积分数）乙醇标准工作溶液：分别移取月桂内酰胺标准中间溶液0.50mL、1.0mL2.5mL.5.0mL、10mL至100mL容量瓶中，用相应水性、酸性、含乙醇食品模拟物或95%（体积分数）乙醇定容至刻度.配制浓度分别为1.0mg/L.2.0mg/L.5.0mg/L10mg/L和20mg/L的标准工作溶液。临用现配。3.4.4含油脂食品模拟物标准工作溶液：称取2g（精确至0.01g）橄榄油.分别加人20L、30山50μL月桂内酰胺标准中间溶液和20L、40L月桂内酰胺标准储备溶液，混，配制成浓度分别为2.0mg/kg.3.0mg/kg、5.0mg/kg10mg/kg和20mg/kg的标准工作溶液。临用现配。上机前按照5.1.3与含油脂食品模拟物浸泡液同步处理3.4.5异辛烷标准工作溶液：分别移取月桂内酰胺标准中间溶液0.50mL、1.0mL、2.5mL5.0mL、10mL至100mL容量瓶中.用异辛烷定容至刻度，标准工作溶液的浓度分别为1.0mg/L、2.0mg/L、5.0mg/L、10mg/L和20mg/L。临用现配。上机前按照5.1.4与异辛烷浸泡液同步处理。4仪器和设备
高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器或紫外检测器。4.2
可调移液器：量程10L100L和量程100l1000pl分析天平：感量00001g（0,1mg）和感量0.01g。4.3
有机微孔滤膜：0.45μm。
涡旋混合器。
离心机。
氮气浓缩装置。
固相萃取装置。
混合型阳离子固相萃取小柱或等效净化柱：150mg/6ml。分析步骤
试液的制备
5.1.1迁移试验
食品接触材料及制品按照GB5009.156和GB31604.1的要求开展迁移试验得到浸泡液。5.1.2水性、酸性、含乙醇食品模拟物和95%（体积分数）乙醇试液移取1mL~2mL迁移试验得到的水性、酸性、含乙醇食品模拟物和95%（体积分数）乙醇浸泡液通过微孔滤膜过滤后供测定。
5.1.3含油脂食品模拟物试液
称取2g（精确到0.01g）含油脂食品模拟物浸泡液于15ml离心管中，加人4.0mL乙.涡旋振荡提取10min，以8500r/min离心2min，取上清液。重复提取浸泡液一次，合并两次提取液，在45℃下氮吹浓缩至约0.5ml，用4.0mL甲酸-水溶液复溶后·转移至用3.0mL乙睛、纯水、甲酸-水溶液活化GB31604.56-2023
的混合型阳离子固相萃取小柱。用3.0mL甲酸-水溶液、乙睛依次淋洗，用3.0mL氨水-乙腈溶液洗脱。洗脱液在45℃下氮吹至干，加人1.0mL甲酸-乙睛-水溶液，涡旋1min复溶，微孔滤膜过滤后供测定。www.bzxz.net
5.1.4异辛烷试液
移取1.0mL迁移试验得到的异辛烷浸泡液，45℃下用氮气吹至干，加入1.0mL乙睛溶解残渣，微孔滤膜过滤后供测定。
5.1.5空白试液的制备
未与食品接触材料及制品接触的食品模拟物和化学替代溶剂按5.1.2、5.1.3和5.1.4处理，得到空白试液。
5.2仪器参考条件
仪器参考条件如下：
色谱柱：Cl柱，柱长250mm.柱内径4.6mm，粒径5um，或者同等性能的色谱柱；流动相：乙和水（50+50，体积比）：流速：1.0ml/min；
进样量：20L；
柱温：25℃
检测波长：210nm
5.3标准曲线的制作
按照5.2所列的仪器参考条件测定标准工作溶液。以标准工作溶液中月桂内酰胺的浓度为横坐标，以对应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。月桂内酰胺标准溶液的参考色谱图见附录A中图A.15.4试液的测定
按照5.2所列的仪器参考条件测定食品模拟物试液和空白试液，以保留时间定性，得到目标物峰面积根据标准曲线得到试液中月桂内酰胺的浓度。按第6章计算月桂内酰胺迁移量。食品模拟物试液色谱峰的保留时间与标准工作溶液色谱峰的保留时间偏差应在土2.5%范围内试液可根据具体情况稀释，使其测定值在标准曲线的线性范围内分析结果的表述
食品模拟物中月桂内酰胺迁移量的计算：食品模拟物中月桂内酰胺的迁移量按式（1)计算。X=(C-).N
式中：
X一食品模拟物中月桂内酰胺的迁移量，单位为毫克每升（mg/L）或毫克每千克（mg/kg）：C
食品模拟物试液中月桂内酰胺的含量，单位为毫克每升（mg/L）或毫克每千克（mg/kg）：c。-——空白试液中月桂内酰胺的含量，单位为毫克每升（mg/L）或毫克每千克（mg/kg）：N稀释倍数。
GB31604.56-—2023
6.2食品接触材料及制品中月桂内酰胺特定迁移量的计算6.2.1非密封制品类食品接触材料及制品月桂内酰胺特定迁移量的计算（以mg/kg表示）除了盖子密封圈、连接件等密封制品（以下简称密封制品）以外的食品接触材料及制品·月桂内酰胺特定迁移量以mg/kg表示时，按式（2）计算。V..s
式中：
....(2)
X一食品接触材料及制品中月桂内酰胺的特定迁移量，单位为毫克每千克（mg/kg）：V一迁移试验中试样浸泡液的体积或质量，单位为升（L）或千克（kg）S.一食品接触材料及制品实际使用时接触食品的面积，单位为平方分米（dm）：S，迁移试验中试样与浸泡液接触的面积，单位为平方分米（dm）：m一食品接触材料及制品实际使用时接触固态食品质量或液体食品体积对应的质量，单位为千克（kg）：各种液态食品按密度为1kg/L将体积换算为对应的质量。结果至少保留2位有效数字。
6.2.2密封制品类食品接触材料及制品月桂内酰胺特定迁移量的计算（以mg/kg表示）当预期用途已知时，密封制品类食品接触材料及制品·月桂内酰胺特定迁移量以mg/kg表示时·按式(3）计算。
式中：
X,=X..S..m
X，食品接触材料及制品中月桂内酰胺的特定迁移量，单位为毫克每千克（mg/kg）：V迁移试验中试样浸泡液的体积或质量，单位为升（L）或千克（kg）；S。—密封制品实际使用时接触食品的面积，单位为平方分米（dm）：S，迁移试验中试样与浸泡液接触的面积，单位为平方分米（dm）；（3）
：——密封制品实际配套使用容器盛装固态食品质量或液体食品体积对应的质量，单位为千克（kg）：各种液态食品按密度为1kg/L将体积换算为对应的质量。结果至少保留2位有效数字。
6.2.3密封制品类食品接触材料及制品月桂内酰胺特定迁移量的计算（以mg/件表示）当预期用途未知时·密封制品类食品接触材料及制品，月桂内酰胺特定迁移量以mg/件表示时.按式（4)计算，需注明采用的迁移试验方法、迁移试验中单个密封制品与食品模拟物接触的面积。X=X.
式中：
X—一食品接触材料及制品中月桂内酰胺的特定迁移量，单位为毫克每件（mg/件）：V迁移试验中试样浸泡液的体积或质量，单位为升（L）或千克（kg）一一迁移试验中浸泡用密封制品的数量，单位为件。结果至少保留2位有效数字。
（4）
7精密度
GB31604.56—2023
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%8其他
水性、酸性、含乙醇食品模拟物及化学替代溶剂95%（体积分数）乙醇与异辛烷中月桂内酰胺方法检出限为0.5mg/L，定量限为1.0mg/L。含油脂模拟物中月桂内酰胺方法检出限为1.0mg/kg，定量限为2.0mg/kg
食品接触材料及制品中月桂内酰胺特定迁移量的检出限与定量限，以食品模拟物中月桂内酰胺方法检出限与定量限为基础，按第6章换算。液相色谱-串联质谱法
第二法
9原理
食品接触材料及制品进行迁移试验后·采用液相色谱-串联质谱检测。其中水性、酸性、含乙醇食品模拟物及化学替代溶剂95%（体积分数）乙醇经过滤后直接进样：含油脂食品模拟物经液液萃取和固相萃取后过滤进样：化学替代溶剂异辛烧通过去除溶剂和乙睛复溶后过滤进样保留时间和相对离子丰度比定性，外标法定量。
试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水10.1试剂
同3.1。
2溶液配制
同3.2。
3标准品
标准溶液配制
10.4.1月桂内酰胺标准储备溶液（1000mg/L）：同3.4.1。10.4.2月桂内酰胺标准中间溶液（10mg/L）：移取月桂内酰胺标准储备溶液1mL于100mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，摇匀。将溶液转移至棕色玻璃容器中，于4℃避光保存，有效期3个月。10.4.3月桂内酰胺标准中间溶液（1.0mg/L）：移取月桂内酰胺标准储备溶液1mL于10ml容量瓶中.用无水之醇定容至刻度，摇匀。将溶液转移至棕色玻璃容器中，手4C避光保存.有效期3个月。10.4.4水性、酸性、含乙醇食品模拟物及95%（体积分数）乙醇标准工作溶液：分别准确移取0.30ml、5
GB31604.56-2023
0.50mL、1.0mL、5.0mL和10mL月桂内酰胺标准中间溶液（1.0mg/L）至100mL容量瓶中，用相应水性、性、含乙醇食品模拟物或95%（体积分数）乙醇定容至刻度，配制成0.003mg/L0.005mg/L、0.010mg/L、0.050mg/L、0.10mg/L的标准工作溶液。临用现配。5含油脂食品模拟物标准工作溶液：分别移取12L、20L、40L月桂内酰胺标准中间溶液10.4.5
（1.0mg/L）和10ml20L月桂内酰胺标准中间溶液（10mg/L），加人到2g（精确到0.01g）含油脂食品模拟物中，混匀.配制成0.006mg/kg、0.010mg/kg.0.020mg/kg.0.050mg/kg、0.10mg/kg的标准工作溶液。临用现配。上机前按照12.1与含油脂食品模拟物浸泡液同步处理，10.4.6异辛烷标准工作溶液：分别移取0.30mlL0.50ml.、1.0mL、5.0ml.和10mL月桂内酰胺标准中间溶液（1.0mg/L）至100mL容量瓶中，用异辛烷定容至刻度，标准工作溶液的浓度分别为0.003mg/L、0.005mg/L0.010mg/L0.050mg/L、0.10mg/L。临用现配。上机前按照12.1与异辛烷浸泡液同步处理。
仪器和设备
液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源（ESD)。可调移液器：量程为10μL~100μL和量程为100L～1000uL。分析天平：感量0.0001g（0.1mg）和感量0.01g。有机微孔滤膜：0.45um。
涡旋混合器。
离心机。
氨气浓缩装置。
固相萃取装置。
混合型阳离子固相萃取小柱或等效净化柱：150mg/6mL分析步骤
样品前处理
同5.1。
仪器参考条件
液相色谱条件
液相色谱参考条件如下：
色谱柱：C色谱柱.柱长100mm，柱内径2.1mm，粒径1.7μm，或者同等性能的色谱柱；流动相：A为含0.1%（体积分数）甲酸的水溶液，B为含0.1%（体积分数）甲酸的乙睛溶液，洗脱梯度见表1；
流速：0.3mL/min
柱温：40℃：
进样量：2μL。
时间/min
质谱条件
质谱参考条件如下：
梯度淋洗条件
离子化模式：电喷雾电离正离子模式（ESI+）；质谱扫描方式：多反应监测（MRM)：喷雾电压：5.500V；
雾化温度：500℃；
月桂内酰胺质谱条件参考表2。
化合物
月桂内酰胺
母离子(m/=）
月桂内酰胺质谱参考条件
子离子（m/）
碎裂电压/V
注：对于不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应优化质谐参数，为定量离子
定性测定
GB31604.56—2023
磷撞能量/eV
按照12.2所列仪器参考条件测定食品模拟物试液和标准工作溶液，判定试液中存在相应目标物应满足以下条件：
试液中目标化合物色谱峰保留时间与标准工作溶液中目标化合物色谱峰保留时间差异在±2.5%范围内：
选择的两组离子对的信号均出现：定性离子对的相对丰度与浓度相当的标准溶液的相对丰度偏差不超过表3的规定，表3
相对离子丰度/%
允许相对误差/%
定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差>50
GB31604.56-2023
标准曲线的制作
按照12.2所列的仪器参考条件测定标准工作溶液。以标准工作溶液中月桂内酰胺的浓度为横坐标，以对应峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。月桂内酰胺标准溶液多反应监测（MRM）参考色谱图见附录A中图A.2。
定量测定
按照12.2所列的仪器参考条件测定食品模拟物试液和空白试液，得到目标物峰面积，根据标准曲线得到试液中月桂内酰胺的浓度。按第13章计算月桂内酰胺迁移量。试液可根据具体情况稀释，使其测定值在标准曲线的线性范围内。分析结果的表述
同第6章。
14精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。15其他
水性、酸性、含乙醇食品模拟物及95%（体积分数）乙醇和异辛烷食品模拟物中月桂内酰胺的检出限为0.001mg/L，定量限为0.003mg/L。含油脂食品模拟物中月桂内酰胺的检出限为0.002mg/kg，定量限为0.006mg/kg
食品接触材料及制品中月桂内胺特定迁移量的检出限与定量限，以食品模拟物中月桂内酰胺方法检出限与定量限为基础，按第3章换算，8
附录A
月桂内酰胺标准溶液的色谱图
GB31604.56-2023
不同食品模拟物中月桂内酰胺标准溶液的液相色谱图见图A.1，液相色谱-串联质谱法MRM图见图A.2。
4%乙酸
50%乙醇
橄榄油
异辛烷
不同食品模拟物和化学替代溶剂中月桂内酰胺标准溶液（5mg/L或5mg/kg）的液相色谱图图A.1
GB31604.56-2023
4%乙酸
50%乙醇
橄榄油
异辛烷
198.2/97.0
198.2/97.0
198.2/97.0
198.2/97.0
不同食品模拟物和化学替代溶剂中月桂内酰胺标准溶液（0.05mg/L或0.05mg/kg）的MRM图
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